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人源肝癌细胞系中甲胎蛋白基因表达及甲基化的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:了解不同人源肝癌细胞系甲胎蛋白(AFP)基因表达及不同区域甲基化状态,探讨肝癌发生的表达遗传学调控机制。方法:采用亚硫酸氢盐-基因组测序(bisulfite-assisted genomic sequencing,BAGS)技术,检测人源HepG2、SMMC-7721肝癌细胞系和人成纤维细胞中AFP基因启动子区及CpG岛区的甲基化水平,RT-PCR检测基因的表达,并分析相关性。结果:HepG2细胞高表达AFP,SMMC-7721细胞低表达AFP,成纤维细胞不表达AFP;在启动子区,HepG2细胞的非甲基化修饰位点发生率较高,尤其是第一个和第二个CG位点,SMMC-7721细胞的甲基化程度较之高,而成纤维细胞甲基化程度整体很高;在CpG岛区,成纤维细胞的非甲基化修饰位点发生率较高,主要是第6个和第7个CG位点,SMMC-7721、HepG2细胞的甲基化程度较之高。结论:AFP基因启动子甲基化程度与基因表达水平存在负相关,AFP基因CpG岛甲基化程度与基因是否表达有关,AFP基因启动子低甲基化可能是AFP高表达的分子机制。 相似文献
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目的:靶向survivin基因中与caspase-3结合的部位合成反义寡核苷酸(ASODN)并将其转染至survivin表达阳性的HT29细胞中,观察HT29细胞中caspase-3的表达。方法:将survivin ASODN转染至HT29细胞中。噻唑蓝(Mar)法观察survivin ASODN的细胞毒作用,测定IC50;Hoechst 33342/PI双荧光染色,观察转染HT29细胞核变化;提取各组细胞总RNA,RT-PCR观察Caspase-3的表达。结果:不同浓度的survivin ASODN分别处理HT29细胞44h后,IC50值为1000nmol/L。1000nmol/L survivin ASODN处理HT29细胞36h后,荧光显微镜下可见凋亡小体。PCR产物经过琼脂糖凝胶电泳,紫外透射仪下明显观察到500bp条带,产物经过序列测定证实为Caspase-3。结论:survivin ASODN可显著抑制HT29细胞增殖,诱导其凋亡。Caspase-3基因表达是其诱导HT29细胞凋亡的机制之一。 相似文献
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武警救援医学人才培养的探索 总被引:3,自引:0,他引:3
救援医学是在世界灾害频发的大背景下产生的。目前,我国已经进入各类突发公共事件高发时期,必须加强医学救援体系的建设。我国医学院校救援医学人才培养相对滞后,救援医学人才严重缺乏,阻碍了我国医学救援事业的发展。加强武警救援医学人才培养的研究,有利于健全救援医学人才培养机制,更好地完成武警部队的医学救援任务,进一步完善我国的应急救援体系。 相似文献
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为了帮助学员改进学习方法,学会学习,学会思考,笔者在本院97本科学员队利用第二课堂,开展“学习方法探讨”廛座,经过初步实践,收到了良好的效果。并据调查、座谈的情况及作者的体会提出几点思考和建议。 相似文献
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5,7-0-异丙亚基-对甲基哥纳香醇甲诱导白血病K562细胞凋亡 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究5,7-0-异丙亚基-对甲基哥纳香醇甲对白血病细胞凋亡的影响。方法:体外培养白血病细胞K562,应用MTT法测定IC50,Hoechst33342/PI双荧光染色观察细胞核形态,透射电镜观察细胞凋亡情况。结果:5,7-0-异丙亚基-对甲基歌纳香醇甲处理K562细胞24h IC50约为10^-5mol/L,可观察到明显核固缩,凝集等细胞凋亡表现,透射电镜下观察到染色质凝集等改变。结论:5,7-0-异丙亚基-对甲基哥纳香醇甲可诱导K562细胞凋亡。 相似文献
