约氏疟原虫感染不同小鼠免疫分子的应答差异

目的探讨在约氏疟原虫感染过程中不同宿主的免疫应答差异。方法以约氏疟原虫（致死型）感染DBA／2和BALB／c小鼠，计算红细胞感染率；收集感染前和感染后1、3、6、9、12、15、20d小鼠血清，并无菌取出脾脏，培养脾细胞。应用ELISA试剂盒检测小鼠血清中IFN-γ和IL-12水平，并通过Griess方法检测脾细胞培养上清中NO含量。结果DBA／2小鼠的原虫血症峰值水平明显低于BALB／c小鼠，并于感染后第20d左右自愈；BALB／c小鼠于原虫血症达到峰值水平后全部死亡；DBA／2小鼠的IFN-γ和IL-12水平于感染后1d即出现了有意义的升高并持续到第20d；BALB／c小鼠的IFN-γ和IL-12水平仅干感染后1d出现了有意义的升高；DBA／2小鼠NO的产生于感染后3d出现了有意义的升高，第6d达到峰值，而BALB／c小鼠的NO水平始终未见明显升高。结论DBA／2小鼠通过感染早期Th1细胞免疫应答的有效建立能够抑制原虫血症，IL-12是启动并维持Th1细胞免疫应答的关键性细胞因子。     

糖尿病足治疗进展

1999年，世界卫生组织(WTO)对糖尿病足的定义是：糖尿病患者由于合并神经病变及各种不同程度末梢血管病变而导致下肢感染，溃疡形成和(或)深部组织的破坏。据报道，全球约1．5亿糖尿病患者中15％以上将在其生活的某一时间发生足溃疡或坏疽，因糖尿病造成的截肢者是非糖尿病患者的15倍。周围神经病变是糖尿病足的重要易患因素。     

Wnt/JNK通路中效应因子在妇科肿瘤中的作用

Wnt信号传导通路包括经典的Wnt信号传导途径,Wnt/Ca2+途径和Wnt/JNK信号通路。Wnt信号通路在真核生物中是高度保守且最重要的信号途径之一。其广泛存在于动物发育过程中,包括细胞增殖不同阶段,细胞分化,极性和迁移,并且与胚胎发生密切相关。Wnt/JNK信号通路又称为细胞平面极性途径,非经典的Wnt信号传导途径,通过重排细胞骨架来调控细胞极性。Wnt/JNK信号通路中效应因子在不同的肿瘤细胞中的表达不同。大量实验证明,Wnt/JNK通路中的效应因子通过此通路在肿瘤中的侵袭,调控肿瘤细胞凋亡以及肿瘤治疗方面发挥重要作用。近年展开的Wnt/JNK通路研究,主要集中在对果蝇和脊椎动物为模型的研究,探讨其在胚胎形成时的作用。近年来研究发现Wnt/JNK中效应因子与妇科肿瘤的关系密切,并在不同妇科肿瘤中发挥不同的作用。就Wnt/JNK通路的信号传导途径,在肿瘤细胞中的作用机制及其在妇科肿瘤中的作用做一综述。     

miR-761通过靶向作用CRKL抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖研究

目的探讨miR-761对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响以及相关机制。方法采用Lipofectamine 2000将miR-761过表达和沉默质粒载体分别转染卵巢癌SKOV3细胞后,采用Real-Time PCR验证其转染效率;采用CCK8法检测miR-761对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响;采用Real-Time PCR检测卵巢癌SKOV3细胞中CRKL mRNA表达变化。采用双荧光素酶报告基因验证miR-761和CRKL的存在靶向结合并明确其结合位点。将CRKL(+)和CRKL(-)慢病毒载体分别转染至卵巢癌SKOV3细胞;采用CCK8法检测CRKL对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响。将CRKL(+)和CRKL(-)质粒分别转染至已经建立的miR-761过表达和沉默细胞,采用CCK8检测卵巢癌SKOV3细胞增殖变化。结果与对照组比较,miR-761过表达显著抑制了卵巢癌SKOV3细胞的增殖,极大降低了CRKL在SKOV3细胞中的mRNA和蛋白水平;miR-761和CRKL存在靶向结合,并明确了其结合位点;CRKL过表达显著增强了卵巢癌SKOV3细胞增殖能力;CRKL过表达有效阻断了miR-761抑制SKOV3细胞增殖的作用。结论 miR-761能够通过靶向下调CRKL,抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖。     

毛细管电泳法检查瑞格列奈片中左旋异构体杂质

目的：建立毛细管电泳法检测瑞格列奈片中左旋异构体杂质。方法：采用未涂层熔融石英毛细管柱(50 μm×50 cm,有效长度41 cm)为分离通道,运行缓冲液为pH 3.5, 30 mmol/L的磷酸二氢钠缓冲溶液,含5 mg/ml CM-β-CD。结果：左旋瑞格列奈在浓度为2.00～80.00 μg/ml范围内线性关系良好 (r=0.9993),方法回收率为92.5%～105.0%。结论：本实验建立的方法简单、准确、灵敏,可用于瑞格列奈片中左旋异构体杂质的检测。     

