用电融合技术建立抗甲组虫媒病毒单克隆抗体杂交瘤细胞系的研究

1980年Zimmermann报告了电场诱导细胞融合的新技术。它主要包括两个电过程:一是以电介质电泳使细胞形成“串珠”,达到细胞紧密接触;二是以瞬间直流高压电脉冲使细胞发生可逆电穿孔,相邻细胞的细胞质沟通,达到细胞融合。由于这一技术具有可使差异较大的细胞发生融合,在显微镜下能观察融合过程,物理刺激对细胞无毒性,融合率较PEG法高等优点。引起了许多学者的兴趣。现已在植物细胞,动物细胞,菌细胞,以及脂质体、质粒与细胞的融合等方面进行了广泛的应用研究。我们用这一技术建立鼠B淋巴细胞杂     

非小细胞肺癌患者外周血与组织中K-ras基因突变的研究

目的检测非小细胞肺癌患者外周血与肿瘤组织K-ras基因突变率及两者的一致性,探讨外周血K-ras基因突变的临床应用价值。方法应用实时荧光定量PCR方法检测257例非小细胞肺癌组织,318例非小细胞肺癌外周血,其中185例外周血标本和组织标本配对,检测其中K-ras基因突变,比较外周血和组织标本突变一致性,分析K-ras基因突变和患者临床特征相关性。结果外周血标本中检测出37例突变(11.64%),组织标本中29例突变(11.28%),两种标本一致性为76.19%,差异有统计学意义(Kappa=0.671,P=0.000)。结论非小细胞肺癌患者外周血与组织K-ras基因突变一致性较高,在无法获得组织学标本时可以检测外周血K-ras基因状态,为非小细胞肺癌的临床诊疗提供帮助。     

老年消化系统恶性肿瘤对骨密度的影响

目的探讨消化系统恶性肿瘤与老年人骨量减少的关系。方法对患消化系统恶性肿瘤的老年人以双能X线骨密度仪测定其股骨及腰椎骨密度(BMD),并与无恶性肿瘤的对照组比较。结果消化系统恶性肿瘤老年患者各部位的BMD均低于对照组,P<0.05。结论消化系统恶性肿瘤可引起老年人骨量减少,提示在治疗消化系统恶性肿瘤同时,应关注骨质疏松的防治。     

抗DEN-2基因核酶的克隆及其体外切割活性的研究

目的：探讨核酶抗登革病毒活性。方法：根据DEN－2基因结构的特点，按照锤头状核酶的结构模型和作用模式，设计，合成针对172－174GUC位点的核酶基因；定向插入质粒pGEM-3Zf( )的Sac I和Sal I位点之间；核酶基因克隆和DEN－2靶基因克隆分别进行体外转录，生成核酶的靶RNA，体外进行切割反应。结果：核酶与登革病毒靶序列体外产物电泳 见预期切割条带。结论：该核酶具有切割相应靶RNA的活性，可进一步用于细胞内核酶抗登革病毒的研究。     

逆转录—多聚酶链反应扩增黄病毒核酸的研究

黄病毒基因组为单链，正股ＲＮＡ，全长约１１Ｋｂ。在其ＮＳ１基因序列设计了一对通用引物，ＤＪＳ（＋）和ＤＪＡ（一）均为１７个硷基，扩增序列长度为４１３ｂＰ．应用逆转录一一多聚酶链反应（ＲＴ—ＰＣＲ）成功地扩增了登革病毒（ＤＥＮ）１，２，３，４型和乙型脑炎病毒（ＪＥＶ）基因部分片段，其扩增片段的大小与设计相符。采用该引物检测国内分离株ＤＥＮ１／（ＧＺ）、ＤＥＮ２（ＨＮ９１）和ＪＥＶ（Ａ２）株同样出现一条明显的扩增带（约４１３ｂＰ），说明该引物也适合于我国分离株。应用通用引物扩增黄病毒中的ＰＯＷ和ＬＧＴ均出现一条特异带。甲病毒属的辛德毕斯和基孔肯稚病毒应用该引物扩增后无特异性条带；扩增Ｃ６／３６细胞也无特异带。表明该通用引物特异性良好，对于今后黄病毒感染的临床快速诊断和进一步的分子病毒学研究均有重要意义。     

