热休克蛋白基因多态性与溃疡性结肠炎相关性研究

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）是一种病因不明的累及结肠黏膜和黏膜下层病变的慢性非特异性肠道炎性疾病，在我国发病率呈上升趋势，其病因可能涉及遗传、免疫、感染、环境等因素；热休克蛋白（heat shock protein, HSP70）作为分子伴侣在抗原的递呈和处理中起重要的作用，具有广泛的诱导炎症和免疫调节功能。     

胰蛋白酶原基因缺失突变导致早发型自身免疫性相关的多器官多发囊肿的研究

目的：探讨由胰蛋白酶原基因（cationic trypsinogen, PRSS1）突变引发的早发型自身免疫性相关的多器官多发囊肿及其致病机制。方法采用DNA全长测序技术分析PRSS1、囊性纤维化跨膜通道调节因子（cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, CFTR）、丝氨酸蛋白酶抑制剂 Kazal 1型（serine protease inhibitor Kazal type 1, SPINK1）、蛋白激酶D（protein kinase D, PKD）1和PKD2等胰腺炎和多囊性病变相关基因的所有外显子及其侧翼内含子剪切区域,确定DNA和cDNA序列的变异,通过与家系内部和正常对照的比较分析,对检测到的变异是否与疾病相关进行探讨,并构建突变体表达体系进行功能学验证,同时对患者的肺、肝、胰腺等穿刺样本进行免疫组织化学和特殊染色。结果在2例年轻的自身免疫性胰腺炎患者中首次发现PRSS1基因2号外显子缺失突变生成激活肽缺失型的胰蛋白酶原,并具有生物学活性;肝脏、肺穿刺病理均可见不同程度的淋巴细胞和浆细胞浸润,肺组织病理显示弹力纤维、网状纤维明显减少;患者表现为多脏器多囊性病变,血清胰蛋白酶、弹力蛋白酶、AAT显著增高。使用糖皮质激素治疗有效。结论 PRSS1：c．1300_1304 del CCCAG是引发早发型自身免疫性胰腺炎的新突变形式,并与多器官囊肿关系密切。     

灰树花多糖对人外周血单个核细胞白细胞介素-2及干扰素-γ表达的影响

目的探讨灰树花多糖（GRN）对人外周血单个核细胞（PBMCs）白细胞介素-2（IL-2）、干扰素-γ（IFN-γ）表达的影响。方法使用不同浓度GRN与人PBMCs共培养,对照组以不加GRN的PBMCs培养相同时间。RT-PCR检测人PBMCs中IL-2 mRNA的表达,应用流式细胞术检测Th1细胞中IFN-γ的表达。结果经GRN处理的人PBMCs中,IL-2 mRNA的表达较对照组呈显著增高（P〈0.01）;Th1细胞中IFN-γ的表达与对照组相比也显著增高（P〈0.01）。结论 GRN可提高PBMCs中IL-2 mRNA及IFN-γ的表达,提高细胞免疫功能。     

穴位埋珍珠治疗支气管哮喘23例

<正> 穴位埋线治疗支气管哮喘有一定的疗效,但效果不够满意。根据穴位埋线的原理,笔者1992年2月～1994年12月采用膻中、定喘、肺俞等穴位埋珍珠治疗支气管哮喘23例,取得较为满意的效果。现介绍如下。 1 临床资料 23例支气管哮喘患者均符合中华医学会内科呼吸学会制定的诊断标准。其中男13例,女10例;年龄最大70岁,最小24岁,平均38.2岁;病程最短3年,最长40年,平均25.4年。属轻度8例,中度14例,重度1例。属外源性哮喘16例,内源性哮喘5例,混合型哮喘2例。中医辨证属冷哮17例,热哮6例。合并症:过敏性鼻炎3例,肺气肿5例,肺心病2例,肺部感染3例。治疗史:做过兔脑穴位埋藏治疗2例,穴位埋线治疗1例。     

脱落细胞线粒体基因A1555G突变在诊断线粒体耳聋中的应用

目的用PCR-RFLP技术检测脱落细胞(尿液沉渣细胞和颊黏膜细胞)线粒体基因A1555G突变,探讨脱落细胞用于诊断线粒体基因突变相关耳聋的可行性。方法收集福建省某特殊教育学校126名聋哑学生和1个线粒体基因A1555G突变的遗传性耳聋家系6例患者外周血及尿液沉渣细胞和颊黏膜细胞,用PCR-RFLP技术筛查患者是否携带线粒体DNA A1555G突变,并与测序法进行比较。结果尿液沉渣细胞检测线粒体DNA A1555G突变的检出率最高(9/132),颊黏膜细胞和外周血细胞均为7/132。PCR-RFLP筛查结果与直接测序法基本相符。结论脱落细胞适用于耳聋相关线粒体DNA A1555G突变检测。     

