Notch信号通路对人胰腺癌细胞NF-κB活性和侵袭能力的影响

背景:Notch信号通路在多种人类恶性肿瘤的发生、发展中起关键作用.研究显示Notch与NF-κB信号通路之间的交互作用可促进胰腺癌进展.目的:明确Notch信号通路对胰腺癌侵袭性的影响及其可能机制.方法:体外培养人胰腺癌细胞株BxPC3,以Notch-1 siRNA下调其Notch-1表达,同时设置转染对照siRNA的阴性对照组和不予siRNA干扰的空白对照组.以Transwell细胞侵袭实验观察各组BxPC3细胞的侵袭能力,电泳迁移率变动分析(EMSA)检测NF-κB活性,蛋白质印迹法检测Notch-1、NF-κB p65、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达.结果:经Notch-1 siRNA干扰、Notch-1表达下调的BxPC3细胞,Transwell细胞侵袭实验穿膜细胞数较空白对照组和阴性对照组显著减少(26.5±1.3对78.5±2.4和76.7 ±2.2,P＜0.01),NF-κB活性显著降低(P＜0.01),NF-κB p65、VEGF、MMP-9蛋白表达显著下调(P＜0.05).结论:Notch-1可通过激活NF-κB促进其下游基因VEGF、MMP-9表达,由此增强胰腺癌的侵袭性.     

Caspase-1抑制剂对重症急性胰腺炎大鼠肝IL-18表达的影响

目的 观察Caspase-1抑制剂对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肝组织及肝内IL-18表达的影响.方法 采用4%牛磺胆酸钠逆行注入胰胆管诱发SAP模型.SD大鼠42只,随机分为3组:对照组(HC组,n=6);SAP造模 生理盐水组(SAP-S组,n=18);SAP造模 Caspase-1抑制剂组(SAP-ICE-Ⅰ组,n=18).SAP-S组于造模后2h腹腔注射生理盐水1ml,12h后重复1次;SAP-ICE-Ⅰ组于造模后2h腹腔注射ICE抑制剂,12h后重复1次.HC组模拟胰胆管穿刺操作,但不注射药物.SAP-S组与SAP-ICE-Ⅰ组于造模后6、12、18h心脏穿刺抽血,测血清淀粉酶(AMY)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平,并测定腹水量,留取标本在光镜下观察胰腺及肝组织病理学改变,采用免疫组化方法 检测IL-18在肝脏中的表达和定位,并用Western blotting方法 检测肝内成熟IL-18蛋白的表达.结果 与HC组比较,SAP-S组与SAP-ICE-Ⅰ组血清AMY、ALT、AST水平明显升高,腹水量明显增多(P<0.01);与SAP-S组相比,SAP-ICE-Ⅰ各组血清AMY、血清ALT、AST水平和腹水量有显著下降(P<0.01).光镜下,SAP-S组胰腺和肝组织病理损害程度随时间明显加重,与SAP-S组相比,SAIXlCE-Ⅰ组对应时间点胰腺病变程度有所减轻,而肝组织损伤未见明显变化.免疫组化结果 显示,Kupffer细胞胞质中IL-18的表达在SAP-S组和SAP-ICE-Ⅰ组较HC组明显增多,而SAP-ICE-Ⅰ组较SAP-S组明显减少.Western blotting结果 显示,成熟的IL-18表达在SAP-S组各时间点明显升高,与HC组相比均具有显著性差异(P<0.01),SAP-ICE-Ⅰ组各时间点较SAP-S组显著减少(P<0.01),除6h组外均较HC组无显著差异(P>0.05).结论 Caspase-1抑制剂可以抑制成熟的IL-18蛋白的表达,可以有效改善SAP时受损的肝脏功能.     

中药穴位敷贴治疗围绝经期综合征临床应用

综合分析和总结了中药穴位敷贴治疗围绝经期综合征的临床应用。从敷贴治疗(包括作用机制、穴位选择)及临床运用等方面进行论述。肾虚是围绝经期综合征发生的基本病机,但常病及他脏,导致多脏受累。经穴位敷贴治疗后,能够明显改善相关疾病症状,提高临床治愈率,提升围绝经期妇女的生活质量。     

我院Ⅰ类切口抗生素使用情况及应对措施

手术期预防性应用抗生素是防止术后感染的一项重要措施,但如使用不合理则可能导致耐药菌的产生,给患者带来危害,也加重了其经济负担。而Ⅰ类切口手术作为清洁手术,使用抗生素应更加慎重。笔者对我院Ⅰ类切口手术使用抗生素的情况进行调查,总结存在的一些问题,并有针对性地提出了     

细菌双杂交系统在细胞外蛋白质相互作用中的应用

目的:探索应用细菌双杂交系统在细胞外蛋白质之间相互作用的可行性.方法:应用Stratagene BacterioMatch two hybrid system,以pTRG构建编码TRAIL细胞外可溶性区域序列融合表达质粒;以pBT构建编码DR4、DR5、OPG等的细胞外区域序列融合表达质粒.重组质粒分别相应共转化报告菌株XL1-Blue MRF,报道基因产物以抗羧苄青霉素和β-半乳糖苷酶活性作为转录激活的指标.结果:pTRG-TRAIL与pBT-DR4,pTRG-TRAIL与pBT-DR5及对照组分别共转化后在高浓度羧苄青霉素(500 μg/ml以上)筛选下宿主菌呈转录激活状态,pTRG-TRAIL与pBT-OPG 组共转化后在低浓度羧苄青霉素(250 μg/ml以下)筛选下宿主菌呈转录激活状态,用X-Gal-PETG平皿可以进一步验证阳性克隆.对照组pTRG-TRAIL与pBT-LGF2,pBT-DR4、pBT-DR5或pBT-OPG与pTRG-Gal11 4组共转化后呈阴性.结论:所用的双杂交序列皆为编码这些蛋白质的细胞外区域,而这些蛋白质本身的相互作用已有其他报道验证,所以细菌双杂交系统可以用于细胞外蛋白质的相互作用研究.     

