调经活血汤对多囊卵巢大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响及机制研究

目的 研究调经活血汤对多囊卵巢(PCO)大鼠的血清激素水平、卵巢质量、形态及卵巢颗粒细胞凋亡等的影响,探讨其治疗效果及作用机制.方法 大鼠造模成功后随机分成中药治疗组和对照组,观察动物体重增加幅度、血清激素水平变化情况,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)观察卵巢颗粒细胞凋亡,免疫组化法观察颗粒细胞凋亡调控蛋白Bcl-2、Bax表达水平的变化.结果 治疗组动物体重增加幅度明显降低,中药治疗组血清T浓度较对照组、正常组显著性降低;血清E2较对照组明显降低;血清P水平较对照组明显升高,血清FSH、LH浓度与对照组无明显差异.中药治疗组卵巢镜下可见多个囊状扩张的卵泡,但体腔较对照组明显缩小,颗粒细胞层数增加至4～7层,并可见少量黄体形成;中药治疗组卵巢颗粒细胞凋亡率较对照组显著降低,卵巢颗粒细胞Bcl-2表达的OD值较对照组显著增高,Bax表达的OD值显著降低.结论 调经活血汤能使多囊卵巢大鼠卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白bcl-2表达明显升高,Bax表达明显降低,巢颗粒细胞凋亡率显著性降低;卵巢颗粒细胞层数增加,黄体形成增加:体重、血清T、E2激素水平明显下降,血清P激素水平明显升高,其作用可能与调节卵巢颗粒细胞上Bcl-2和Bax蛋白表达,影响两蛋白的比例关系,增加Bcl-2/Bax的比值,使Bax与Bcl-2蛋白形成异源二聚体,发挥其抗细胞凋亡的作用有关.     

丹参酮Ⅱ A联合顺铂对Hela细胞生长及p53蛋白表达水平的影响

目的:研究丹参酮Ⅱ A联合顺铂在体外对宫颈癌Hela细胞生长的影响及细胞中p53蛋白表达水平的变化。方法:采用MTT法测定丹参酮Ⅱ A联合顺铂对Hela细胞增殖的影响;HE染色法观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测药物作用后的细胞凋亡情况;Western Blot测定p53蛋白水平的表达。结果:丹参酮ⅡA联合顺铂用药组比同等剂量的两药单用组及对照组对Hela细胞的增殖抑制率高(P<0.05);对照组细胞未见凋亡,而两药单用组及联合组均可见细胞凋亡;药物处理组均可检测到细胞亚G1峰,两药联合组细胞亚G1峰与单药组差异显著;在只含溶媒组、丹参酮Ⅱ A组、顺铂组及丹参酮Ⅱ A联合顺铂组中p53蛋白水平表达逐步升高。结论:丹参酮Ⅱ A联合顺铂比两药单用能显著抑制Hela细胞的生长;二者通过增加p53蛋白的表达,促进细胞凋亡。     

输卵管腹腔镜术后局部预后2例报道

近年来随着腹腔镜在妇科临床应用的迅速发展,使输卵管妊娠由创伤较大的剖腹手术向微创的腹腔镜手术转化,成为异位妊娠手术治疗的第3次突破[1].而且技术越来越成熟,目前已经成为输卵管妊娠最受欢迎的首选治疗方案.随着不孕症发生率的增加,腹腔镜与宫腔镜联合用于不孕症患者的诊断与治疗也逐渐上升.但对腹腔镜诊治术后输卵管局部预后的报道甚少.近期本院收治了2例妊娠前曾行输卵管腹腔镜手术的患者,现报告如下.     

