全面触发工具在老年住院患者药品不良事件监测中的研究

目的 验证全面触发工具(global trigger tool,GTT)在老年住院患者药品不良事件(adverse drug event,ADE)监测中的可行性.方法 根据《IHI global trigger tool for measuring adverse events》中推荐的触发器和国内其他研究使用的触发器...     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中美罗培南的浓度及其在ICU脓毒症患者治疗药物监测中的应用

目的 建立测定人血浆中美罗培南血药浓度的液相色谱-串联质谱(liquid chromatography tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)方法,并将该方法应用于重症加强护理病房(intensive care unit, ICU)脓毒症患者治疗药物监测。方法 以Kinetex-C18 100A(2.6μm, 4 mm×50 mm)为色谱柱,流动相为甲醇-1‰甲酸水溶液(60∶40,v/v),流速：0.4 mL/min,柱温40℃,进样量3μL。以卡马西平为内标,采用串联质谱检测器电喷雾离子源(electron spray ionization, ESI),以正离子多离子反应监测(multiple reaction monitoring, MRM)扫描方式进行监测,定量分析离子对分别为m/z 384→141(美罗培南)、m/z 237→194(卡马西平),并将该方法应用于197例次ICU脓毒症患者治疗药物的监测。结果 人血浆中美罗培南浓度在0.02～30 mg/L围内线性关系良好,标准曲线方程为y=4.934×10^-5x+2.083...     

用LC-MS/MS法测定血清中左乙拉西坦的浓度

目的 建立测定人血清中左乙拉西坦浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法,并将该方法应用于癫痫患者左乙拉西坦治疗药物监测。方法 以左乙拉西坦-D6为内标,血清样品经蛋白沉淀后检测。Kinetex XB-C18(50.0 mm×3.0 mm, 2.6μm)为分析柱,以0.01%甲酸水溶液-甲醇为流动相,梯度洗脱,流速：0.4 mL·min^-1,柱温：40℃,进样量：1μL。电喷雾离子源,以正离子多离子反应监测扫描方式进行监测,定量分析离子对分别为m/z 171.1→154.2(左乙拉西坦)、m/z 177.1→160.1(左乙拉西坦-D6)。对方法的专属性、线性范围和定量下限、准确度和精密度、稳定性进行考察,并将该方法应用于82例次癫痫患者左乙拉西坦治疗药物监测。结果 血清中左乙拉西坦浓度在1～100μg·mL^-1范围内线性关系良好,线性回归方程为y=0.573 7x+0.125 0 (r=0.999 6)。日内和日间精密度RSD均小于3.0%,回收率在93.67%～97.61%之间。82例次患者血药浓度范围为1.14～22.07μg·...     

新型阳离子脂质体制备及其体外转基因特征

背景:阳离子脂质体及胶束、纳米粒等转基因载体是目前非病毒转基因载体领域研究热点:而目前市售转基因试剂盒价格昂贵,并且基本上都是进口商品,如果能够开发一种价廉,转基因效率高,具有自主知识产权的转基因试剂盒将展现广阔市场前景.目的:合成一种新型阳离子脂质复合物,并制备相应阳离子脂质体,对其体外转基因效率进行考察.方法:以1-乙基-3-(3-二甲胺丙基)碳二亚胺、胆固醇、丁二酸酐为原料合成阳离子脂质复合物,采用薄层色谱、红外光谱等方法对产物进行结构表征.然后用薄膜分散法,将适当比例的二油酰磷脂酰乙醇胺和阳离子脂质复合物混合制各成阳离子脂质体,并用其包封含绿色荧光蛋白报告基因的真核表达质粒pEGFPC1,对人宫颈癌Hela细胞株进行体外转染.结果与结论:通过两步法合成了一种全新的阳离子脂质复合物--胆固醇-丁二酸酯-1-乙基-3-(3-二甲胺丙基)碳二亚胺,薄层色谱及红外光谱结果表明合成了预期产物.薄膜分散法制得阳离子脂质体,其中以这种阳离子脂质复合物和二油酰磷脂酰乙醇胺摩尔比为1:1左右所制备的脂质体颗粒较为均匀、细小,形态基本呈圆形.体外对质粒包裹实验结果表明,阳离子脂质体与质粒比为5:3,可完全包封质粒.用该阳离子脂质体对Hela细胞进行转染,24 h后,瞬时转染效率达35.6%.从初步实验结果看,所合成的阳离子脂质复合物结构总体与市售阳性成分结构类似,合成方法简单、廉价,体外对质粒DNA有很好包裹性能,细胞毒性低,然而体外对Hela细胞的转染效率还明显偏低.     

