甘草水提物中miRNA对人免疫细胞基因表达的影响

微小RNA(micro RNA,miRNA)是一类在转录后水平调节基因表达的非编码小分子RNA,其调控基因表达、影响细胞活性的功能已为人们所重视。近年来miRNA的跨界调控成为新的研究方向,为人们更全面地认识和了解miRNA的功能提供了新的视角。植物miRNA由于通常经过了甲基化修饰,因此较为稳定,不易降解。前期研究表明,甘草干燥药材的水煎剂中存在着丰富的小分子RNA,这为了解甘草的作用机制提供了新的思路。在本研究中,利用从甘草水煎剂中提取的小分子RNA以及合成的miRNA模拟物(mimic)作用于分离自健康人的外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),然后利用RT-PCR对其模式识别受体(PRR)基因以及部分转录因子、信号分子和细胞因子的基因表达变化进行了分析。结果表明甘草miRNA对人免疫细胞的基因表达具有明显的调节作用,能够显著抑制T细胞分化相关基因的表达,以及炎症和凋亡相关基因的表达。这为进一步更全面地了解甘草的作用机制以及中药新药的研制带来了新的思路。     

通过基因芯片筛选创伤修复差异表达基因

目的通过基因芯片筛选同真皮间充质干细胞相关的创伤修复差异表达基因。方法利用贴壁生长的特性分离大鼠真皮间充质干细胞，用Hpure提取伤口液刺激前后dMSCs和创伤前后大鼠皮肤组织中总RNA。PCR扩增已构建抑制消减杂交差异表达文库中485个克隆的插入片断，送北京博奥制作基因芯片。提取的RNA反转录后分别同芯片杂交，找出在细胞水平和组织水平同时高表达的克隆。将这些克隆测序，进行生物信息学分析。结果分离的大鼠真皮间充质干细胞呈纺锤形，在体外显示多向分化潜能。抽提伤口液刺激前后dMSCs和创伤前后大鼠皮肤组织中总RNA，反转录后和基因芯片杂交，发现可能同创伤愈合相关的13条基因，其中热休克蛋白70（HSP70），基质金属蛋白酶3（MMP3），白细胞蛋白酶抑制因子（SLPI）等可能在创伤愈合中有重要意义。结论抑制消减杂交和基因芯片结合是筛选差异表达基因的一种有效方法。伤口液刺激前后dMSCs中差异表达基因的发现能为从基因水平探讨dMSCs参与创伤愈合的分子机制提供新的研究靶点。     

生活饮用水中氯化物测定的方法研究

目的:探究硝酸银检测氯化物含量的方法。方法:用150 ml三角烧瓶取代蒸发皿,用磁力搅拌取代玻棒手工搅拌,在磁力搅拌下用硝酸银标准溶液滴定水样中氯化物的含量。结论:方法具有灵敏度高、准确度高、干扰少的特点,可广泛应用于生活饮用水及水源水氯化物的检测。     

我国本土52例新型甲型H1N1流行性感冒临床特点及治疗

目的：了解我国本土发生的甲型H1N1流行性感冒患者的临床及流行病学特点以及抗病毒治疗效果。方法：自2009-11～12,我院共收治住院治疗观察患者52例,对所有患者临床表现特点、化验室检查及流行病学特点、抗病毒治疗后H1N1-RNA转阴时间均进行了详细的观察记录。结果：52例患者临床症状以发热,咳嗽所占比例为高。结论：H1N1-RNA的转阴时间与白细胞计数存在一定的关系。     

