mTIGIT-mLumin跨膜融合蛋白慢病毒载体和真核表达载体的构建及体外的稳定表达

目的: 构建以mLumin荧光蛋白为指示系统的小鼠T细胞免疫球蛋白和结构域蛋白(mouse T cell Ig and ITIM domin,mTIGIT)胞外区真核表达载体,并表达mTIGIT-mLumin融合蛋白。方法: 分别设计mTIGIT和mLumin的特异性引物,通过PCR技术扩增两个目的基因序列,经酶切、连接,克隆至plenti-puro和pcDNA3.1载体。将构建的plenti-puro-mTIGIT-mLumin慢病毒载体进行病毒包装并感染HEK-293T细胞,而pcDNA3.1-mTIGIT-mLumin真核表达质粒转染非洲绿猴肾成纤维Cos7细胞,利用两种表达载体的药物抗性进行筛选感染或转染的细胞,检测融合蛋白的表达情况。结果： 通过PCR顺利扩增获得mTIGIT和mLumin,经酶切、连接插入至载体,基因测序结果证实克隆的mTIGIT和mLumin片段序列正确,并成功正确插入到plenti-puro载体和pcDNA3.1载体中;荧光显微镜和共聚焦显微镜观察显示,转染的HEK-293T细胞和Cos7细胞经过筛选能够稳定表达mTIGIT-mLumin融合蛋白。 结论： 成功构建plenti-puro-mTIGIT-mLumin慢病毒载体和pcDNA3.1-mTIGIT-mLumin真核表达载体,且能够在目的细胞中稳定表达mTIGIT-mLumin融合蛋白。     

磷酸肌酸钠对劳力型心绞痛患者PCI术心肌损伤的干预

目的评价外源性补充磷酸肌酸钠对经皮冠状动脉介入治疗（PCI）术心肌损伤的影响。方法选择住院并接受PCI治疗的劳力型心绞痛患者206例作为研究对象,随机分为2组,每组103例。对照组采用指南推荐的常规治疗方案,试验组患者在常规治疗的基础上术后即刻给予磷酸肌酸钠静脉滴注,每次2g,2次/日,连续应用3d。所有患者术前及术后3d（磷酸肌酸钠疗程结束）检测酸磷酸激酶同工酶MB（CK-MB）和肌钙蛋白I（TnI）浓度。结果 PCI术后对照组较试验组患者CK-MB（82.1±59.0vs.55.4±40.8U/L,P=0.01）及TnI水平（0.483±0.402vs.0.388±0.415ng/ml,P=0.02）均显著增高。结论劳力型心绞痛患者PCI术后即刻给予外源性磷酸肌酸有助于减轻心肌损伤。     

外源性磷酸肌酸对介入治疗术后心肌损伤的作用

目的评价外源性补充磷酸肌酸对PCI术后心肌损伤的影响。方法选择接受PCI的冠心病患者200例,随机分为试验组和对照组,每组各100例。对照组采用指南推荐的常规治疗方案,试验组在常规治疗的基础上,术后即刻给予磷酸肌酸钠静脉滴注,2次/d,2 g/次,连续应用3 d。所有患者PCI术前及术后3 d检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)和肌钙蛋白I(cTnI)水平。结果试验组与对照组PCI术前CK-MB和cTnI差异无统计学意义(P>0.05),对照组PCI术后CK-MB及cTnI较试验组明显升高(P<0.01)。试验组PCI术后CK-MB和cTnI升高1～3倍和>3倍的比例均明显低于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论冠心病患者PCI术后即刻给予外源性磷酸肌酸有助于减少心肌损伤。