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目的利用基因芯片检测青蒿琥酯作用于K562细胞后的基因表达情况,从基因水平上探讨青蒿琥酯抑制K562细胞增殖的作用机制。方法K562细胞经不同浓度青蒿琥酯处理24h,倒置光显微镜和荧光显微镜观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测细胞周期变化。提取总RNA,逆转录生成cDNA,cDNA与基因芯片杂交,扫描仪检测杂交结果。结果倒置光显微镜观察到青蒿琥酯处理的K562:细胞出现不同程度的皱缩,核分裂相减少,细胞密度下降,漂浮细胞增多。荧光显微镜观察到青蒿琥酯处理的K562:细胞染色质高度浓缩、边缘化,凝聚成明亮的团块,即凋亡小体。流式细胞仪检测青蒿琥酯处理K562细胞G2期细胞的比例明显增加。扫描信号,分析数据显示10条基因表达有差异,p21、chk1表达上调,cyclinB1、cyclinE1、E2F1、DNA-PK、hTERT、bcl-2、jnk、VEGF表达下调。结论青蒿琥酯可以抑制K562细胞增殖,作用机制与改变细胞周期某些调控物质的基因表达、诱导K562细胞凋亡有关。 相似文献
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营养因素对哺乳动物成纤维细胞谷胱甘肽S—转移酶的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
体外培养幼年仓鼠肾成纤维细胞(BHK—21/C13)发现,谷胱甘肽S—转移酶(GST)的活性受多种因素的修饰。在含10%胎牛血清(FCS)的培养基中培养72.96和120h,该酶的相对活性分别为84%、100%和131%;在96h换新鲜培养液,并继续培养24h,酶的活性相当于未换培养液组的75%;培养基中FCS的含量降低50%、酶的活性升高一倍。进一步研究抗氧化性营养物质对GST活力的影响发现:维生素E(14μmol/L)使此酶活性稍有降低,但不显著;微量元素硒(0.1μmol/L)则使该酶的活力降低22%。用马来酸二乙酯(DEM)耗竭70%谷胱甘肽(GSH),酶的活性升高33%。推论:GST的活力可望成为营养不良,甚或慢性氧化应激的定量评价指标之一。 相似文献
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救援医学人才培养的特点和途径 总被引:1,自引:5,他引:1
20世纪以来,全球灾害形势严峻.自然灾害、事故灾害、公共卫生事件和社会安全事件等各类突发事件有增无减,严重影响了人类的生存与发展,并在全球范围内有继续恶化的趋势.面对“9.11”、SARS、禽流感和印尼海啸等重大灾难,世界各国都加强了应对策略和措施的研究,我国也于2006年1月颁布实施了<国家突发公共事件总体应急预案>. 相似文献
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高等教育与社会的发展变化相平行 ,社会的不断发展与变革 ,为高等教育不断提出新的课题。当前 ,人类社会正在发生着深刻的变化 ,知识经济时代正在向我们走来 ,高新技术大量涌现 ,科学技术朝着既高度分化又高度综合、以高度综合为主的方向发展。这些使我国的高等教育特别是武警医学教育再一次面临严峻的挑战 ,我们不得不认真思考这些问题。1 当前武警医学教育教学中存在的主要问题从总体上看 ,当前我国高等医学教育存在的主要弊端是 :人文品位过弱、培养口径不宽、创新意识不强、共性制约过强 ,这些问题在武警医学教育中也有不同程度的存在… 相似文献
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维甲酸对胃癌细胞生长抑制及凋亡的诱导作用 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:研究9-顺-维甲酸(9-cis-RA)对人胃低分化黏液腺癌细胞(MGC80-3)的作用。方法:MTT比色法观察9-cis-RA对MGC80-3细胞株的生长抑制作用,倒置显微镜观察细胞形态变化,Hoechst33342/PI双荧光染色和DNA凝胶电泳技术分析细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期的改变。结果:9-cis-RA可抑制MGC80-3细胞生长,半数抑制浓度(IC50)为8·07×10-6mol/L;显微镜观察可见细胞凋亡特征性改变;10-5mol/L浓度的9-cis-RA药物作用后96h可明显诱导MGC80-3细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳检测到DNA梯带;流式细胞仪检测肿瘤细胞出现典型亚二倍体凋亡小峰,G0/G1期细胞百分率明显升高,由对照组的(61·5±2·2)%增加到(74·3±4·7)%,F=149·795,P=0·000;同时处于S期的细胞数减少,由对照组的(26·3±1·3)%减少到(17·2±1·4)%,F=143·936,P=0·000。细胞周期出现G1期阻滞。结论:9-cis-RA对MGC80-3细胞有明显的生长抑制和诱导凋亡作用。 相似文献