MCT1和LDHB在荷乳腺癌小鼠髓系抑制性细胞中的表达及意义

目的 比较正常小鼠和荷乳腺癌小鼠骨髓中髓系抑制性细胞(MDSCs)的含量,探讨其产生免疫抑制功能的可能机制.方法 建立荷乳腺癌小鼠模型,利用BD FACSAria Ⅲ流式分选仪分选正常小鼠组和荷乳腺癌小鼠组骨髓中的MDSCs(CD11b+ Gr-1+),比较其含量;q-PCR法检测两组MDSCs中MCT1及LDHB的mRNA水平.结果 荷乳腺癌小鼠骨髓中MDSCs的比例为(48.92±3.13)％高于正常小鼠(25.13±1.95)％,差异有统计学意义(P ＜0.001);荷乳腺癌小鼠MDSCs中MCT1的mRNA相对表达量(0.010±0.005)为正常小鼠(0.003±0.001)的3.33倍,差异有统计学意义(P＜0.05);荷乳腺癌小鼠MDSCs中LDHB的mRNA相对表达量(0.008±0.002)为正常小鼠(0.004±0.001)的2.00倍,差异极显著(P＜0.01).结论 MDSCs在荷乳腺癌小鼠骨髓中的比例显著高于正常小鼠,其能量代谢关键分子MCTI、LDHB的表达也显著高于正常小鼠.MDSCs的能量代谢特点可能正是其发挥免疫抑制功能的重要基础.     

表皮生长因子及睾酮对尿道下裂尿道板成纤维细胞雄激素受体活化水平的影响

目的：探讨尿道下裂尿道板成纤维细胞雄激素受体(androgen receptor,AR)的表达情况及表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和睾酮(testosterone,T)对AR活化水平的影响。方法：原代培养尿道下裂患儿的尿道板成纤维细胞,分别采用EGF和不同浓度睾酮干预,通过免疫细胞化学技术及图形分析技术检测成纤维细胞中AR活化水平的变化。结果：在生理浓度睾酮(3×10-8 mol/L)的作用下,中远端型尿道下裂组与对照组AR的活化水平差异无统计学意义(P>0.05),近端型尿道下裂组的成纤维细胞AR的活化水平与其他两组比较有明显的差异(P<0.001)。在睾酮浓度为3×10-6 mol/L时,3个组AR活化有明显差异(对照组>中远端型组>近端型组,P<0.001)。在EGF与生理浓度睾酮干预下,近端型尿道下裂组的成纤维细胞AR的活化程度升高最为明显,与对照组及中远端型组有明显差异(P<0.001),中远端型组AR的活化升高的水平与对照组相比也有提高(P=0.02)。结论：尿道下裂尿道板成纤维细胞AR的表达与活化均存在异常,EGF可提升不同类型尿道下裂尿道板成纤维细胞AR的活化水平,尤以近端型明显。     

基层医院采用国产尿激酶静脉溶栓治疗急性心肌梗死72例观察

目的探讨国产尿激酶治疗急性心肌梗死的临床疗效。方法对72例急性心肌梗死患者采用国产尿激酶150万u静脉溶栓治疗,并与同期未进行溶栓治疗的80例急性心肌梗死患者做比较,观察两组患者胸痛缓解情况、心电图ST-T改变、心律失常发生率及CK-MB、CK峰值前移情况,计算冠状动脉再通率,从而评价溶栓疗效。结果观察组ST-T段下降>50%及CK-MB峰值提前至<14 h内的患者明显多于对照组(P<0.01),观察组总再通率(73.61%)明显高于对照组(8.75%),(P<0.01)。观察组治疗前后胸痛缓解和心律失常发生率与对照组比较明显改善(P<0.01)。结论国产尿激酶静脉溶栓治疗急性心肌梗死患者安全有效,价格低廉,可在基层医院推广使用。     

