妇科疾病中人乳头瘤病毒感染的分子流行病学调查

目的:探讨各种妇科疾病与人乳头瘤病毒感染的关系,建立不同妇科疾病和不同年龄段妇女人乳头瘤病毒感染的流行病学资料库。方法:应用反向点杂交技术分别对疾病组1 512例病人标本和正常组500例标本进行HPV检测,所得数据用SPSS 13.0软件包进行统计分析。结果:正常组500例标本中,阳性标本101例,感染率为20.2%,疾病组1 512例标本中,阳性标本523例,感染率为34.6%,其中双重感染82例,占阳性标本的15.7%,多重感染34例,占阳性标本的6.5%,而高危感染340例,感染率为22.5%,占阳性标本的65.0%,其中单纯HPV16亚型感染155例,占所有阳性标本的29.6%;不同年龄段、不同性生活史、不同妇科疾病以及不同首次性生活年龄的HPV感染检出率都有显著性差异。结论:正常组和疾病组的HPV感染率有显著性差异(2χ=36.37,P<0.01)。在HPV感染的普查中可以有重点的选择高危人群,这样更加有针对性,从而大大降低普查成本。     

三峡库区5433例病残儿先天性心脏病流行病学调查

目的 探讨重庆三峡库区16个区县儿童先天性心脏病的发生情况,为先天性心脏病人群干预及病因学研究提供参考.方法 利用重庆市病残儿医学鉴定平台,收集、回访、调查、整理三峡库区所属区、县5433例病残儿医学鉴定资料并从中筛选出418例先天性心脏病患儿,分析先天性心脏病与库区环境因素的关系.结果 大渡口区、涪陵区、长寿区、沙坪坝区、巴南区、万州区等儿童先天性心脏病发病率较高,奉节县等区县人群的患病率较低.418例先天性心脏病患儿中,室间隔缺损最多(44.7％),其他依次为房间隔缺损(10.8％)、动脉导管未闭(8.9％)、法洛四联征(7.7％)等.结论 室间隔缺损为重庆三峡库区先天性心脏病的主要类型,加大早期筛查力度,加强孕早期保健和防护,重视产前健康筛查,对预防儿童先天性心脏病具有较大意义.     

亲子鉴定中STR基因座D2S1338突变分析与解决对策

目的： 研究短串联重复序列(short tandem repeats,STR)基因座分型方法在亲子鉴定中的应用。方法：提取基因组DNA,应用IdentifilerTM 15+1和AGCU 21+1二个系统的STR基因座荧光标记试剂盒,对36个常染色体STR基因座进行检测。结果：在IdentifilerTM 15+1系统检验过程中,15个被检基因座除D2S1338基因座的分型结果不符合遗传规律,其余均符合遗传规律。应用AGCU 21+1 STR基因座荧光标记试剂盒补充检测,所检测的21个常染色体STR基因座全部符合遗传规律。结论：当D2S1338基因座发生了突变,应用AGCU 21+1 STR基因座荧光标记试剂盒进行补充检测,还可作为STR基因座发生突变的补救手段。     

基因芯片在乙肝病毒检测中的应用

[目的]评价基因芯片技术在同时进行乙肝病毒基因分型及耐药突变基因检测中的准确性、敏感性和临床应用价值.[方法]50例血清标本都用荧光定量PCR和基因芯片两种方法进行检测,然后对两种方法的结果进行比较,同时对基因芯片技术检测结果中乙肝病毒基因分型和耐药突变基因的情况进行分析.[结果]荧光定量PCR的阳性检出率为46%.基因芯片的阳性检出率为38%,其中10例为B型,9例为C型,结合荧光定量的结果,在整个基因芯片的检测结果中检测到的最低拷贝数为1.387e3 copies/ml.19例阳性都存在拉米夫定敏感位点,共检测到3例对拉米夫定耐药的患者(2例为rt204I突变,1例为rt108M、rt204V突变).[结论]基因芯片技术在同时进行乙肝病毒基因分型和耐药突变基因的检测中,结果准确、灵敏度高、通量性好,适合各大临床单位开展应用.     