HPV16感染患者外周血中Treg/Th17细胞平衡偏移的表达意义

目的探讨HPV16感染患者外周血中Treg/Th17细胞平衡偏移的表达意义,为HPV的细胞免疫治疗提供参考依据。方法选取上海市浦东新区人民医院2014年8月-2017年1月门诊或住院部宫颈细胞学正常,HPV阴性或单一HPV16阳性患者为研究对象,采用宫颈TCT对所有研究对象进行细胞学检测,反向斑点杂交技术进行HPV亚型分析及实时荧光PCR(RTPCR)进行HPV16 DNA定量;采用流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中Th17细胞及Treg细胞的表达频率。上述试验每3个月重复1次。按照HPV16感染结局的不同,将研究对象分为三组:第一组为HPV阴性组,即连续1年检测HPV均为阴性;第二组为HPV16阳性,但在1年内HPV逐渐被清除,简称HPV16感染清除组;第三组为HPV16阳性,但在1年后HPV16持续存在,简称HPV16感染持续组。结果与HPV阴性组对照相比,HPV16阳性患者Treg/Th17平衡表达向Th17明显偏移,差异有统计学意义(P0.05);在HPV16感染持续组Treg/Th17平衡表达向Th17持续偏移,而HPV16感染清除组Treg/Th17平衡表达由初始感染时的向Th17偏移逐渐转向Treg偏移,HPV感染转阴时Treg/Th17平衡以Treg细胞占优势。结论 Treg/Th17细胞平衡由向Th17偏移转为向Treg偏移可能预示着HPV16病毒的逐渐清除,同时如果持续性向Th17偏移则可能预示着HPV16的持续性感染。     

妊娠合并Evans综合症1例

35岁孕妇,孕2产1,因"停经37"周,不规则腹痛4 h,肉眼血尿2 h"于2008年10月21日入院.平素月经规律.末次月经2008年2月1日.停经2个月余出现鼻衄,量较多,约150 mL,此后反复多次发作,随后面色渐黄,伴头晕、心慌、乏力等不适.停经6个月余因再次鼻衄就诊于当地县医院诊断为"贫血、血小板减少",给予输血治疗后好转出院.     

丹参酮ⅡA联合顺铂对Hela细胞的凋亡作用

目的研究丹参酮ⅡA(Tan ⅡA)联合顺铂(DDP)在体外对宫颈癌Hela细胞的凋亡作用及凋亡蛋白Bax与Bcl-2表达水平的变化。方法采用苏木素-伊红染色法观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测药物作用后的细胞凋亡情况;Western Blot测定Bax与Bcl-2蛋白在Hela细胞中的表达水平。结果对照组细胞未见凋亡,而两药单用组及联合组均可见凋亡细胞;除对照组外其他各组均可检测到细胞亚二倍体凋亡峰,Tan ⅡA+DDP组凋亡率高于两药单用组凋亡率,差别均有统计学意义(P<0.05);Bcl-2蛋白在各组中均有表达,但表达水平变化不明显(P>0.05);Bax蛋白在对照组中几乎不表达,而在各药物处理组中均有表达,且两药联合组中表达水平高于两药单用组,差别均有统计学意义(P<0.05)。结论Tan ⅡA与DDP二者联合可以增加Hela细胞凋亡率,其中通过增加Bax蛋白的表达,使Bax/Bcl-2比值升高,可能是其诱导细胞凋亡的机制之一。     

HPV16变异体与LSIL预后的相关性分析

目的:分析上海地区HPV16变异体与宫颈低度鳞状上皮内病变(LSIL)预后的相关性。方法:选取120例单纯HPV16阳性阴道镜下宫颈活检证实为LSIL的患者,每半年随访1次,持续2年。从宫颈脱落细胞中提取HPV16 DNA E2、E6、E7、LCR双向测序确定变异体类型。结果:检测到40%的A1(欧洲型)和60%的A4(亚洲型)两种变异体亚系。4个片段常见突变位点E6:T178G,T178A;E7:A647G;E2:T135K,R165Q,I210T,D219S E232K,T310K和D344E;LCR:A7175C,T7177C,G7193T,T7201C,C7270T,A7287C,A7289C,G7521A,A7730C。110例患者中,78例病灶消退(78/110,70.91%),24例病灶持续存在(24/110,21.82%),8例进展为HSIL(8/110,7.28%)。A4亚系较A1在LSIL持续存在中有显著统计学意义(P=0.016)。A4亚系中E6、E7、E2、LCR四个片段出现共变SNPs(single nucleotide polymorphism)。结论:上海地区LSIL中主要存在HPV16 A1和A4两种变异体亚系。LSIL患者的2年病灶持续及进展率较高,随访非常必要。A4亚系中某些SNPs可能与LSIL的持续存在相关。     

