抑制消减杂交（SSH）在植物功能基因研究中的应用

基于PCR的抑制消减杂交（SSHPCR）是目前用于差异cDNA序列的检测，以及构建基因组差异DNA文库最有效、并且应用最广泛的方法之一。虽然这种方法有很多优点，但仍存在一定的局限性，具有一些不可避免的缺陷。从四个方面讨论SSH在植物功能基因研究中的应用，进而探讨SSHPCR方法在植物基因克隆方面遇到的问题及解决对策。     

三萜皂苷生物合成途径及相关酶

三萜皂苷是一种植物次生代谢物，具有多种生物活性，是许多中药的重要有效成分之一。综述三萜皂苷生物合成途径的研究概况，重点介绍相关酶基因的克隆及其结构特征。     

红花栝楼鲨烯合酶基因的克隆及其序列分析

目的克隆红花栝楼鲨烯合酶(squalene synthase,SS)的基因并进行序列分析,为进一步研究葫芦科植物三萜合成通路关键酶SS的正选择位点与功能的关联性分析奠定基础。方法根据绞股蓝与罗汉果SS基因c DNA比对分析的结果,设计SS的5’端简并引物,采用3’RACE扩增红花栝楼SS全长c DNA基因。结果获得红花栝楼SS c DNA全长共1 466个核苷酸,其中包括一个含有1 254个核苷酸的开放读码框,编码417个氨基酸残基。通过NCBI的Blast比对,发现红花栝楼SS基因编码的氨基酸序列与已知植物SS基因编码的氨基酸序列同源性为78%~94%,核苷酸的同源性为74%~93%。结论成功克隆了红花栝楼SS的全长c DNA,为进一步研究红花栝楼SS基因结构、基因表达、基因突变提供了基础,并为葫芦科植物三萜合成通路关键酶SS的正选择位点与功能的关联性分析提供了数据支持。     

硕士研究生培养过程中的思考

随着我国高等教育事业的发展,硕士研究生教育也在快速地发展扩大。由于就业的困难,更多的本科毕业生考虑读研,使具有硕士学位点的高校迎来更多考生。生源增加,招生规模不断扩大,这对硕士研究生的培养也带来了一系列新的问题。研究生的培养,是否还能定位在“学术型”、“研究型”?如何把握硕士研究生培养的质量?如何根据社会需求调整培养目标,使研究生能进得来,出得去,用得上?针对目前我国研究生培养的现状,结合我校的一些实际情况,我们不得不进行一些反思。1培养目标20年前,硕士研究生培养是属于精英式高层次学术人才的培养,主要目标定位于培养“学术型”及“研究型”人才,以适应高等院校及专业研究所教学及科研工作对于高层次人才的需要。但随着硕士研究生培养规模的扩大,对于不少高校来说,硕士研究生的入学门栏实际上已经降低,毕业水准也参差不齐。一些高校及研究所的岗位多数已经饱和。近两年来,一般院校毕业的硕士研究生很难有机会进入高等学府从教或进入研究所进行基础研究。在这种现状下,对于硕士研究生的培养目标应该做一些调整,以适应社会发展的现状需要。目前,一方面高校及研究所岗位饱和,另一方面企业或公司的高级专门应用型人才仍有需求市场。因此,硕士研究生的...     

某些中药成分对豚鼠补体及经CVF处理的豚鼠补体活性的影响

该文研究人参茎叶多糖、田七多糖、绞股兰皂甙、白花蛇舌草煎液对补体及经CVF处理的豚鼠补体活性的影响,发现上述中药成分对正常豚鼠补体水平无明显影响,但对经CVF处理后的豚鼠低补体状态在连续给药5～8天后有一定促进恢复作用。给豚鼠腹腔注射50μg/kg的CVF,CH_(50)下降94％～97％,12天后才恢复正常。此时再次给予同样剂量的CVF,几乎不能再产生降补体作用,可能是由于已产生CVF抗体的缘故。用CVF造成动物低补体状态以研究某些中药成分的药理作用是一新的尝试。     

RAPD在绞股蓝种类鉴别应用上的条件摸索

目的 为采用随机扩增多态性技术鉴别绞股蓝及其易混品乌蔹莓,进行RAPD条件摸索.方法 运用改进CTAB法提取七叶绞股蓝、五叶绞股蓝、乌蔹莓以及烟草基因组DNA,摸索影响RAPD的条件.结果 用改进CTAB法提取所得的DNA质量较好,均能用于RAPD扩增,并摸索出了最优RAPD扩增条件.结论 改进的CTAB法适合于这4种植物的DNA提取,摸索得到的RAPD扩增条件可用于绞股蓝种类鉴别及与其易混品乌蔹莓的区别.     

基于DNA条形码（ITS2）的绞股蓝与其混伪品的分子鉴定方法分析

目的探讨基于ITS2序列的绞股蓝与其混伪品鉴定的新方法。方法从GenBank中下载绞股蓝及其混伪品的ITS2序列,用软件MEGA4.0等进行相关数据分析,通过ITS2数据库预测ITS2二级结构,并用最大简约法构建系统发育树。结果绞股蓝与其混伪品的ITS2序列存在差异,其二级结构在4个螺旋区的茎环数目、大小、位置以及螺旋发出时的角度均有明显差异,绞股蓝最大种内K2P遗传距离远远小于其与混伪品的最小种间K2P遗传距离,构建的系统发育树显示绞股蓝与其混伪品可明显分开。结论基于DNA条形码的ITS2序列为绞股蓝及其混伪品的准确、简便鉴定提供了新的分子鉴定方法。     

绞股蓝RAPD标记及序列分析

目的 利用绞股蓝RAPD标记有效鉴别绞股蓝及其伪品。方法 用19条引物对17个绞股蓝样品和一个乌蔹莓样品进行RAPD-PCR扩增,并对绞股蓝DNA特异条带克隆测序及序列分析。结果 获得一个绞股蓝RAPD标记。经克隆测序,8个序列高度保守,片段长度在766～770 bp,相似性均在97%以上。结论 获得的RAPD标记可以作为合成探针的基础,用于鉴别绞股蓝及其伪品。     

Seminar教学模式在生物化学研究生教学中的初探

在2006级、2007级医学研究生的生物化学教学中引入Seminar教学模式,总结教学实施方法和体会,为Seminar教学模式在生物化学教学中的应用提供参考。     

端粒酶逆转录酶mRNA在舌鳞癌和癌前病变中的表达

目的：探讨端粒酶活性在正常舌黏膜、上皮单纯性增生、上皮异常增生和舌鳞癌中的表达。方法：用原位杂交法检测8例正常舌黏膜，8例上皮单纯性增生，27例上皮异常增生和52例舌鳞癌中端粒酶逆转录酶(TERT)mRNA的表达。结果：TERTmRNA阳性率在正常舌黏膜和上皮良性增生中为0。在上皮异常增生中为48．1％(13／27)；在舌鳞癌中为84．6％(44／52)。TERTmRNA阳性率与舌癌患者局部淋巴结转移相关(P-0．042)，与TNM分期和组织学分级无关(P=0．091和P=0．671)。TERTmRNA阳性表达患者生存率低于阴性表达患者(P=0．023)。结论：端粒酶活性可能在舌鳞癌的发生上起了关键作用。TERTmRNA表达有助于评价舌鳞癌的生物学行为和预后。