血管性痴呆大鼠颈内动脉输注脐血单个核细胞与血脑屏障的相关性研究

目的探讨脐血单个核细胞(human cord blood mononuclear cells, HCMNCs)颈内动脉输注能否透过血管性痴呆大鼠血脑屏障,以及在脑易损伤部位定居并存活情况.方法大鼠随机分为对照组、模型组和术后6 h、24 h、3 d、7 d、2周5个治疗组,(n=6).改良Pulsinellis四血管阻断法建立VD大鼠模型.治疗组颈内动脉输注BrdU标记的HCMNCs(3×106/0.5 ml).采用穿梭箱系统检测大鼠学习记忆能力;免疫组化法检测移植后4周 HCMNCs在脑内分布、存活情况.结果 HCMNCs广泛分布于脑组织,主要集中在海马和大脑皮质区,特别是血管周围;术后6 h组大鼠脑内HCMNCs为(3 598±311),24 h和3 d组最多(4 311±310),(4 426±399),7 d组(3 726±356)、2 周组(2 525±298)则呈进行性减少(P《0.05,P《0.01).注射后2、4周大鼠AAR比率,6 h组均高于模型组(P《0.01),24 h、3 d组较6 h组显著增高(P《0.05),7 d组开始下降,显著低于3 d组(P《0.05);2周组更进一步下降,但仍比模型组显著增高(P《0.05,P《0.01).结论颈内动脉输注HCMNCs可透过VD大鼠血脑屏障向脑易损伤部位迁移聚集并存活,显著改善大鼠学习记忆功能,但其透过血脑屏障具有特定的适宜时间窗.     

胰岛、肝细胞水平胰岛素抵抗与系统胰岛素抵抗关系的研究

目的通过观察酪氨酸磷酸化的胰岛素受体底物(P-Ikbα)在胰岛素抵抗小鼠肝脏、胰腺的表达随时间变化的差异性,了解细胞水平胰岛素抵抗与系统胰岛素抵抗的关系。方法 C57小鼠随机分为高脂组、胰岛素兴奋组和对照组,均尾静脉监测血糖、体重及胰岛素水平变化。取肝脏、胰腺应用Western Blot方法检测P-Ikbα的表达。结果与对照组相比,高脂组和胰岛素兴奋组肝脏、胰腺P-Ikbα蛋白表达随时间延长而减少。血清胰岛素水平在造模第7天升高,而肝脏的IRS-1酪氨酸磷酸化在第14天末低于正常对照组,胰腺在第21天末低于正常组。结论肝脏IRS-1酪氨酸磷酸化水平的降低早于胰腺;血清胰岛素升高发生时间早于细胞水平胰岛素抵抗发生时间。     

中国居民颅内动脉粥样硬化性狭窄危险因素的meta分析

目的 探讨中国大陆地区居民性别、吸烟、饮酒、高血压、糖尿病、血脂代谢异常等危险因素与颅内动脉粥样硬化性狭窄(intracranial atherosclerotic stenosis,ICAS)的关系.方法 系统检索中国生物医学文献数据库、中国期刊全文数据库、MEDLINE和EMBASE数据库.综合效应分析采用RevMan 5.0.23版本软件进行meta分析.经异质性检验后对性别、吸烟、饮酒、高血压、糖尿病进行OR值的合并;血脂代谢异常(TG、TC、HDL-C、LDL-C)进行MD值的合并;绘制漏斗图和计算失安全系数判断发表偏倚;敏感性分析检验meta分析结果稳定性.结果 最后9篇文献纳入meta分析,均为病例-对照研究,研究论证强度中等.性别(男性)、吸烟、饮酒、高血压、糖尿病对ICAS影响的合并OR(95%CI)值分别为1.00(0.82～1.23,P=0.99)、1.04(0.82～1.33,P=0.74)、0.91(0.69～1.20,P=0.51)、1.35(0.73～2.50,P=0.33)和1.71(1.04～2.81,P=0.03);TG、TC、HDL-C、LDL-C对ICAS影响的合并MD(95%CI)值分别为0.12(0.00～0.25,P=0.05)、0.06(-0.09～0.20,P=0.43)、-0.12(-0.23～-0.01,P=0.03)和0.24(0.14～0.33,P<0.001).结论 基于目前的研究,中国大陆地区居民糖尿病、LDL-C是ICAS的危险因素;HDL-C是ICAS的保护因素;尚无证据显示男性、吸烟、饮酒、高血压、TG、TC是ICAS的危险因素.     