雌激素及其受体与IL-17在HPV16持续感染阶段的表达研究

目的探讨雌激素、雌激素受体及白介素-17(IL-17)在人乳头瘤病毒(HPV)感染与清除过程中的作用。方法选取上海市浦东新区人民医院2014年8月至2017年1月门诊或住院部宫颈细胞学正常、HPV阴性或单一人乳头瘤病毒16型(HPV16)阳性的患者,采用宫颈TCT对所有研究对象进行细胞学检测,反向斑点杂交技术进行HPV亚型分析及实时荧光PCR进行HPV16 DNA定量;用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测血清中雌激素(E2)水平及宫颈灌洗液中IL-17浓度,免疫组化检测雌激素受体(ER)表达水平。上述实验每3个月重复一次。按照HPV16感染结局的不同,将实验分为HPV阴性组、HPV16清除组和HPV16持续感染组。结果将所有研究对象最后一次检查结果与第一次检查结果对比发现,HPV阴性组、HPV16清除组及HPV16持续感染组之间E2比较,差异无统计学意义(P0.05),ER在各组之间的差异也不明显,差异均无统计学意义(P0.05)。IL-17表达浓度差在HPV阴性组与HPV16持续感染组间差异无统计学意义,二者与HPV16清除组之间IL-17浓度差异显著,HPV16清除组中IL-17浓度明显增高。结论在细胞学正常,而仅为HPV16感染阶段,内源性E2及宫颈局部组织中的ER可能并没有发挥作用,抑或E2或ER对HPV感染影响不大,而局部免疫因子IL-17在HPV16清除过程中发挥了重要作用,IL-17浓度的增加有利于HPV16的清除。     

HPV16变异体对HSIL锥切术后持续感染及复发的影响

目的:探索HPV16型E6、L1变异体对宫颈高度鳞状上皮内病变(HSIL)锥切术后持续感染及复发的预警作用。方法:选取2011年5月到2012年6月于上海市浦东新区人民医院HPV16型阳性、LEEP术后切缘阴性的HSIL患者100例,对其宫颈脱落细胞E6、L1基因测序,随访2年。持续感染及复发者再次测序明确HPV16变异体。结果:100例均检测出变异体,其中81.0%属亚洲原型(As.P),14.0%属欧洲变异体,2.0%属欧洲原型(EP),3.0%非洲1变异体(Af1)。欧洲变异体T350G、A442C有更高的HPV16持续感染及复发相关性(P0.001)。94.0%的标本中出现L1基因变异H228D、T292A、449ins S,复发组、持续感染组与病毒清除组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:HPV16变异体与HSIL发生密切相关。上海浦东地区HPVl6导致的HSIL多属于亚洲型变异体,欧洲变异体E6 T350G/A442C可能有更高的锥切术后HPV16复发及持续感染相关性。L1基因变异可能不影响HSIL锥切术后HPV16病毒的复发及持续感染。     

黄连素对人卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨黄连素对人卵巢癌细胞株OVCAR3增殖和凋亡的影响,为卵巢瘤的治疗提供实验依据。方法采用不同浓度的黄连素处理人卵巢癌细胞株OVCAR3,等体积培养基培养正常对照组细胞。CCK-8法观察黄连素对卵巢癌细胞增殖活性的影响;流式细胞仪检测黄连素处理后细胞凋亡情况;RT-PCR、Western Blot分别检测卵巢癌细胞中Caspase-3、Caspase-8mRNA及蛋白表达情况。结果黄连素抑制人卵巢癌细胞株OVCAR3的增殖且呈时间剂量依赖性,并促进细胞凋亡。RT-PCR、Western Blot结果显示:黄连素作用于OVCAR3细胞株后,细胞Caspase-3、Caspase-8 mRNA及蛋白表达升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论黄连素能够通过抑制人卵巢癌细胞株OVCAR3增殖、促进凋亡发挥抗肿瘤作用,可为临床卵巢癌治疗策略提供新的思路。