皮肌炎误诊为慢性乙型肝炎2例分析

皮肌炎与慢性乙型肝炎患均有乏力的症状，可以缺乏阳性体征，两病因不同，治疗方案相异，预后亦不同。现就2例皮肌炎患最初误诊为慢性乙型肝炎报道如下。     

2008--2012年南京市鼓楼区手足口病流行特征

目的了解南京市鼓楼区手足口病流行情况,为制定防控措施提供依据。方法收集南京市鼓楼区2008--2012年手足口病发病资料,用描述流行病学方法对资料进行分析。结果南京市鼓楼区2008--2012年共报告手足口病4096例,年均发病率为125．03／10万,无死亡病例。发病率逐年上升,不同年份间发病率差异有统计学意义。病例分布季节性明显,发病高峰位于5—7月。病例主要为5岁以下儿童,发病率男性高于女性。不同街道发病率差异有统计学意义,以江东街道为高。病原检测显示EV71及Cox A16均有发现。结论南京市鼓楼区2008年以来手足口病发病呈逐年上升趋势,病例的时间、地区、年龄和性别分布存在明显差异,针对性防控措施应予加强。     

南京市居民食物与健康KAP状况调查

[目的]了解南京市居民对食物与健康知识的认知、态度与行为(KAP)现状,为在居民中开展食物与健康知识宣教干预性研究提供科学依据.[方法]采用自制的居民食物与健康KAP调查问卷,对4280名居民进行问卷调查.问卷采用匿名方式填写,当场收回.[结果]南京市居民食物与健康知识总体知晓率为41.6%;广播电视是居民获取食物与健康信息的主要渠道;86.5%的居民希望获得食物与健康方面的知识;被访者文化程度越高,食物与健康知识知晓率越高.[结论]居民食物与健康知识整体水平较低.获取相关知识的态度较为积极.在食物与健康知识和行为习惯方面,需要对居民进行宣教干预,使他们获得更多的食物与健康知识,改变不良的行为习惯.     

聚水杨酸氧化还原响应型纳米载药系统的制备及体外评价

目的 将聚水杨酸(poly-salicylic acid,PSA)连接到羧甲基壳聚糖上,使其形成自组装纳米粒(nanoparticles,NPs),并进行表征和体外评价。方法 以O-羧甲基壳聚糖(O-carboxymethyl chitosan,OCMC)作为亲水骨链,通过二硫键将PSA连接在羧甲基壳聚糖上。利用核磁共振氢谱(¹H-NMR)、红外光谱(IR)确证聚合物的结构;采用超声法制备自组装NPs,并对其粒径、Zeta电位进行表征;采用芘荧光探针法测定NPs的临界聚集浓度(critical aggregation concentration,CAC);测定载DOX NPs包封率和载药量;MTT试验考察载药NPs的体外抗肿瘤活性。结果 OCMC二硫键连接PSA NPs(OCMC-SS-PSA NPs)的粒径为(148.5±2.3)nm;CAC值为(0.069 3±0.001 3)mg·mL^-1;还原响应性和pH敏感性良好。DOX/OCMC-SS-PSA NPs的粒径为(160.5±1.7)nm,载药量为(17.43±0.56)%,包封率为(89.67±1.23)%。MTT试验表明OCMC-SS-PSA NPs具有良好的生物安全性;细胞摄取试验表明DOX/OCMC-SS-PSA NPs在细胞内滞留时间更长。结论 OCMC-SS-PSA NPs粒径较小,具有良好的还原响应性、pH敏感性和生物安全性。OCMC-SS-PSA NPs可作为兼具还原响应性和pH敏感性的纳米给药系统。     

载姜黄素的透明质酸-熊果酸-硫辛酸交联纳米粒的制备及其体外抗肿瘤活性

目的 制备载姜黄素的透明质酸-熊果酸-硫辛酸交联纳米粒（Cur/cLA-HU NPs）,并进行体外抗肿瘤活性评价。方法 以载药量、包封率为指标,采用超声法,通过单因素考察优化Cur/cLA-HU NPs的制备工艺,并对Cur/cLA-HU NPs的粒径、Zeta电位、形态和体外释药情况进行评价。通过荧光倒置显微镜分析HepG2细胞对Cur/cLA-HU NPs的摄取,以MTT法考察Cur/cLA-HU NPs对HepG2细胞的毒性。结果 最佳载药工艺为：以甲醇为药物姜黄素有机溶剂,以药质比4∶10进行投料,超声于100 W下次数为3次,每次处理3 min,超声程序设置为开2 s、停4 s。Cur/cLA-HU NPs的包封率为（87.91±1.51）%,载药量为（16.64±0.45）%,粒径为（172.3±2.57）nm,PDI为（0.174±0.021）,分散均匀,Zeta电位为（−35.3±2.12）mV。Cur/cLA-HU NPs具有还原响应性,释放药物的快慢受到GSH浓度的影响;靶向肿瘤细胞,且被细胞快速摄取;对HepG2人肝癌细胞增殖具有明显抑制作用。结论 Cur/cLA-HU NPs载药量和包封率高,其体外抗肿瘤活性稍优于姜黄素,具有肿瘤靶向性。