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二烯丙基二硫启动人白血病HL-60细胞凋亡模型的建立 总被引:1,自引:4,他引:1
目的寻找二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人白血病HL-60细胞凋亡的启动点,建立DADS启动HL-60细胞凋亡模型。方法实验设未处理组、处理组和撤药组,分别采用细胞计数、流式细胞术、DNA凝胶电泳、Western blot等方法,绘制生长曲线,检测凋亡率、活化的caspase-3表达率以及DNALadder、凋亡相关蛋白的检测。结果3.6mg.L-1DADS作用HL-60细胞1d,与对照组相比,细胞数没有明显变化,而作用2~6d,细胞数分别减少24.1%、36.5%、44.2%、52%、53.6%。DADS作用1、2d,凋亡率分别为3.1%、4.3%,与未处理组(3.0%)差异无显著性,而作用3~5d的凋亡率分别达到8.5%,15.2%,27.4%,均高于未处理组(P<0.05)。DADS作用2~5d撤药后再培养至d6,凋亡率分别为7.9%,12.4%,16.5%,18.8%,高于未处理组的3.3%(P<0.05)。处理2~5d后,活化的caspase-3的表达率分别为10.0%、10.4%、14.9%、17.3%,均高于未处理组5.4%(P<0.05)。处理组中DADS处理4d后DNA凝胶电泳出现梯状条带,而DADS作用2~5d撤药后再培养至d6均出现明显梯状条带。Westernblot结果表明,从作用2d起,caspase-3表达开始上调,而Bcl-2表达开始下调。结论3.6mg.L-1DADS诱导人白血病HL-60细胞凋亡的启动点为处理2d。 相似文献
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目的 构建维甲酸相关孤核受体α(RORα)基因的真核表达载体,并建立稳定高表达RORα的人胃癌MGC803细胞,为研究RORα的功能奠定基础。方法根据RORα基因的cDNA全序列,设计一对带有限制性酶切位点的引物。从人胃癌MGC803细胞中提取mRNA作为模板合成RORα cDNA第一链,并用上述引物扩增目的基因全序列,然后经双酶切插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),转化大肠杆菌DH5α;用氨苄青霉素筛选pcDNA3.1(+)-RORα的阳性菌株,双酶切和测序进行鉴定。用经鉴定的重组质粒pcDNA3.1(+)-RORα转染MGC803细胞,G418筛选获得RORα/MGC803细胞株;Real-time PCR和Western blot检测该细胞株RORα的表达情况。结果经双酶切鉴定,构建的真核表达载体pcDNA3.1(+)-RORα包含有大约1 640 bp的插入片段,与预期大小一致;表达载体经测序鉴定,其插入片段碱基序列与RORα基因的cDNA序列完全一致。用构建的真核表达载体pcDNA3.1(+)-RORα转染MGC803细胞后,筛选到可稳定传代的RORα/MGC803细胞株。Real-time PCR与Western blot检测显示,RORα/MGC803细胞RORα mRNA和蛋白表达增高。结论成功构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-RORα和建立高表达RORα基因的RORα/MGC803细胞。 相似文献
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Cdc25C cyclin B1在二烯丙基二硫化物诱导人胃癌BGC823细胞G2/M期阻滞中的作用 总被引:2,自引:1,他引:2
目的:研究二烯丙基二硫化物(DADS)对人胃癌BGC823细胞的增殖及细胞周期的影响以及Cdc25C、cyclin B1的作用。方法:采用MTT法检测BGC823细胞的生长活性;流式细胞术分析DADS对细胞周期分布的影响;Western blot观察DADS对Cdc25C蛋白、cyclin B1蛋白表达的影响。结果:MTT比色实验结果显示,DADS对人胃癌细胞具有明显的生长抑制作用,且呈显著的剂量-效应依赖关系(P〈0.05)。流式细胞分析发现,DADS作用12h时,G2/M期细胞增加到30.1%;24h时增加到58.1%;36h达50.2%(P〈0.05)。Westernblot结果表明,DADS呈时间依赖性抑制人胃癌BGC823细胞周期Cdc25C磷酸酶的表达,cyclin B1表达在DADS处理24h后开始下降(P〈0.05)。结论:DADS可抑制人胃癌BGC823细胞增殖,其增殖抑制与细胞周期G2/M期阻滞有关;DADS可能是通过抑制Cdc25C、cyclin B1表达使部分BGC823细胞停滞在G2/M期。 相似文献
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目的比较《遏制结核病行动计划》实施前和实施期间2019—2021年报告的儿童肺结核病例的特点。方法基于中国疾病预防控制信息系统的子系统结核病管理信息系统中报告的2019—2021年0~14岁儿童肺结核患者的报告发病数据和人口数据, 比较不同年份儿童肺结核的人口基本信息和临床相关信息。结果 2019—2021年报告儿童肺结核报告病例数分别为363例、664例、655例。3年间, 儿童肺结核病例中位年龄由2019年的10.4岁升高到2021年的11.7岁(P=0.005)。儿童肺结核病例的病原学阳性率显著升高, 从2019年的11.6%(42/363)升高到2021年的32.2%(211/655, P<0.001);其中以分子生物学检测阳性比例升高最为显著, 成为病原学检测的主要手段, 分子生物学检测阳性者占病原学阳性患儿的比例3年分别为16.7%(7/42), 62.0%(57/92)和75.4%(159/211)。在进行了药物敏感性试验的肺结核儿童中分析异烟肼和或利福平的耐药率, 结果显示, 异烟肼或利福平任一耐药率3年分别为2/9、3.9%(2/51)和6.7%(11/... 相似文献
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本文主要围绕奥林巴斯电子内窥镜,介绍其CLV—U40型冷光源出现气压不足现象时的故障分析及解决办法。 相似文献
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常见甲状腺良恶性肿瘤的形态定量分析 总被引:8,自引:0,他引:8
目的 探讨形态定量指标在常见甲状腺良恶性肿瘤鉴别诊断中的价值并建立数据库 ,为计算机协助诊断疾病打下基础。方法 利用PIPS -2 0 2 0型超清晰图象分析系统对 3 2例甲状腺良性乳头状增生病变 (TBPL)、3 2甲状腺乳头状腺癌 (TPAC)、2 7例甲状腺滤泡性腺瘤 (TFA)、2 4例甲状腺滤泡性腺癌 (TFAC)进行胞核形态定量研究。结果 TBPL与TPAC、TFA与TFAC、TBPL与TFA、TPAC与TFAC八项胞核形态定量参数经统计学处理比较 ,TBPL与TPAC的七项指标有非常显著性差异 (P <0 0 1)、TFA与TFAC的八项指标均有非常显著性差异 (P <0 0 1)、TBPL与TFA的 7项指标有非常显著性差异 (P <0 0 1) ;TPAC与TFAC的八项指标均无非常显著性差异 (P >0 0 1)。结论 形态定量参数可作为鉴别甲状腺常见良恶性肿瘤的参考指标。 相似文献