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目的:构建携带人可诱导共刺激分子(inducible costimulator molecule,ICOS)基因的重组逆转录病毒载体,筛选稳定表达ICOS蛋白的CHO细胞株,并对其生物学活性进行鉴定.方法:RT-PCR法从人PBMC中获取ICOS cDNA,定向克隆到逆转录病毒载体上,制备逆转录病毒重组体pMSCV-ICOS;经病毒包装细胞包装后抗性筛选出产高滴度病毒的细胞株,用高滴度病毒上清感染CHO细胞,抗性筛选出稳定表达细胞株.将CHO-ICOS细胞和PBMC以不同比例(1:1、1:2、1:5、1:10)共培养,加入亚刺激剂量(200 ng/ml)的抗人CD3抗体,采用3H-TdR掺入法检测PBMC的增殖,流式细胞仪检测T细胞表面活化分子CD25表达情况,并以CHO-pMSCV细胞和PBMC以 1:1比例共培养作为阴性对照以及未处理的PBMC作为空白对照.结果:成功构建逆转录病毒重组体pMSCV-ICOS,筛选出稳定表达ICOS蛋白的CHO细胞株.3H-TdR掺入法和流式细胞仪检测结果表明,与阴性对照及空白对照相比,CHO-ICOS细胞与PBMC共培养能抑制CD3抗体诱导的PBMC增殖及活化(P<0.05或P<0.01),细胞比例为1:1时抑制率最大,分别为(68±5.9)%、(44.08±3.26)%.结论:成功建立具有生物学活性的膜稳定表达人ICOS蛋白的CHO细胞株,为今后研究奠定了基础. 相似文献
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目的 通过某院2009-2014年的实际门急诊量变化趋势,预测2015年的门急诊量,为合理配置门急诊医疗卫生资源提供科学依据.方法 利用最小二乘法建立直线回归方程,预测门急诊量.结果 预测方程为=33.89+ 17.36t.结论 通过对门急诊量的预测,着力提升门急诊建设质量,为医院管理决策者提供科学依据,优化配置卫生资源,努力构建流程优化、效益明显、高度集成的医疗体系. 相似文献
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目的对UriSed尿沉渣分析仪的临床应用进行评估。方法随机收集患者新鲜中段尿液标本,使用UriSed尿沉渣分析仪对尿液有形成分进行分析,评价分析仪的图像合格率、标记率、标记正确率、重复性、线性、互染率,并比较其与UF500尿沉渣分析仪对低值细胞的检出符合率。结果图像合格率为98.23%。有形成分标记率为:病理管型(100%)、白细胞(82.5%)、红细胞(74.7%)、小圆上皮细胞(73.6%)、上皮细胞(64.1%)、真菌(54.1%)。有形成分的标记正确率为:小圆上皮细胞(100%)、白细胞(99.9%)、上皮细胞(99.5%)、真菌(98.1%)、红细胞(97.4%)、病理管型(1.5%)。高、中、低水平白细胞尿标本的变异系数依次为:4.68%、3.45%、4.48%。分析仪对低值白细胞的具有良好的线性关系,但对低值红细胞的检测线性欠佳。测定白细胞的互染率为0。UriSed与UF500对100/L白细胞的检出符合率为97.4%,对100/L红细胞的检出符合率为96.8%。结论除对低值红细胞检测的线性关系不佳之外,UriSed尿沉渣分析仪主要指标能满足临床应用要求。 相似文献
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目的:探讨不同型号凝血分析仪检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)和凝血酶时间(TT)的结果是否具有可比性。方法随机选取40例患者新鲜血浆,分别在ACLTOP与ACLTOP700血凝分析仪上检测PT、APTT、FIB、TT,对结果进行比较分析。结果两凝血分析仪4个检测项目结果的相关系数(r)均大于0.975,各项结果的偏倚均在CLIA′88规定的允许误差范围内。结论ACLTOP与ACLTOP700血凝分析仪检测PT、APTT、FIB、TT的结果具有可比性,符合临床要求。 相似文献
