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应用单细胞多重PCR进行性别鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
目的建立一种准确、快速、简便的在单细胞水平进行性别鉴定的技术.方法应用多重 PCR同时扩增单个活检细胞的Y染色体特异重复序列(DYZ1)及X染色体特异重复序列(DXZ1).结果 40个淋巴细胞(XY)成功地扩增出DXZ1电泳带(316bp)和DYZ1电泳带(154bp),正确率为100%;40个淋巴细胞(XX)中有39个成功地扩增出一条DXZ1电泳带(316bp),正确率为98%.结论采用DYZ1和DXZ1引物对单个细胞同时扩增进行性别鉴定是一种简单可靠的方法,可用于胚胎种植前诊断及无创性产前诊断. 相似文献
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目的研究小鼠鼠源性的抗脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)单链可变区片段(single-chain fragment variable, ScFv),即在大肠埃希菌TG1中的表达,并筛选出对LPS具有较高亲和力的ScFv. 方法将预先构建好的有效库容量为4.75×106的噬菌体抗体库接种至SOBAG培养基上,隔夜培养后扩容至约1×1010;严格控制lac启动子的表达,仅当加入M13KO7辅助噬菌体后才使ScFv以附着型的形式表达,然后利用LPS淘筛特异性的ScFv,富集的噬菌体阳性克隆重新感染TG1;最后随机挑选出190个菌落在96孔培养板分别培养单个含特异性ScFv的TG1菌落,经间接ELISA检测抗LPS的ScFv. 结果淘筛一轮过后即有3×104阳性菌落长出,190个菌落经间接ELISA检测有两个阳性克隆.结论成功地使鼠抗LPS ScFv在大肠埃希菌中表达,并从中筛选出了两株抗LPS ScFv. 相似文献
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目的探讨早发型重度子痫前期孕妇检测自身抗体的临床价值。方法选取2010年7月至2013年12月于本院产科住院治疗的重度子痫前期孕妇57例,联合检测自身抗体与抗心磷脂抗体。重度子痫前期的孕妇分为3组:早发型重度子痫前期组20例;晚发型重度子痫前期组27例;慢性高血压并发重度子痫前期10例,并选取正常妊娠晚孕组42例为对照组。同时进行了一般情况(年龄、血压、24 h尿蛋白定量)、肾功能指标(尿素氮、肌酐、尿酸和胱抑素C)、不良结局(子痫发作、心衰、低蛋白血症、S/D值异常增高、胎死宫内、新生儿死亡)的比较,并进行定期随访。结果重度子痫前期各组尿素氮、肌酐、尿酸和胱抑素C明显高于正常妊娠组,以早发型重度子痫前期组肾功能损害最严重。早发型子痫前期组自身抗体阳性率35%,晚发型子痫前期组阳性率11%,慢性高血压并发重度子痫前期组阳性率20%,正常妊娠晚孕组自身抗体检出阳性率7.14%。早发型子痫前期组与正常妊娠组及晚发型子痫前期组比较具有统计学差异。自身抗体阳性组病情重、不良结局发生率高。子痫前期各组及正常妊娠对照组抗心磷脂抗体Ig G、Ig M均为阴性。结论早发型子痫前期孕妇病情凶险,肾功能损害严重,新生儿出生体质量低。早发型重度子痫前期与自身免疫性疾病存在相关性,与抗心磷脂抗体无相关性。因此,建议对早发型重度子痫前期患者可常规进行自身抗体的检测,以更好地判断其病情严重程度及预后,并能筛选出自身免疫性疾病,以指导下一次妊娠。 相似文献
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目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及其受体对体外培养的滋养细胞侵袭力及细胞内局灶黏附激酶(focal adhesion kinase, FAK)活性的影响.方法用AngⅡ及其受体拮抗剂缬沙坦处理体外培养滋养细胞,用Transwell小室模型测定体外侵袭能力,Western blot法检测细胞内FAK(tyr397)的磷酸化水平,同时观察量效及时效关系.结果 AngⅡ浓度为10-6 mol/L时,细胞侵袭力较对照组显著性升高(P<0.01),浓度为10-5mol/L时,细胞侵袭力低于对照组(P<0.05).10-5 mol/L AngⅡ处理细胞12 h时侵袭力达高峰,而对照组于48 h时达高峰.FAK(tyr397)的磷酸化水平随血管紧张素Ⅱ浓度升高而增强,10 min时活性最强,同时发现缬沙坦能显著阻断AngⅡ的作用.结论 AngⅡ通过与受体AT1R结合,可能通过激活细胞内FAK,促进滋养细胞的侵袭力.推测过度升高的AngⅡ通过干扰滋养细胞正常的浸润机制参与子痫前期的发生、发展. 相似文献
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Pregnancyinducedhypertensionsyndrome (PIH)isoneoffrequentobstetricdiseasestoinjurythehealthofaparturienandherneonate .OccasionallyPIHcanresultintheirdeath .TheetiologyofPIHremainsunknown[1] .Anewseriesofepidemicstudiesrevealsthatcoldenviron mentaltemperatureisariskfactortodevelopPIH[2 ] .Theseizureofeclampsiaiscloselyrelatedtothesuddenchang esofenvironmentaltemperature .Inthisstudy ,femaleWistarratswithidenticalgeneticbackgroundwereusedasamodeltodeterminewhetherre peatedcold stresswouldi… 相似文献
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目的探讨印迹基因H19对滋养细胞侵袭能力的影响,以期从分子遗传学角度来阐明滋养细胞侵袭行为的调控机制。方法含人全长H19 cDNA重组真核表达质粒pRc/CMV经测序鉴定正确后,转染滋养细胞株JEG-3,观察其H19 mRNA表达和细胞侵袭力的变化。结果质粒转染JEG-3细胞的转染效率〉50%,转染目的基因H19后mRNA表达较对照组显著升高;转染目的基因后JEG-3细胞穿膜细胞数明显少于未转染组和空载体转染组。结论H19基因过表达可抑制JEG-3的侵袭能力,为H19调控滋养细胞侵袭行为提供了直接的实验证据。 相似文献
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妊娠期血小板减少93例临床分析与护理 总被引:1,自引:0,他引:1
妊娠合并血小板减少症在临床上比较常见,血小板减少症在妊娠中的发生率为7.6%,主要原因有妊娠期血小板减少(gestational thrombocytopenia,GT)、子痫前期、特发性血小板减少性紫癜(ITP);少见的原因有抗磷脂抗体综合征、系统性红斑狼疮、血栓性血小板减少性紫癜等。其中GT约占妊娠合并血小板减少症的68.57%-81%。正确认识GT对妊娠结局的影响,加强围产期处理,对获得良好妊娠结局十分重要。同时,正确鉴别及处理GT,可避免过度治疗以及对母儿造成的不必要的伤害。本文对93例妊娠期血小板减少症患者的临床资料进行回顾性分析,探讨GT的诊断及治疗,以期使临床医师能够正确恰当地评价GT对母儿的风险, 相似文献
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