热疗联合化疗治疗晚期恶性肿瘤158例

[目的]观察热化疗治疗晚期恶性肿瘤的近期疗效及安全性.[方法]对158例晚期恶性肿瘤患者,根据病种不同,选用相应化疗方案治疗,同时采用NRL-001型内生场深部肿瘤热疗系统对病灶局部进行加温,加温至41℃～43℃,加温时间为60～90分钟,每例患者热疗5～20次,平均9次.[结果]158例中,CR9例(5.7%),PR77例(48.7%),SD 47例(29.7%),PD25例(15.8%),CR PR为54.4%.毒副反应主要为化疗所致的血象异常和消化道反应,热疗所致的反应少见.[结论]热疗联合化疗治疗晚期恶性肿瘤有较好效果,毒副作用轻,值得临床推广应用.     

海南省琼中地区家畜体表寄生蜱的调查分析

目的了解家畜体表寄生蜱物种多样性及群落结构特点，并分析其与疾病的关系。方法采用逆毛式检蜱法，定义家畜体表寄生蜱为一个群落，运用生态学中相对优势度（组成比率）、优势指数、多样性指数和均匀度等方法进行测定。结果从放养的5群东山羊（20头）、4群黄牛（10头）和水牛（5头）中共检获蜱2614只，分属4个种属（血红扇头蜱、微小牛蜱、粒形硬蜱和钝刺血蜱），前两者为优势种；其中东山羊的优势度指数、多样性指数和均匀度等均高于黄牛和水牛。结论海南琼中地区家畜体表寄生蜱有4种，优势种为血红扇头蜱和微小牛蜱；其中东山羊的群落结构最丰富。应警惕斑点热群立克次体自然疫源性疾病的流行。     

蚋类昆虫引起叮咬性皮炎的调查研究

目的为弄清海训部队发生群体性皮炎情况，并做好防治。方法在现场采用个案随机调查及走访当地防疫部门，查阅相关文献，逐一分析并采取防治措施。结果发现海训部队开训近一周后就发生皮炎，随机调查64名官兵，出疹率为96．9％（62／64）。尤以双下肢暴露部位皮肤出现红点、丘疹、水疱样皮疹；其原因为蚋类昆虫叮咬引起。因海训场存在成群结队的蚋类昆虫，从早上6：00一直到黄昏都有叮咬活动，其活动高峰为上午7：00—9：00时，平均密度为28只／人工小时；下午4：00～6：00，平均密度为56只／人工小时。经现场处理后蚋密度下降，皮疹病人逐渐减少，说明防治有效。结论蚋类昆虫引起群体性皮炎应引起重视。     

两株甲病毒快速检测方法的建立

目的：建立一种快速检测甲病毒的通用方法。方法：在甲病毒3’非编码区(3-NTR)设计了一对引物，并运用RT-PCR技术对两株甲病毒进行了检测。结果：鹭山病毒(SAG)和辛德毕斯病毒(SIN)都扩增出约1.4kb片段。结论：初步建立了甲病毒的通用方法。     

套式逆转录聚合酶链反应在黄热病毒快速检测中的应用

目的 建立灵敏、特异的套式逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)快速检测黄热病毒方法。方法 参照黄热病毒标准株D17序列设计套式引物，并检索国际基因序列数据库初步验证其特异性，随后对镁离子、dNTP及引物浓度，PCR反应条件进行优化，建立稳定、特异的套式RT-PCR快速检测黄热病毒方法，并以同属于黄病毒科的登革病毒1～4型、流行性乙型脑炎病毒为对照，验证其特异性。结果 外引物扩增可获得404 bp左右的特异性扩增片断，阴性对照毒株未见设计大小的扩增片断，但可见非特异性片断；内引物扩增可获得349 bp左右片断，阴性对照无扩增条带。结论 套式RT-PCR可快速、灵敏、特异的检测黄热病毒。