骨肉瘤程序性死亡因子配体1的表达及临床意义

目的通过检测程序性死亡因子配体1(PD-L1)在骨肉瘤组织中的表达,探讨其与骨肉瘤患者临床特征及预后的相关性。方法选取2006年1月至2012年12月,福建医科大学附属第一医院初诊为骨肉瘤并接受手术切除术的72例患者为研究对象,收集经病理确诊的患者骨肉瘤石蜡标本,采用免疫组织化学(IHC)方法检测组织中PD-L1的表达,以PD-L1肿瘤细胞表达超过5%为阳性。同时收集患者的临床资料,进行统计学分析。结果在72例骨肉瘤组织样本中,22例(30.6%)呈PD-L1阳性。PD-L1的表达与患者年龄、性别、肿瘤位置以及肿瘤大小无相关性(P均0.05)。单因素分析结果表明,患者的年龄、性别、肿瘤位置和肿瘤大小均与无进展生存(PFS)和总生存(OS)中位时间无关(P均0.05);接受新辅助化疗患者的PFS中位时间(68.0个月,95%CI33.8~102.2个月)和OS中位时间(68.0个月,95%CI 34.6~101.4个月)均长于未接受新辅助化疗患者(22.0个月,95%CI 16.8~27.2个月;30.0个月,95%CI 20.6~39.4个月)(P均0.05);PD-L1阳性骨肉瘤患者PFS中位时间(10.0个月,95%CI0.0~20.7个月)和OS中位时间(28.0个月,95%CI 11.1~45.0个月)均短于PD-L1阴性患者(44.0个月,95%CI21.0~67.0个月;52.0个月,95%CI31.4~72.6个月)(P均0.05)。多因素分析结果显示:肿瘤大小是骨肉瘤患者PFS期的独立影响因子(P0.05);是否接受新辅助化疗以及肿瘤是否为PD-L1阳性均是骨肉瘤患者PFS期和OS期的独立影响因子(P均0.05)。结论骨肉瘤患者中部分肿瘤呈PD-L1阳性,是否接受新辅助化疗以及PD-L1是否阳性均是骨肉瘤患者预后不良的独立影响因子。阻断程序性死亡因子(PD-1)/PD-L1的免疫疗法可能是PD-L1阳性骨肉瘤患者可选择的新型治疗方式。     

肿瘤坏死因子-α 5 旁侧基因多态性与强直性脊柱炎相关性

目的探讨肿瘤坏死因子α基因多态性与强直性脊柱炎(AS)发生的易感关系。方法采用序列特异引物PCR方法(SSP-PCR)检测了136例AS患者和127例正常人的TNF-α5旁侧-857C/T,-863C/A和-1031T/C三个基因多态性位点,并比较了部分不同地区人群之间的基因型与等位基因频率。结果AS患者TNF-α-857基因型(CC,TC和TT)分布频率分别是64.0%,35.3%和0.7%;TNF-α-863基因型(CC,CA和AA)分布频率分别是68.4%,30.0%和1.5%;TNF-α-1031基因型(TT,TC和CC)分布频率分别是66.2%,32.4%和1.5%;TNF-α-857等位基因频率C和T分别是81.6%和18.8%;TNF-α-863等位基因频率C和A分别是83.5%和16.5%;TNF-α-1031等位基因频率T和C分别是:82.4%和17.6%;正常对照者TNF-α-857基因型(CC,TC和TT)分布频率分别是70.9%,27.6%和1.6%;TNF-α-863基因型(CC,CA和AA)分布频率分别是68.5%,29.9%和1.6%;TNF-α-1031基因型(TT,TC和CC)分布频率分别是69.3%,29.1%和1.6%;TNF-α-857等位基因频率C和T分别是84.6%和15.4%;TNF-α-863等位基因频率C和A分别是83.5%和16.5%;TNF-α-1031等位基因频率T和C分别是:83.9%和16.1%;AS患者和正常对照者之间的基因型分布和等位基因频率比较差异无显著性,(P>0.05);本文中国汉族人TNF-α-857(C/T),-863(C/A),-1031(T/C)位点基因多态性分布同亚洲的日本、韩国人群基本一致,差异无显著性;-863(C/A),-1031(T/C)位点基因多态性分布同欧洲的英国、荷兰、瑞典人群比较差异也无显著性,但欧洲人群的TNF-α-857T的等位基因频率明显高于亚洲人群,差异有显著性(P<0.05)。结论TNF-α-857,-863和-1031三个基因多态性位点可能不是中国人患AS的主要易感位点基因。