脂质体介导Neo R和Lac Z双标志基因共转导原代造血细胞及其表达的研究(英文)

在介导体内外基因转移方面,脂质体已显示出许多优于病毒载体的特征.然而,有关脂质体介导造血细胞基因转移的报道很少.本文描述了脂质体介导双标志基因(Neo~R和Lac Z)在体外共转移进入人及小鼠原代造血细胞的研究.基因转移的效率通过X-gal染色及观察集落的形成来评价.结果显示,在存在G418的体系中,转导细胞能够存活并形成集落,而未转导细胞则不能存活.同时,转导阳性细胞能够被X-gal染成蓝色.其蓝染阳性细胞率在人及小鼠造血细胞于G418选择前分别为13.33± 2.68%和16.28± 2.95%.经G418选择启分别达到46.06±3.47%及43.45±4.1%,显著高于筛选前(P<0.01).提示,利用脂质体这一简单、安全的转导策略在原代造血细胞可获得高效的基因转移及稳定的表达.同时,共转导双标志基因进入造血细胞可用作高集转导阳性细胞.这一结论对于临床进一步探讨造血重建的生物学特征、追踪白血病的复发机制以及利用造血细胞作为靶细胞进行基因治疗的研究提供了实验依据.     

Change of Coagulation Factor Ⅷ and Antithrombin Ⅲ Activity in Bank-Stored Blood

Blood storage and blood transfusion have beenimportantclinical work.In recentyears,the demandfor the quality of blood transfusion is getting higher.Great progress has been made in blood storage tech-nique and more and more reports on change in bloodcomponents during storage have been published.However,reports on dynamic changes in blood com-ponentsin bank- stored blood are stillrare.The paperinvestigated the dynamic change of blood componentsF :c and AT- in blood stored in blood bank un-der…     

A抗原表位模拟多肽融合表达载体的构建及鉴定

目的:构建血型A抗原模拟多肽融合表达载体,初步鉴定融合表达蛋白结合抗A抗体的能力.方法:PCR扩增血型A抗原模拟多肽(P17)和谷胱苷肽S-转移酶(GST)编码基因,并连接成P17-GST.双酶切后克隆入原核表达质粒pET 28 b,酶切、测序鉴定.以BL21(DE3)为表达菌,在IPTG诱导下表达P17-GST融合蛋白,Ni-NTA柱纯化蛋白.红细胞凝集抑制实验分析融合蛋白模拟血型A抗原的能力.结果:成功构建P17基因和GST基因融合的原核表达质粒pET28b-P17-GST,目的基因可以高效表达,纯化的融合蛋白以浓度依赖的方式抑制A型红细胞的凝集作用.结论:血型A抗原的模拟多肽序列与GST的融合表达蛋白可特异性结合抗A抗体,具有替代血型A多糖抗原潜能,为发展新型的抗A抗体滤除材料提供了依据.     

实时荧光定量PCR检测人类EZH2基因方法的建立

目的:建立SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR定量检测人类EZH2基因的方法.方法:将EZH2 RT-PCR扩增片段克隆入载体pGEM-T后,经测序鉴定正确后,进行纯化和定量及系列稀释,应用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测EZH2,建立标准曲线,熔解曲线分析产物的特异性.结果:该法检测的最低拷贝数为10,线性范围为101～108拷贝,相关系数r为-1.00,104copies/μl标本的批内变异系数(CV)和日间CV分别为1.0%和2.7%.熔解曲线分析显示单一的峰,熔解温度(Tm)为(83.42±0.13)℃.结论:实时荧光定量PCR方法检测EZH2基因,具有高敏感性、高特异性和高精确性等优点,可作为进一步研究EZH2的方法.     

孕期营养干预对胎儿体重的影响

目的:探讨孕期营养干预对胎儿体重的影响.方法:将2014年1月至2016年12月来我院进行孕期检查和分娩的228例孕妇分为观察组141例和对照组87例,观察组孕妇接受孕期营养干预,对照组孕妇按照传统孕期家庭饮食观念安排饮食,比较两组新生儿出生时胎龄、体重、Apgar评分,孕妇巨大儿发生率、分娩方式及分娩后满意情况.结果:观察组新生儿出生时体重明显低于对照组[(3.28±0.37)kg比(3.89±0.44)kg,P<0.05];观察组孕妇巨大儿发生率和剖宫产率均明显低于对照组(7.09％ 比16.09％,P<0.05),自然分娩率明显高于对照组(73.05％ 比49.43％,P<0.001);观察组孕妇分娩后总满意度明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:孕期营养干预有利于合理控制胎儿重量,提高自然分娩率和孕妇满意度.     

氨氯地平治疗老年高血压60例临床观察

高血压是主要的心血管危险因子,是全球范围内最大的公共卫生,而老年高血压病是老年人常见病,占老年人死亡第三位,据统计60岁以上老人1/3患高血压病,70岁以上有半数患高血压,心血管致残率和死亡率随着血压升高而增高,而心血管并发症随着血压增高而增高,高血压又是糖尿病患者发生大血管病变的独立危险因素,因此高血压患者进行降压治疗是迫切需要的.     

口腔正畸学课程思政教学研究

全面推进课程思政建设,提高人才培养质量是对我国高校教育工作的重点要求。课程思政以立德树人为核心,将思想政治培养贯穿教学全过程。该文结合口腔正畸学专业特点从明确课程思政目标、挖掘思政资源、课程思政教学设计、加强教学团队思政教育能力建设等方面进行了探索。     

Amp C酶检测方法的探讨

目的 建立简便检测肠杆菌科细菌中Amp C酶的方法。方法 分别采用双纸片确证法和多剂量协同法检测35株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,并用三维试验和Amp C酶酶量直接测定法进行对比,同时检测这些菌产ESBL的情况。结果 双纸片确证法检测出12株Amp C酶,不受ESBL的干扰,与直接酶量检测法完全一致,敏感性高于三维试验,多刑量协同法敏感性较差。结论 双纸片确证法可作为临床检测Amp C酶的方法。