利用微滴数字PCR技术分析转基因大豆‘GE-J12’中外源基因的拷贝数

为鉴定抗除草剂转基因大豆新品种‘GE-J12’的外源基因插入拷贝数,以该转化体的外源插入目的基因G2-EPSPS和GAT的序列、3′转化体特异性序列为靶序列,设计PCR扩增引物和TaqMan探针,并对引物探针特异性进行鉴定,同时以大豆内标基因Lectin为参照,建立微滴数字PCR拷贝数检测体系。特异性试验结果显示,只有以抗除草剂转基因大豆‘GE-J12’基因组DNA为模板才有扩增信号。以单株转基因大豆‘GE-J12’基因组DNA为模板,进行外源目的基因G2-EPSPS和GAT、3′转化体特异性序列的微滴数字PCR检测,转基因大豆‘GE-J12’的外源目的基因G2-EPSPS和GAT在基因组上的插入拷贝数均值分别为0.99和1.01。同时3′转化体特异性序列的拷贝数均值为1.00,验证单株转基因大豆‘GE-J12’为纯合子,因此鉴定该单株转基因大豆‘GE-J12’的外源基因在大豆基因组上为单拷贝插入,同时与Southern blot方法进行比较,结果一致。     

DG-DGGE在基因多样性快速检测中的研究

为了探究双梯度变性凝胶电泳技术( DG - DGGE)相对于单一变性梯度凝胶电泳技术(DGGE)可以提高基因多样性的检测效率.结合2种胶各自特点,在相同的试验条件下对在相同变性剂梯度下,双变性梯度胶DG - DGGE胶与单一变性梯度胶DGGE胶分离效果的比较,发现DG - DGGE胶的特点.之后在横向变性梯度条件下,进...     

不同熔化速率下的电渣重熔过程数值模拟分析

电渣重熔能提高钢锭的质量,从而满足特种行业的需要,其过程伴随着复杂的物理现象,存在着磁流体流动、传热和传质以及电化学等多方面的影响。通过耦合电磁以及流动和温度方程对电渣重熔过程的三维瞬态进行了数学模拟,研究了熔化速率对重熔过程的影响。结果表明：电流密度、焦耳热和电磁力都随着熔化速率的增大而增大,当熔化速率由14.4 kg/h增加到27.0kg/h,电流密度、焦耳热和电磁力最大值的增大比例超过100%。随着熔化速率的增大,温度最大值有小幅的增加,而且速度最大值的增大幅度接近50%;金属熔池深度则由27 mm增大到38 mm,不利于保证铸坯的质量。     

麦后复种3个芜菁品种的产量相关因素比较分析

以新星圆、卜留克、农家品种3个芜菁品种为试验材料进行麦后复种,比较分析3个品种的生长发育特性及产量。结果表明:3个品种的叶面积、SPAD值、叶片鲜和干物质量总体呈先增加后减小的变化趋势,其中农家品种在生长发育过程中保持较高的叶面积和SPAD值,前3次取样中其叶片鲜、干重均高于或显著高于其他2个品种。根冠比、肉质根的鲜、干物质量呈逐渐增加的趋势,农家品种各取样时期的肉质根的鲜、干物质量均高于其他2个品种,收获期的产量为农家品种新星圆卜留克,农家品种的产量达71 037kg/hm~2,显著高于其他2个品种。由此可见,麦后复种当地农家品种的产量相关因素及经济产量都明显优于另外2个品种,适合河套地区进行麦后复种。     

赤峰市气象新媒体发展现状与思考

目前,赤峰市气象局已形成稳定的两微一端新媒体格局,发挥气象信息传播发布重要作用。基于此,通过深入分析气象新媒体发展现状和存在的问题,进一步思考如何发展新媒体气象服务工作。今后应努力培养优秀气象服务人才队伍,开发具有气象部门特色的手机端应用,加大两微一端推广力度,大幅提升受众数量,并构建新型多元化气象服务体系,借助社会力量开展精细化气象服务,创新差异化、个性化气象服务,并加强监管,防范虚假信息蔓延。     

哺乳母猪日粮中增加豆粕添加比例对母猪和仔猪生产性能的影响

采用131头母猪(Line 241;DNA,Columbus,NE)来评价哺乳母猪日粮中增加豆粕添加比例对母猪和仔猪生产性能的影响。在母猪妊娠112 d时,依据母猪体重和胎次平均分为3个处理组,对应日粮豆粕添加比例依次为25%、30%和35%。日粮按1.05%回肠可消化(SID)赖氨酸的标准进行配制,随着豆粕添加比例的增加,降低L-赖氨酸盐酸盐添加比例,其他氨基酸和营养素依据营养推荐量添加。试验日粮从妊娠112 d饲喂到断奶(20 d±2),产仔后48 h内完成寄养,使得每窝仔猪头数相等。结果显示,随着日粮中豆粕比例的增加,母猪体重损失增加(线性,P=0.017),分娩到断奶的背膘损失增加(二次方程,P=0.052)。不同处理组间,母猪分娩后0~7 d采食量相近(P>0.10)。然而,随着日粮豆粕比例的增加,母猪分娩后7~14 d,14 d~断奶的日采食量下降(线性,P=0.01)。数据表明,不同处理组断奶后发情率、断奶头数、断奶窝重、窝增重间存在差异(P>0.10)。哺乳母猪分娩后第14天的血清尿素氮浓度随豆粕比例的增加而增加(线性,P=0.001)。然而,无论哪种处理,母猪肌酐浓度均无差异(P>0.05),表明尿素氮增加是日粮中粗蛋白质水平增加的反映,与蛋白质分解代谢增强相反。总之,随着日粮中豆粕比例从25%增加到35%,哺乳母猪的采食量下降、体重损失增加,窝仔猪生产性能无差异。     