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目的:观察腺病毒介导MHC Ⅱ类分子(major histocompatibility complex class Ⅱ molecules)反式激活因子突变体(CⅡTAm)基因治疗小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎(experimental autoimmune thyroiditis, EAT)的效果,并探讨其可能的作用机制。方法:31只健康雌性CBA/J小鼠随机分成EAT模型组(n=8)、CⅡTAm治疗组(n=9)、GFP对照组(n=9)和正常对照组(n=5)。除正常对照组不作特殊处理外,其余3组均以猪甲状腺球蛋白(porcine thyroglobulin, pTg)+弗氏佐剂(complete or incomplete Freund adjuvant, CFA/IFA)建立EAT小鼠模型,CⅡTAm治疗组和GFP对照组分别静脉注射重组腺病毒Ad-CMV-CⅡTAm及Ad-GFP进行治疗,EAT模型组注射等量生理盐水。首次免疫后第29日处死小鼠,进行H-E染色观察甲状腺病理形态;免疫组织化学染色测定甲状腺MHC Ⅱ类分子表达;分析pTg刺激下脾脏淋巴细胞的增殖及其上清液中IFN-γ的分泌水平;ELISA法检测血浆中抗-pTg自身抗体滴度;流式细胞术分析外周血和脾脏淋巴细胞中CD4+ T淋巴细胞上可诱导共刺激分子(inducible costimulator,ICOS)的表达水平。结果:H-E染色结果表明,CⅡTAm治疗组甲状腺淋巴细胞浸润指数(0.3±0.5)低于EAT模型组(1.4±0.4)和GFP对照组(1.5±0.2,P<0.01)。免疫组化结果显示,EAT模型组和GFP对照组甲状腺组织有弥漫性MHC Ⅱ类分子表达,而CⅡTAm治疗组未见明显表达,正常对照组表达呈阴性。80 μg/ml pTg刺激下,CⅡTAm治疗组小鼠淋巴细胞刺激指数(SI)明显低于EAT模型组或GFP对照组(P<0.05);培养上清各组IFN-γ分泌水平与SI结果类似(P<0.01)。CⅡTAm治疗组血浆抗-pTg自身抗体滴度显著低于EAT模型组或GFP对照组(P<0.01);CⅡTAm治疗组外周血和脾脏CD4+ T细胞ICOS分子阳性表达率亦显著低于EAT模型组或GFP对照组(P<0.01)。结论:重组腺病毒Ad-CMV-CⅡTAm能抑制EAT小鼠甲状腺组织MHC Ⅱ类分子表达,抑制自身反应性T细胞增殖,减轻甲状腺炎性细胞浸润,降低自身抗体滴度,对EAT有一定的治疗作用。 相似文献
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1 病历摘要
男,43岁.于2009年到非洲工作,同年11月回国后一直居住北京,2010-03-18因发热到我院就诊,高热达40 ℃,反复发作.查血常规:WBC 5.25×109/L,RBC 4.67×1012/L,Hb 138 g/L,PLT 85×109/L,N 0.643,L 0.229,M 0.124,进行普通抗生素输液治疗3 d,效果不佳,仍反复高热.2010-03-21申请疟原虫检查,静脉血涂片经刘氏染色后,在显微镜下可见血片上红细胞中有多期疟原虫,包括环状体(胞质少、成环状、胞核成点状)、大滋养体(胞质增多、伸出伪足、胞核增大、被寄生的红细胞体积胀大、颜色变浅、出现虐色素)、裂殖体(染成深蓝色、多个裂殖体聚集成堆、红细胞内有褐色的疟疾颗粒)、雌配子体(圆形、占满胀大的红细胞、染色较深、核小而结实),其中大多数为环状体.因此确诊为疟原虫感染,随后建议患者到传染病医院进行医治. 相似文献