白藜芦醇通过抑制Akt/mTOR信号通路活性促进肺癌细胞自噬发挥抗肿瘤效应的研究

目的 探讨白藜芦醇对肺癌细胞生长活性的抑制效应及可能的机制。方法 稳定培养肺癌细胞系H292,分别加入含10、20、40 μmol·L^-1白藜芦醇的培养基进行干预,采用CCK-8、流式细胞术、细胞集落形成实验检测白芦藜醇对H292细胞生长活性的影响,采用免疫荧光、Western blotting检测白藜芦醇对细胞Akt/mTOR信号通路相关蛋白的影响。结果 （1） CCK-8检测结果显示,白藜芦醇对H292细胞增殖有明显抑制作用（P<0.05）,且呈时间和剂量依赖性,同时对H292细胞周期有明显影响,能阻滞细胞周期于G₂/M期。（2）白藜芦醇可明显抑制H292细胞集落形成（P<0.05）,并呈剂量依赖性。（3） Western blotting检测结果显示,白藜芦醇以剂量依赖的方式诱导H292细胞中LC3-II的累积。免疫荧光检测发现,白藜芦醇可诱导细胞核和线粒体中GFP-LC3显著增加。（4）自噬抑制剂3-MA能有效减弱白藜芦醇对H292细胞活力的抑制作用,溶酶体酸化抑制剂Bafilomycin A1则可促进白藜芦醇导致的LC3-II累积。（5）白藜芦醇可下调H292细胞中p-Akt、p-P70S6K、p-mTOR蛋白的表达（P<0.05）,而对Akt、P70S6K、mTOR蛋白的表达无明显影响（P>0.05）。结论 白藜芦醇可通过抑制Akt/mTOR信号通路抑制肺癌细胞的增殖。     

脐血单核细胞对VD大鼠认知功能及脑组织BDNF的影响

目的观察颈内动脉输注脐血单核细胞(Human cord blood mononuclear cells,HCMNCs)对血管性痴呆(Vascular dementia,VD)大鼠认知功能及脑组织脑源性神经营养因子(Brain-derivedneurotrophicfactor,BDNF)含量的影响。方法改良Pulsinellis四血管阻断法建立VD大鼠模型;体外分离HCMNCs,术后24h颈内动脉输注数量为3×106/0.5ml的BrdU标记细胞;利用穿梭箱系统和ELISA法检测注射HCMNCs后2、4、8周VD大鼠学习记忆能力以及脑组织BDNF含量的变化。结果模型组大鼠主动回避反应比率明显低于对照组(P<0.01),治疗组较模型组显著提高(P<0.01)。术后2周模型组大鼠脑组织BDNF含量较对照组明显增高(P<0.01),4周时达到高峰(P<0.01),8周时则明显下降,与2周时相比有显著性差异(P<0.05);颈内动脉输注HCMNCs后治疗组大鼠脑组织BDNF含量较模型组显著升高(P<0.01),4周时最高(P<0.01),8周时略有下降,但仍维持在较高水平,与4周时相比无显著性差异(P>0.05)。结论颈内动脉输注HCMNCs可显著改善VD大鼠学习记忆能力,增加VD大鼠脑组织BDNF含量,具有脑保护作用。     

个体化健康教育对糖尿病患者医嘱遵从性的影响

目的　探讨个体化健康教育在糖尿病患者中的应用效果,以及对患者医嘱遵从性的影响。方法　102例我院收治的糖尿病患者按1∶1随机分为对照组（n=51）和观察组（n=51）,分别采用常规降糖治疗和配合护理个体化健康教育的降糖治疗。通过健康教育调查评估患者的医嘱遵从情况。采用SPSS 13.0进行卡方检验。结果　评估治疗依从（98.04% vs. 80.39%）、戒烟限酒（92.16% vs. 72.55%）、合理饮食（86.27% vs. 66.67%）、运动锻炼（80.39% vs. 58.82%）、血糖监测（84.31% vs. 62.75%）五方面指标,观察组患者的医嘱遵从率均明显高于对照组（P＜0.05）。结论　个体化健康教育在糖尿病患者中的应用能够有效提高患者对医嘱的遵从性,值得推广使用。