SH2A 基因对细胞信号转导的影响及其亚细胞定位

目的 研究Src同源域2(src homology 2，SH2)A基因在细胞信号转导中的作用并进行亚细胞定位。方法 通过RT—PCR方法扩增SH2A cDNA编码序列，构建真核重组表达载体pcDNA3．1-SH2A，利用脂质体转染肝癌Bel7402细胞、COS7细胞，检测蛋白酶C(protein kinaseC，PKC)、酪氨酸蛋白激酶(tyrosine protein kinase，TPK)、丝裂原激活蛋白激酶(mitogen activated protein kinase，MAPK)活性的改变；另构建pEGEP—SH2A，转染同前，荧光显微镜观察荧光定位。结果 测序结果显示真核重组表达载体pcDNA3．1-SH2A及pEGFP—SH2A中均含有SH2AcDNA编码序列；肝癌Bel7402细胞、COS7细胞转染pcDNA3．1-SH2A后，胞浆PKC的活性下降了40％左右，MAPK和TPK活性未见明显改变。荧光显微镜观察发现SH2A基因在细胞质中表达。结论 SH2A基因编码蛋白在PKC信号转导通路中起抑制作用；SH2A基因编码蛋白定位于细胞质。     

VEGF—C mRNA在口腔鳞癌中的表达

目的：探讨血管内生长因子－Ｃ（ＶＥＧＦ－Ｃ）ｍＲＮＡ在正常口腔粘膜、白斑及鳞癌等组织中的表达。方法：ＴＲ－ＰＣＲ法检测ＶＥＧＦ－Ｃ ｍＲＮＡ的表达。结果：鳞癌组织ＶＥＧＦ－Ｃ ｍＲＮＡ表达明显高于正常口腔粘膜及白斑（Ｐ〈０．０１）;鳞癌表达与病理分级（Ｐ〈０．０１）、淋巴结转移（Ｐ〈０．０１）密切相关,与临床分期无关（Ｐ〉０．０５）。结论：ＶＥＧＦ－Ｃ对鳞癌生长及转移有促进作用,有望作为检测淋巴管     

125I放射性粒子植入治疗前列腺癌

2007年7月-2008年2月,我院泌尿外科收治前列腺癌16例,均不具备前列腺根治手术条件.此类患者既往仅做睾丸切除手术,疗效欠佳.笔者采用125I放射性粒子植入治疗,经8个月随访初步结果满意.16例患者均可自行排尿,前列腺特异性抗原(PSA)均有不同程度下降,现报告如下.     

VEGF-siRNA对人舌癌TCA8113细胞体内及体外生长影响的初步研究

目的探讨针对血管内皮生长因子(VEGF)的小分子RNA干扰(siRNA)对舌癌TCA8113细胞体内和体外生长的影响。方法将两对特异性针对VEGF的siRNA真核表达载体,以空载体组做实验对照组,经脂质体转染人舌癌TCA8113细胞,经G418筛选后获得稳定表达,以未转染舌癌细胞作空白对照组,MTT检测转染后各组细胞增殖情况;将稳定转染的各组细胞接种裸鼠,接种后7 d开始,每4 d测量瘤体积,绘制肿瘤生长曲线,比较各时间段肿瘤生长,接种后47 d处死,比较瘤体积和瘤重。结果与实验对照组和空白对照组相比较,两个实验组细胞生长速度降低,细胞抑制率均显著增高,差异有统计学意义(P<0.05),裸鼠接种肿瘤生长缓慢,处死后测量到瘤体体积小、重量轻(P<0.05),而实验对照组和空白对照组细胞抑制率、瘤体体积、瘤重等差异无统计学意义(P>0.05)。结论VEGF-siRNA在体内和体外能有效的抑制人舌癌细胞的生长。     

siRNA抑制人舌癌细胞VEGF表达对MMP-9蛋白表达的影响

目的利用小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）抑制人舌癌Tca883细胞血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达,观察其对培养细胞和移植瘤基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）蛋白表达的影响。方法以稳定转染携带VEGF—siRNA真核表达载体的人舌癌Tca8113细胞（VEGF—siRNA1、VEGF—siRNA2）为实验组,以转染空载体人舌癌Tca8113细胞及未转染的人舌癌Tea8113细胞为实验对照组和空白对照组,将各组细胞分别接种于裸鼠皮下,用免疫细胞／组织化学法分别测定各组培养细胞和移植瘤VEGF及MMP-9的蛋白表达。结果在培养细胞和移植瘤中,与实验对照组和空白对照组相比,VEGF—siRNA1组和VEGF—siRNA2组VEGF染色平均灰度值高,差异有统计学意义（P〈0．05）;各组培养细胞中均未见MMP-9表达;各组移植瘤MMP-9染色平均灰度值之间的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论以siRNA干扰沉默人舌癌Tca8113细胞VEGF基因,可明显抑制细胞及移植瘤内VEGF蛋白表达,但是对MMP-9蛋白的表达无明显影响。     

