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目的应用寡核苷酸圈套技术研究胰岛素对人COL1A1基因转录的调控。方法建立稳定转染pCOLH12.5质粒(含CAT基因与人COL1A1基因-2483~ 42bp片段)的WI-38细胞株,加入不同剂量胰岛素,测CAT值;分别瞬时转染不同序列ssPT入克隆细胞株中,加入2.5μmol/ml的胰岛素,测CAT值。结果2.5μmol/ml的胰岛素显著增加了COL1A1基因启动子活性;含sp1位点的ssPT浓度为120 nmol/L时,受胰岛素刺激所增加的CAT值得到显著抑制,不含sp1位点的ssPT无此作用。结论ssPT能够应用于基因转录调控的研究。胰岛素在人COL1A1基因上的反应元件可能位于启动子-129至-105区域内。 相似文献
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针对胰岛细胞抗原成分的血清自身抗体是自身免疫性糖尿病的重要标志物。这些自身抗体主要包括胰岛细胞抗体(ICA)、谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、胰岛素自身抗体(IAA)等。监测血清中的这些自身抗体对于糖尿病的诊断分型、疾病预测、研究疾病的自然过程以及评价1型糖尿病的干预效果有重要意义。目前临床上主要的检测方法是放射免疫法(RIA)和酶联免疫吸附法(EUSA)。本文对近来应用于临床的糖尿病自身抗体免疫印迹法(IBT)对1型糖尿病的诊断价值作一评价。 相似文献
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近几年.超前镇痛受到重视,它在减少或消除围手术期疼痛及炎症反应过程中发挥着同等重要的作用,而术前运用亚麻醉剂量氯胺酮可延长术后镇痛时间,有超前镇痛作用。本研究旨在比较氯胺酮经不同途径超前镇痛的效果。 相似文献
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目的探讨化痰通络方对IL-1β刺激的类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(rheumatoid arthritis synovial fibroblast,RASFB)增殖及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factor,a FGF)分泌的影响。方法体外培养RASFB细胞株,加入终浓度为1、5、10、20μg/L的IL-1β24、48 h以WST-1法检测RASFB增殖率;然后选择20μg/L的IL-1β为诱导剂量为IL-1β组。在此基础上加入终浓度(V/V)为5%、2%、1%的高、中、低浓度化痰通络方水煎液为高、中、低浓度化痰通络方组,培养24、48 h,并设空白对照组。比较RASFB的增长率。ELISA法检测各组TNF-α和a FGF含量,RT-PCR检测TNF-α和a FGF mRNA表达。结果24、48 h时,与IL-1β1μg/L比较,IL-1β5、10、20μg/L RASFB增殖率升高(P0.01);与IL-1β5μg/L比较,IL-1β10、20μg/L RASFB增值率升高(P0.01),且IL-1β20μg/L RASFB增值率高于IL-1β10μg/L(P0.01)。48 h时各浓度的RASFB增值率高于24 h(P0.01)。与高浓度化痰通络方组比较,中、低浓度化痰通络方组RASFB增殖率降低,且中浓度化痰通络方组对IL-1β刺激的RASFB增殖率明显降低(P0.01)。与空白对照组比较,IL-1β组24、48 h时TNF-α、a FGF mRNA表达及含量均升高(P0.05);与IL-1β组比较,除24 h低浓度化痰通络方组TNF-αmRNA表达外,24、48 h高、中、低浓度化痰通络方TNF-α、a FGF mRNA表达及含量均降低(P0.05);与高浓度化痰通络方组比较,24、48 h时中、低浓度化痰通络方TNF-α、a FGF mRNA表达升高,24 h低浓度化痰通络方TNF-α含量以及24、48 h中、低浓度化痰通络方TNF-α、a FGF含量升高(P0.05)。结论化痰通络方治疗RA的机理可能涉及抑制RASFB的增殖,降低TNF-α和a FGF mRNA的表达及其蛋白的分泌。 相似文献
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目的比较两种实时荧光定量HBV-DNA检测试剂对慢性乙型肝炎(CHB)患者管理的一致性。方法选取某国产试剂H和Roche公司COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan(CAP/CTM)高灵敏核酸检测系统作为比较对象,分别检测133例CHB患者血清HBV-DNA。选择HBV-DNA〈500 IU/mL、500~2000 IU/mL、〉2000 IU/mL等三个浓度进行两检测系统的一致性监测。结果 (1)两系统检测结果比较,试剂H组HBV-DNA浓度为500~2000 IU/mL时,其结果的Log值为2.84±0.27,相应标本在CAP/CTM组的检测结果为3.48±0.54,两种系统检测结果差异有统计学意义(P=0.000)。试剂H组HBV-DNA浓度为〉2000 IU/mL时,其结果的Log值为4.74±1.06,相应标本在CAP/CTM组的检测结果为5.32±1.01,两种系统检测结果差异有统计学意义(P=0.000)。(2)以CAP/CTM为标准,试剂H在HBV-DNA〈500 IU/mL、500~2000 IU/mL、〉2000 IU/mL时的敏感度分别为100%、81.5%和75.9%;特异度分别为87.5%、95.3%和100%。结论国产试剂H系统和CAP/CTM系统在对CHB患者的抗病毒治疗筛选上以及停药的关键医疗决策浓度监测上有较大差异。 相似文献
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免疫印迹法检测糖尿病患者血清自身抗体的方法学评价 总被引:1,自引:0,他引:1
针对胰岛细胞抗原成分的血清自身抗体是自身免疫性糖尿病的重要标志物。这些自身抗体主要包括胰岛细胞抗体(ICA)、谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、胰岛素自身抗体(IAA)等。监测血清中的这些自身抗体对于糖尿病的诊断分型、疾病预测、研究疾病的自然过程以及评价1型糖尿病的干预效果有重要意义。目前临床上主要的检测方法是放射免疫法(RIA)和酶联免疫吸附法(EUSA)。本文对近来应用于临床的糖尿病自身抗体免疫印迹法(IBT)对1型糖尿病的诊断价值作一评价。 相似文献
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应用ROC曲线评价血浆D-二聚体对妊娠高血压综合征的诊断价值 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨血浆D-二聚体对妊娠高血压综合征(妊高征)的诊断价值。方法应用ACL Advance全自动血凝仪以免疫比浊法分别检测60例妊高征患者和60例正常孕晚期孕妇的血浆D-二聚体含量,ROC曲线分析确立其对妊高征的诊断临界值。结果1.中、重度妊高征患者的血浆D-二聚体水平比正常晚期孕妇显著增高(P〈0.01);轻度妊高征患者和正常晚期孕妇血浆D-二聚体比较差别无统计学意义(P〉0.05)。2.ROC曲线下面积为0.942(SD:0.026;95%CI:0.891-0.993),孕妇血浆D-二聚体对妊高征的诊断临界值为0.514 mg/L,此时敏感性、特异性、Youden指数分别为89%、93%、81%。结论孕妇血浆D-二聚体的检测对妊高征的辅助诊断有较高价值,以0.514 mg/L作为诊断界值较为合适。 相似文献