整合课程中心血管系统教学的实践与研究

以“器官系统为中心”的整合课程教学模式打破了传统学科的界限,加强了知识的连贯性和综合性.心血管系统模块教学将心血管系统基础知识以心血管系统疾病为基础,将课程内容进行有机重组和优化;采用多种教学方法,将课堂授课与GBL和PBL相结合,综合应用设计性和综合性实验,从而提高教学效果,培养学生的自主学习和创新能力.     

氯化铯对小鼠空间学习记忆的影响

目的探讨氯化铯(CsCl)一种非选择性的超极化激活-环核苷酸门控的阳离子通道(HCN通道)阻断剂对小鼠空间学习记忆的影响及其作用的机制。方法在小鼠脑缺血/再灌模型上,连续2wk给予CsCl(200、400mg·kg-1,ig),用Morris水迷宫实验方法检测小鼠空间学习记忆成绩,实验结束后动物处死取脑测定海马组织MDA的含量,SOD、tNOS和iNOS的活性。采用离体海马脑片培养,用高效液相荧光检测方法测定CsCl(0.2,2,20mmol.L-1)对脑片培养液中谷氨酸、甘氨酸和牛磺酸释放的影响。结果与缺血/再灌组相比,CsCl组小鼠的游泳距离延长(P<0.05),海马组织MDA的含量,SOD、tNOS和iNOS的活性无明显改变.在离体海马脑片培养实验,CsCl可剂量依赖性抑制谷氨酸的释放(P<0.05);对其它氨基酸的释放没有影响。结论提示CsCl可损伤小鼠的空间学习记忆,该作用可能与其抑制海马谷氨酸的释放有关。     

联合纤维在大鼠学习记忆形成和巩固过程中的作用

目的探讨联合纤维在大鼠学习记忆形成和巩固过程中的作用及其可能的机制。方法大鼠麻醉,固定,同心圆刺激电极(ST)定位于大脑右侧Schaffer侧枝(AP 3.6～3.8 mm,ML 3.1～3.4 mm,H 2.4～2.6 mm),两记录电极R1,R2分别定位于大脑左(对侧)右(同侧)的CA1区(AP 2.9～3.2 mm,ML 2.1～2.4 mm,H 1.8～2.2 mm),高频刺激(HFS:刺激频率100 Hz,4串刺激,每串100个波,串间隔5 min)诱导LTP;联合纤维切断术:用超薄刀片(宽5 mm,厚0.15 mm)沿中缝线(前囟前2 mm-前囟后3 mm)缓慢垂直插入,直至对侧的EPSP波形消失。单纯胼胝体切断时,垂直插入刀片约4.5 mm;术后2周用水迷宫实验进行学习记忆功能检测。结果各组水迷宫训练1～5 d逃避潜伏期(s)分别为:对照组(n=10),44.43±3.36,29.06±5.63,25.10±4.02,20.70±3.59,19.17±4.13;单纯胼胝体切断组(n=5),42.09±4.83,33.22±7.80,24.74±4.86,28.301±5.03,23.26±4.46;胼胝体及联合纤维切断组(n=9),57.45±1.48,55.83±1.58,42.90±5.46,49.95±4.10,42.61±6.03;单纯胼胝体切断组1～5 d逃避潜伏期与对照组相比无显著差异,而胼胝体及联合纤维切断组1～5 d逃避潜伏期与以上两组相比均显著延长(P<0.05)。此外,与同侧LTP平均幅度(198±10)%相比,对侧LTP平均幅度(412±48)%显著增加(P<0.01)。结论联合纤维参与了大鼠空间学习记忆形成和巩固过程,可能与输入信号的选择性放大有关,详细机制有待进一步研究。     