吗丁啉与四磨汤口服液联用治疗运动障碍型功能性消化不良68例疗效观察

目的:观察吗丁啉与四磨汤口服液联用治疗运动障碍型功能性消化不良(FD)的疗效与不良反应.方法:68例运动障碍型FD患者随机平均分为两组,两组均给予吗丁啉10～20mg,3次/日,治疗组加用四磨汤口服液20ml,3次/日,疗程均4周.观察患者治疗前、后症状变化情况.结果:治疗4周两组上腹不适、餐后早饱、腹胀、嗳气、泛酸烧心、恶心呕吐等症状均有不同程度的改善.治疗组总有效率91.2%,对照组73.5%,两组比较,治疗组明显优于对照组,差异具有显著性(P＜0.05);结论:吗丁啉与四磨汤口服液联用治疗运动障碍型功能性消化不良,可提高疗效,不良反应少.     

鼻底整形术后右上切牙慢性根尖周炎引起左鼻底切口瘘1例

上前牙根尖周炎引起的脓肿或窦道多位于病灶牙附近的口腔前庭,由于鼻底手术,从鼻底切口处排脓较为罕见,治疗中易造成漏诊或误诊。我科收治了一例鼻底整形术后由于对侧上颌切牙根尖周炎引起的鼻底切口瘘病例,报道如下：     

腓骨移植联合红骨髓与骨碎屑骨泥填充治疗股骨头坏死

目的 评价腓骨移植联合红骨髓与骨碎屑骨泥填充治疗股骨头坏死的近期疗效. 方法 2006年3月至2012年3月,采用关节囊外吻合血管游离腓骨移植联合红骨髓与骨碎屑骨泥填充治疗股骨头坏死48髋病例,48髋按Ficat分期分为4组:Ⅰ期12髋、Ⅱ期24髋、Ⅲ期8髋、Ⅳ期4髋,对各期术前、术后最近一次Harris评分变化,Harris评分大于80所占比例、X线片改善、稳定、恶化以及人工关节置换率进行统计学分析(SAS3.0软件包),Harris评分用(x)±s表示.各组手术前后Harris评分均数比较用配对t检验;各组Harris评分80分以上的百分率、X线片稳定或改善的百分率、以及转为人工关节置换的百分率比较用Fisher确切检验,检验水准均为α=0.01. 结果 随访6～48个月,平均30个月,Ficat Ⅰ ～Ⅲ期手术后平均Harris评分有明显改善,差异有统计学意义(P＜0.01);而Ⅳ期病例手术前、后平均Harris评分差异无统计学意义;髋关节Harris评分优良率Ficat Ⅰ期100％、Ⅱ期91.6％、Ⅲ期62.5％、Ⅳ期25.0％;各组间Harris评分优良率、术后X线片好转或稳定率以及股骨头幸存率差异有统计学意义(P＜0.01);术后并发(躅)长屈肌挛缩2例. 结论 腓骨移植联合红骨髓与骨碎屑骨泥填充治疗股骨头缺血坏死近期疗效确切;影像学分期是影响疗效的主要因素.     

小鼠口腔癌模型骨髓播散细胞RB1CC1纯合性缺失的初步研究

目的初步探讨小鼠口腔癌模型重度异常增生时期骨髓播散细胞RB1CC1基因纯合性缺失及其意义。方法应用激光捕获显微切割(LCM)技术捕获35张重度异常增生时期小鼠骨髓单个核细胞涂片的单个细胞角蛋白阳性(CK+)细胞,单细胞全基因组扩增技术(WGA)扩增其DNA,PCR检测其视网膜母细胞瘤诱导卷曲蛋白(RB1CC1)的纯合性缺失情况,并与舌部正常、重度异常增生以及鳞癌组织各4例对照。结果 LCM成功捕获CK+细胞35个,WGA成功扩增3个,RB1CC1纯合性缺失情况分别为单个CK+细胞(2/3),舌癌变组织(2/4),舌部正常组织(0/4),重度异常增生组织(0/4)。结论小鼠口腔癌模型重度异常增生时期骨髓CK+细胞有RB1CC1基因纯合性缺失,该时期骨髓CK+细胞可能是播散肿瘤细胞。