Dickkopf-1、LRP-5和LRP-6基因在卵巢上皮性癌中的表达及意义

目的 探讨Dickkopf-1(DKK-1)、低密度脂蛋白受体相关蛋白-5(LRP-5)和低密度脂蛋白受体相关蛋白-6(LRP-6)在卵巢上皮性癌中的表达和临床意义.方法 2002年1月至2008年4月在中国医科大学附属盛京医院采用RT-PCR的方法检测56例卵巢上皮性癌、35例卵巢上皮性良性肿瘤和12例正常卵巢组织中DKK-1mRNA、LRP-5mRNA和LRP-6mRNA的表达情况,分析3种基因与各临床病理参数的关系及其在癌组织中的表达相关性.结果 DKK-1mRNA,LRP-5mRNA和LRP-6mRNA在卵巢上皮性癌组织中的表达强度分别为0.90±0.32,0.71±0.27,0.80±0.28;明显高于卵巢上皮性良性肿瘤组织0.58±0.23,0.58±0.29,0.54±0.22和正常卵巢组织0.36 ±0.29,0.40±0.25,0.32 ±0.27(P均<0.0001).DKK-1 mRNA、LRP-5mRNA和LRP-6mRNA表达强度与临床分期(P=O.003～0.020)和病理分级(P=0.000～0.028)密切相关.DKK-1mRNA与LRP-5mRNA和LRP-6mRNA在卵巢上皮性癌中的表达强度存在统计学相关性(r=0.341,P<0.0001;r=0.815,P<0.0001).结论 DKK-1、LRP-5和LRP-6 mRNA在卵巢上皮性癌中表达增强,其表达强度存在相关联系.DKK-1、LRP-5和LRP-6在卵巢上皮性癌的发生、发展过程中起重要作用.     

肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂在肿瘤研究中的进展

肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(TWEAK)作为肿瘤坏死因子超家族的新成员可表达在多种细胞表面,也表达在多种肿瘤细胞和组织中,可诱导人肠腺癌细胞系HT29、人口腔鳞状细胞癌HSC3等肿瘤细胞凋亡,介导HepG2、HLE和SK-Hep-1等肿瘤细胞增殖,诱导巨噬细胞在肿瘤浸润区的杀伤活性,潜在介导肿瘤血管。     

糖尿病足发病机制与治疗进展

糖尿病足已成为严重威胁糖尿病患者生存和生活质量的合并症,成为国内外学者关注的重要课题.     

TNF-α基因rs1800629位点多态性与子宫内膜癌风险相关性研究

目的探讨TNF-α基因rs1800629位点多态性与东北地区汉族人群子宫内膜癌发生风险的相关性。方法选取2011-08-01-2012-12-01中国医科大学附属盛京医院手术病理确诊的子宫内膜癌患者263例,同时选取同院同期体检中心的正常对照人群315名。用限制性片段长度多态性方法（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RLFP）对TNF-α基因rs1800629位点进行基因分型。结果在子宫内膜癌的风险因素中,体质量指数（body mass index,BMI）≥24、高血压和糖尿病为子宫内膜癌的高危因素,病例组3者比例分别为37.3%、39.5%和14.4%,对照组3者比例分别为29.2%、11.7%和5.1%,两组相比差异有统计学意义,P值分别为0.041、〈0.001和〈0.001。病例组rs1800629位点A等位基因频率为13.3%,而对照组为8.9%,病例组显著高于对照组,P=0.017。病例组rs1800629位点AA基因型频率为7.2%,也明显高于对照组的3.5%,P=0.043。单因素分析显示,AA基因型增加子宫内膜癌的风险（OR=2.200,95%CI：1.025-4.723,P=0.043）,但是经多因素回归分析校正后,AA基因型并不增加子宫内膜癌的风险（OR=1.274,95%CI：0.322-5.039,P=0.730）。高、中和低分化组AA基因型频率分别为10.2%、4.4%和6.7%,组间比较差异无统计学意义（P=0.386）,提示rs1800629位点不同基因型与分化程度并无关联。结论在东北地区汉族女性中,TNF-α基因rs1800629位点多态性可能与子宫内膜癌的发生风险无关。     

CCND1基因多态性与宫颈HPV感染及CIN3发病风险的关系研究

目的 检测CCND1基因rs9344位点在东北地区汉族女性中的基因型分布,探讨CCND1基因多态性与东北地区汉族人群人乳头瘤病毒(HPV)感染及HPV感染后宫颈癌前病变发病风险的相关性.方法 应用限制性片段长度多态法(PCR-RFLP)及测序方法,对东北地区汉族健康女性(n=533)和宫颈癌前病变CIN3患者(n=241)的CCND1基因rs9344位点的基因型进行检测.结果 CCND1基因rs9344位点不同基因型与东北地区汉族女性HPV感染风险无关,rs9344位点不同基因型并不影响非HPV感染者的CIN3患病风险,但HPV阳性者中,AA基因型对宫颈CIN3存在保护价值(OR=0.494;95％CI=0.255-0.955;P=0.036).从整体来看,AA基因型降低宫颈CIN3的发病风险(OR=0.618;95％ CI=0.390-0.980;P=0.041).结论 CCND1基因rs9344位点多态性影响汉族女性对宫颈癌前病变CIN3的易感性,AA基因型具有保护价值.对于HPV感染后的人群来说,AA基因的保护价值更为显著.