Guattegaumerine的神经细胞保护及细胞内钙调节作用

目的 探讨guattegaumerine（Gua）对H₂O₂合并血清剥夺诱导的培养大鼠神经细胞的保护作用,以及对H₂O₂、KCl诱导的大鼠皮质神经元内钙超载和缓激肽诱导的人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）内钙超载的影响。方法 H₂O₂合并血清剥夺诱导培养大鼠皮质神经元损伤,Hoechst33258染色法检测Gua对细胞凋亡的影响;钙荧光探针Furo-2/AM标记细胞,荧光显微图像分析系统和双荧光波长分光光度计检测Gua对细胞内钙浓度的影响。结果 Gua能显著抑制H₂O₂导致的神经元凋亡、H₂O₂和KCl引起的培养皮质神经细胞 [Ca²⁺]_i升高（P＜0.05）和缓激肽所诱导的培养人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y [Ca²⁺]_i升高（P＜0.01）。结论 Gua具有一定的神经细胞保护作用,该作用可能与其抑制细胞外钙内流及内质网内钙释放有关。     

氯化铯对大鼠学习记忆功能及突触可塑性的影响

 目的探讨氯化铯对大鼠学习记忆功能及突触可塑性的影响。方法大鼠腹腔注射氯化铯30d(120mg·kg^-1,每天一次)建立一种动物模型,然后运用在体电生理技术记录该模型大鼠海马CA3区群峰电位,给予高频刺激后观察诱发长时程增强(LTP)的情况,同时观察对照组大鼠(腹腔注射生理盐水)的LTP诱导情况;运用Morris水迷宫检测不同组大鼠空间学习记忆能力;在电镜下观察各组动物海马CA3区超微结构的改变;运用高效液相色谱法测定不同组大鼠海马组织内兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸的含量。结果①氯化铯组的LTP诱导率为33.33%,对照生理盐水组为100%;②Morris水迷宫检测发现氯化铯组学习记忆能力受到一定程度的损害。学习训练结束时,氯化铯造模组较对照组逃避潜伏期延长;空间探索实验发现,氯化铯造模组、生理盐水组在原平台所在象限穿梭时间占探索总时间百分比分别为(14.76±2.87)%、(38.58±6.99)%;③电镜下观察到经高频刺激后生理盐水组CA3区突触结构中突触前膜的突触小泡明显比正常大鼠未经过高频刺激组增多,而氯化铯组经过高频刺激后CA3区突触结构中突触前膜的突触小泡较生理盐水组经过高频刺激后突触小泡的数量显著减少;④海马组织氨基酸含量的改变:NS组大鼠经高频刺激后,海马组织谷氨酸和γ-氨基丁酸、天冬氨酸、甘氨酸以及牛磺酸的含量均明显高于未经过高频刺激的正常对照组(Normal组)(P值均小于0.05),而CsCl组大鼠经过高频刺激后上述5种氨基酸含量均少于经过高频刺激后的NS组,但有谷氨酸、γ-氨基丁酸和甘氨酸有显著性差异(P<0.05),而天冬氨酸和牛磺酸含量则没有显著性差异。结论氯化铯可使大鼠的空间学习记忆能力受到明显损害,而且阻碍LTP现象的诱导,其作用机制可能为通过阻断超极化激活-环核苷酸门控的起搏阳离子通道(HCN)而发挥作用。     

大鼠皮质及海马神经元体外缺氧缺糖模型建立

目的建立体外培养大鼠皮质及海马神经元缺氧缺糖模型。方法取培养10—12d的皮质及海马神经元，用古连二亚硫酸钠1mmol／L的无糖Earle液取代正常含血清培养基，分别培养2、4、8、12、24及36h后，MTr法检测细胞活力，并测定培养液中LDH活力。结果连二亚硫酸钠1mmol／L合并基质缺糖2—36h，大鼠皮质及海马神经元细胞活力均显著降低（P〈0．01），并呈时间依赖性下降，至培养36h时细胞存活率分别仅为25．4％和24．2％；培养液LDH活力则均显著升高（P〈0．01）。并呈时间依赖性上升；且皮质及海马神经元培养液LDH活力变化与其细胞活力变化均呈高度负相关（r=-0．983，-0．992，P〈0.01）。结论连二亚硫酸钠合并基质缺糖可建立体外培养大鼠皮质及海马神经元缺氧缺糖模型。     