L1、E6和E7基因序列分析

目的了解中国西南地区HPV16亚型基因的一级结构特点,为由HPV16亚型感染引起的疾病特别是宫颈癌的临床诊断、治疗提供理论依据。方法选取经分型明确为HPV16型感染的官颈癌组织32例,用PCR方法获得其E6、E7及L1基因的全长序列并进行测序分析。结果与德国标准株相比,32个标本中总共发现131（G—A）（Gly-Arg）、178（T—G）（Asp—Glu）、350（G-T）（Val—Leu）、647（A—G）（Asn-Asp）、846（T—C）（同义突变）、IA基因第966（C—T）（同义突变）、L1基因第1302（C-T）（同义突变）和L1基因第1434（A—G）（同义突变）等20个突变位。结论与标准序列比较,中国西南地区HPV16亚型L1、E6和E7基因存在一定范围变异,提示在预防治疗西南地区妇女宫颈癌病人以及研制该地区HPV疫苗时,需要注意这些位点的变异,特别是一些引起氨基酸变异的位点。     

三峡库区5433例病残儿先天性心脏病流行病学调查

目的 探讨重庆三峡库区16个区县儿童先天性心脏病的发生情况,为先天性心脏病人群干预及病因学研究提供参考.方法 利用重庆市病残儿医学鉴定平台,收集、回访、调查、整理三峡库区所属区、县5433例病残儿医学鉴定资料并从中筛选出418例先天性心脏病患儿,分析先天性心脏病与库区环境因素的关系.结果 大渡口区、涪陵区、长寿区、沙坪坝区、巴南区、万州区等儿童先天性心脏病发病率较高,奉节县等区县人群的患病率较低.418例先天性心脏病患儿中,室间隔缺损最多(44.7％),其他依次为房间隔缺损(10.8％)、动脉导管未闭(8.9％)、法洛四联征(7.7％)等.结论 室间隔缺损为重庆三峡库区先天性心脏病的主要类型,加大早期筛查力度,加强孕早期保健和防护,重视产前健康筛查,对预防儿童先天性心脏病具有较大意义.     

聚合酶链式反应-变性高效液相色谱技术在唐氏综合征筛查中的应用

目的:探讨聚合酶链式反应-变性高效液相色谱技术(polymerase chain reaction-denaturing high performance liquidchromatography,PCR-DHPLC)在唐氏综合征筛查中的应用。方法:针对21号染色体上的基因座D21S1409、D21S1422、D21S1435和GATA163G03设计引物,PCR扩增唐氏综合征患儿样本和正常样本,DHPLC仪检测;同步进行外周血染色体核型分析,并以核型分析为金标准,评价PCR-DHPLC技术的准确性。结果:柱温50℃时,唐氏综合征患儿样本DHPLC检测结果呈现特异唐氏综合征峰。结论:PCR-DHPLC方法具有较高的敏感性和特异性,可用于唐氏综合征的高通量快速筛查。     

利用液相芯片技术研究DAZL基因单核苷酸多态性与男性不育关系

目的 建立液相芯片检测DAZL基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)的方法,并探讨该基因SNP与男性不育的相关性.方法 实验分为由无精症和严重少精症组成的病例组与健康自愿者组成的对照组,基于Luminex 技术平台,应用等位基因特异性延伸反应(allele specific primer extension, ASPE),研究DAZL基因SNP260A→G和SNP386A→G的突变情况.结果 196例病例中SNP260A→G和SNP386A→G突变分别为6例(3.06%)和4例(2.04%),40例对照组中只有1例(2.5%)SNP260A→G突变,没有发现SNP386A→G突变.所有突变均为突变纯合体,且没有发现同时存在两个突变的标本.两个位点的突变频率在病例组和对照组间差异均无统计学意义(P>0.05). 结论成功建立并应用液相芯片检测单核苷酸多态性的方法;DAZL基因SNP260A→G和SNP386A→G突变与成都地区男性不育没有明显相关性.