关于提高慢性气道疾病患者吸入制剂用药依从性的实践与探索

目的：探讨慢性气道疾病患者出院后使用吸入制剂依从性的影响因素及回访周期优化,探索提高患者用药依从性的方法。方法：收集秦皇岛市第一医院呼吸与危重症医学科2019年6月至2021年6月出院的医嘱长期使用吸入制剂的慢性气道疾病患者信息,通过调查问卷考察患者出院后2周、1个月、2个月、6个月、12个月、18个月使用吸入制剂依从性情况。结果：该研究纳入患者整体依从性较差,logistic回归分析显示文化程度低、无法正确操作装置、同时使用吸入制剂数量多是依从性差的危险因素,事后多重比较分析显示,临床药师分别于患者出院后2周、1个月、2个月、6个月、12个月、18个月持续电话随访可逐步提高用药依从性,12个月和18个月两组间依从性得分相似,可将随访至出院后12个月作为一个回访周期。结论：随访12个月可有效提高患者用药依从性,临床药师在随访过程中应重点关注涉及危险因素人群,加强此类患者的用药教育、用药提醒。     

新型阳离子脂质体制备及其体外转基因特征

背景：阳离子脂质体及胶束、纳米粒等转基因载体是目前非病毒转基因载体领域研究热点;而目前市售转基因试剂盒价格昂贵,并且基本上都是进口商品,如果能够开发一种价廉,转基因效率高,具有自主知识产权的转基因试剂盒将展现广阔市场前景。 目的：合成一种新型阳离子脂质复合物,并制备相应阳离子脂质体,对其体外转基因效率进行考察。 方法：以1-乙基-3- (3-二甲胺丙基)碳二亚胺、胆固醇、丁二酸酐为原料合成阳离子脂质复合物,采用薄层色谱、红外光谱等方法对产物进行结构表征。然后用薄膜分散法,将适当比例的二油酰磷脂酰乙醇胺和阳离子脂质复合物混合制备成阳离子脂质体,并用其包封含绿色荧光蛋白报告基因的真核表达质粒pEGFPC1,对人宫颈癌Hela细胞株进行体外转染。 结果与结论：通过两步法合成了一种全新的阳离子脂质复合物——胆固醇-丁二酸酯-1-乙基-3- (3-二甲胺丙基)碳二亚胺,薄层色谱及红外光谱结果表明合成了预期产物。薄膜分散法制得阳离子脂质体,其中以这种阳离子脂质复合物和二油酰磷脂酰乙醇胺摩尔比为1∶1左右所制备的脂质体颗粒较为均匀、细小,形态基本呈圆形。体外对质粒包裹实验结果表明,阳离子脂质体与质粒比为5∶3,可完全包封质粒。用该阳离子脂质体对Hela细胞进行转染,24 h后,瞬时转染效率达35.6%。从初步实验结果看,所合成的阳离子脂质复合物结构总体与市售阳性成分结构类似,合成方法简单、廉价,体外对质粒DNA有很好包裹性能,细胞毒性低,然而体外对Hela细胞的转染效率还明显偏低。     

草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸对人外周血单个核细胞的影响

目的 探讨不同浓度的草甘膦（glyphosate，GLY）及其代谢物氨甲基膦酸（aminomethylphosphonic acid，AMPA）对人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMC）的影响。方法 将高（5 mmol/L）、中（0.5 mmol/L）、低（0.05 mmol/L）三种浓度的GLY及AMPA与人PBMC共孵育，采用逆转录-聚合酶链反应（real-time PCR，RT-PCR）和荧光探针法检测炎性因子白细胞介素（interleukin，IL）IL-1β和IL-6、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor，TNF-α）、细胞凋亡相关标志胱天蛋白酶（cell apoptosis related marker cystatin，Caspase）Caspase-3和Caspase-9、B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）和Bcl-2同源相关蛋白x（Bcl-2-associated x，Bax）、DNA甲基化标志DNA甲基转移酶（DNA methyltransferases，DNMT）DNMT1和DNMT3A、DNA去甲基化酶TET3（tet methylcytosine dioxygenase 3）、组蛋白甲基化修饰标志酶（euchromatic histone lysine methyltransferase，EHMT）EHMT1和EHMT2、组蛋白脱乙酰基酶（histone deacetylase，HDAC）HDAC3和HDAC5的基因表达，以及氧化应激标志活性氧（reactive oxygen species，ROS）和一氧化氮（nitric oxide，NO）的水平，观察GLY及AMPA对人PBMC的影响。结果 GLY及其代谢物AMPA均可诱导IL-6、IL-1β和TNF-α的分泌，其能力与浓度呈正相关，随着GLY、AMPA浓度的增加，Bcl-2基因表达降低，Bax、Caspase-3和Caspase-9基因表达增加。高浓度（5 mmol/L）GLY和AMPA可诱导DNMT1、DNMT3A和HDAC3的显著表达，及ROS和NO的含量增加，但不影响TET3、EHMT1、EHMT2基因的表达。结论 GLY及其代谢物AMPA对人PBMC具有潜在毒性，其效应可能与其参与炎性因子、细胞凋亡、氧化应激、DNA甲基化及组蛋白翻译后的修饰调控相关，且具有明显剂量依赖性。