蝙蝠葛酚性碱对脑缺血大鼠海马CA3区诱发电位的影响

目的 探讨蝙蝠葛酚性碱(PAMd)对脑缺血大鼠海马CA3区神经元突触传递功能的影响。方法 在体记录正常大鼠海马CA3区诱发的群峰电位(PS)；结扎大鼠双侧颈总动脉，造成急性不完全性脑缺血，观察PS幅度的变化；缺血前给予PAMd(5、10、20mg／kg)，观察其对缺血后PS幅度的影响；并观察不同剂量谷氨酸(Glu)对诱发电位的影响。结果 ①急性不完全性脑缺血后，PS的幅度显著降低。②5、10、20mmol／l，Glu注入后，PS的幅度均升高；当给予50mmol／L，Glu时PS幅度则显著降低。③20mg／kg PAMd能部分改善脑缺血引起的PS幅度降低，并能减弱50mmol／L Glu降低PS幅度的作用。结论 预先给予20mg／kg PAMd对高浓度Glu和急性脑缺血所致CA3区突触传递功能减弱有明显的改善作用。     

药理学精品课程建设的实践与体会

精品课程建设是高等学校教学质量与教学改革工程的重要组成部分,将药理学精品课程建设过程中从改进教学方法、加强师资队伍建设、编写精品教材、加强教学监控等方面所做的主要工作及实践中的几点体会作一总结,为其他学科精品课程建设提供参考。     

抗脑血栓片对大鼠缺血性脑损伤保护作用的实验研究

目的观察抗脑血栓片对缺血性脑损伤的保护作用,并初步探讨其可能的作用机制。方法大鼠灌胃给予抗脑血栓片,连续14天,每天2次。采用大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO),制作急性局灶性脑梗塞动物模型,观察缺血24h后对脑梗塞体积和神经行为学变化的影响,以及对大鼠体外血栓形成、血小板聚集、血液黏度等指标的影响。结果抗脑血栓片可依剂量性减轻大鼠局灶性脑缺血所致的脑梗塞体积以及改善由脑缺血引起的神经症状。大、中、小剂量组脑梗塞体积分别为(11．18±3．35)%、(14．60±7．00)%和(15．37±7．21)%,与模型组(27．51±4．71)%比较,各组依次分别下降59．36%、46．93%和44．13%(P＜0．01),各剂量组对体外血栓的干、湿重量均亦可明显减轻,与模型组比较,差异有显著性(P＜0．05,P＜0．01),可显著抑制ADP诱导的血小板聚集,降低全血黏度,但对血浆黏度、红细胞压积无明显影响。结论抗脑血栓片对脑缺血有明显的保护作用,其作用可能与它改善血液黏度、抑制血小板聚集有关,对其确切作用机制,有待深入研究。     

ZD7288抑制大鼠穿通纤维—海马CA3区通路的突触传递

目的观察HCN通道特异性阻滞剂ZD7288对大鼠海马CA3区突触传递的影响。方法应用在体电生理细胞外记录技术记录大鼠海马CA3区场电位，用HPLC荧光检测技术测定海马组织氨基酸含量，观察CA3区局部微量给予ZD7288和CsCl后对低频（0.5 Hz）刺激穿通通路(perforant pathway，PP)诱发的海马CA3区群峰电位(population spike，PS)幅度及海马组织氨基酸含量的影响。结果海马CA3区分别注射ZD7288(20，100和200 nmol)和CsCl(1，5和10 μmol)可引起PS幅度剂量依赖性下降；药物效应于给药后5 min开始，作用维持时间90 min以上。给予ZD7288(100 nmol)大鼠海马组织谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸及γ-氨基丁酸含量显著降低，与生理盐水对照组比较，差异有显著性意义(P<0.01或P<0.05)。结论ZD7288可显著抑制大鼠穿通纤维—海马CA3区突触传递，并可降低海马组织氨基酸含量。