白芍总苷对实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠肝脏中自然杀伤T细胞表达的影响

目的探讨白芍总苷（TGP）对实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）大鼠肝脏中自然杀伤T（NKT）细胞基因表达的影响。方法实验研究。45只Lewis大鼠采用随机数字表法分为正常对照组、EAU模型组和TGP干预组,每组15只。EAU模型组和TGP干预组注射含光感受器间维生素A结合蛋白（IRBP1177-1191）的乳糜液以诱导出葡萄膜炎,正常对照组注射等体积的不含IRBP多肽的乳糜液。于免疫后每天对TGP干预组大鼠进行TGP灌胃给药,其余2组给予0.9%氯化钠溶液灌胃,并每天采用裂隙灯显微镜观察各组大鼠眼前节炎症反应,记录发病程度,并进行炎症评分。免疫后第12天分别提取3组大鼠的眼球制成病理切片,观察炎症反应。收集3组大鼠肝脏CD4⁺T细胞,流式细胞仪检测NKT细胞的表达水平,观察变化趋势;采用RT-PCR和ELISA分别检测白细胞介素-4（IL-4）、干扰素-γ（IFN-γ）mRNA和蛋白表达情况。采用单因素方差分析进行数据处理。结果免疫后第12天,TGP干预组炎症评分和病理分级明显低于EAU模型组,但是高于正常对照组;与正常对照组相比,EAU模型组和TGP干预组NKT表达水平明显较高,且TGP干预组高于EAU模型组（P<0.05）;TGP干预组大鼠肝脏中IFN-γ的mRNA表达显著低于EAU模型组（P<0.001）;TGP干预组大鼠肝脏中IL-4mRNA低于正常对照组（P<0.001）,但明显高于EAU模型组（P<0.001）;TGP干预组大鼠肝脏IFN-γ蛋白浓度高于正常对照组（P<0.001）,低于EAU模型组（P=0.01）;TGP干预组大鼠肝脏中IL-4蛋白表达高于EAU模型组（P<0.001）。结论TGP可通过调节EAU大鼠IL-4、IFN-γ基因的表达水平,增加EAU大鼠中NKT细胞的表达数量,达到治疗葡萄膜炎的目的。     

基于网络药理学和生物信息学探讨龙胆泻肝汤治疗葡萄膜炎的分子机制

目的：探讨龙胆泻肝汤治疗葡萄膜炎的药效学研究和分子机制分析。方法：实验研究。在体实验验证龙胆泻肝汤治疗葡萄膜炎的疗效,利用中药网络药理学数据和分析平台查询并筛选复方龙胆泻肝汤的入血有效成分,并进行网络拓扑分析其可能的治疗靶点。通过查询多种已知疾病靶点数据库,筛选葡萄膜炎的治疗靶点,并与有效成分治疗靶点构建出有效成分-疾病治疗靶点网络,并筛选出关键节点;拓扑分析关键节点参与的信号通路并进行富集分析,筛选出中药复方龙胆泻肝汤治疗葡萄膜炎的可能信号通路。结果：在体实验结果证实龙胆泻肝汤能够减轻大鼠结膜充血、虹膜粘连,减轻前房、睫状体和视网膜炎症细胞浸润,具有治疗葡萄膜炎的的作用;网络药理学分析显示龙胆泻肝汤治疗葡萄膜炎主要通过MAPK信号通路、促性腺激素信号通路和雌激素信号通路,减少炎症因子的产生和细胞浸润,调节机体免疫状况,调控葡萄膜炎的发生发展。结论：龙胆泻肝汤治疗葡萄膜炎可能主要是通过MAPK信号通路、促性腺激素信号通路和雌激素信号通路,调控炎症细胞和炎症因子、自身免疫等来实现。