万寿菊玉米黄质环氧化酶TeZEP基因片段的克隆及分析

为了研究万寿菊中玉米黄质生物合成途径的关键酶基因,首先根据不同物种的ZEP基因进行序列比对找到保守区域设计简并引物,然后利用RT-PCR方法,以万寿菊花瓣总RNA为模板克隆万寿菊ZEP基因cDNA的片段,并进行序列分析。结果表明,万寿菊ZEP基因片段长度为1 058 bp,编码352个氨基酸残基,其序列与其他植物ZEP基因同源性最大为92%;其翻译产物属于亲水性蛋白;且结构域预测结果发现TeZEP基因编码的氨基酸序列含有一个NADB_Rossmann超家族和玉米黄质环氧化酶的特征性结构黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)结合位点。本研究成功克隆了万寿菊玉米黄质环氧化酶TeZEP基因片段并对其进行了序列分析,这为进一步研究该基因功能提供了依据,也为构建转基因植物和沉默基因植株以提高玉米黄质合成量提供了一定的参考。     

转cry1Ab13基因玉米新种质的创制

【目的】构建包含抗鳞翅目害虫基因cry1Ab13的重组植物表达载体,并利用其创制对玉米螟Ostrinia furnacalis具有优良抗性的转基因玉米Zea may L.新种质。【方法】利用同源重组法将cry1Ab13基因连接到表达载体pCAMBIA3300-Bar上,获得以抗除草剂Bar基因为筛选标记的植物表达载体pCAMBIA3300-cry1Ab13-Bar。通过农杆菌介导法转化玉米自交系H99幼胚,对再生植株进行逐代除草剂筛选、PCR检测及T2代植株的Southern blotting检测、实时荧光定量PCR检测,并对转基因植株进行田间及室内抗虫性鉴定。【结果】构建了cry1Ab13基因的植物表达载体,转化玉米获得3株高抗玉米螟和1株抗玉米螟的T2代转基因植株。Southern blotting证明cry1Ab13基因已经整合到玉米基因组中,实时荧光定量PCR结果表明cry1Ab13基因已经在玉米植株内表达。抗虫性鉴定结果表明,与对照相比转基因植株对玉米螟的抗性显著提高。【结论】将cry1Ab13基因导入玉米并成功表达,显著提高了转基因玉米对玉米螟的抗性,为抗虫玉米新种质的创制奠定了基础。     

基于5G的太阳能智慧高效提水系统研究

针对目前太阳能提灌站运行中存在的光伏电池输出功率不稳定、传统无线移动网络实时传送速率低和时延大、缺乏适合太阳能提水的实时智能监控和管理系统等一系列问题,本文提出了一种基于5G的太阳能智慧高效提水技术,并对其应用实例进行分析。该系统由发电系统、逆变控制系统、提灌系统、基于5G的无线通讯系统和智慧管理系统组成,可实现太阳能和电网的双电源输入,使水泵机组在需要的工况下稳定运行,同时利用5G高速、可靠、低时延特点,实现提水系统的自动控制功能,能够对泵站的工作条件、工作状态和值守信息进行检测和记录,对故障和非法进入进行判断、提示,实现“无人值守”的工作状态。     

虾血20-羟基蜕皮酮对瘢痕成纤维细胞增殖与Smad3mRNA表达的影响

目的 探讨20-羟基蜕皮酮对增生性瘢痕成纤维细胞增殖与Smad3 mRNA表达的影响.方法 以不同质量浓度(0.05、0.10、0.25 mg/L)20-羟基蜕皮酮分别处理体外培养的人瘢痕成纤维细胞(分别设为B、C、D组)24 h,同时加同体积无水乙醇溶剂作为对照(设为A组).分别选用CCK8法、实时荧光定量PCR检测4组成纤维细胞的增殖情况及瘢痕增生相关Smad3 mRNA的表达.结果 CCK8法检测显示作用24 h后,4组的吸光度均数差异有统计学意义(P＜0.01),其中A组最高,B组次之,C组较低,D组最低,两两比较差异均有统计学意义(均P＜0.05或0.01).实时荧光定量PCR结果显示20-羟基蜕皮酮可使瘢痕增生相关Smad3 mRNA的表达显著下调(P＜0.01).B、C和D组Smad3 mRNA表达均低于A组(均P＜0.01).结论 20-羟基蜕皮酮能抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖与瘢痕增生相关Smad3 mRNA的表达.