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目的探索大鼠海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)微囊小肝细胞样前体细胞(SHPC)移植治疗急性肝衰竭(AHF)大鼠模型的可行性和有效性。方法选择体质量150~180 g健康雄性Wistar大鼠10只。采用Retrosine(30 mg/kg)腹腔内注射联合2/3肝切除诱导雄性Wistar大鼠SHPC增殖模型,改进Seglen胶原酶灌注联合Percoll密度梯度离心分离SHPC,倒置显微镜、电子显微镜下观察,并进行免疫组织化学染色;静电液滴法APA微囊包埋。选择体质量180~220 g健康雌性Wistar大鼠20只,随机分为A组(微囊化SHPC腹腔内移植)、B组(空囊对照组);采用D-氨基半乳糖腹腔注射制备大鼠AHF模型;观察模型一般状况及生存时间,术后不同时间点检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBiL)及血氨水平,检测肝脏病理改变。结果Retrosine腹腔内注射联合2/3肝切除成功建立SHPC增殖模型,分离获得细胞符合大鼠SHPC;APA微囊呈光滑规则球形,直径为(300±40)μm,强度、韧性良好,囊内细胞形态完整,存活率为(90.0±1.3)%。微囊SHPC移植后,A组较B组中位生存时间延长(119.00 h vs 70.33 h),差异有统计学意义(P<0.05);随时间延长,A组大鼠血清ALT、AST、TBiL及血氨水平明显下降,均低于移植前水平,各时间点A组明显低于B组,差异有统计学意义(P<0.05);肝组织病理显示A组肝细胞损伤较B组明显改善;存活48 h大鼠腹腔内微囊保持完整光滑球形,囊内SHPC形态完整,1周微囊有散在破损皱缩,囊内细胞有增多聚集趋势,细胞存活率85%以上。结论APA微囊化大鼠SHPC腹腔内移植能改善大鼠AHF模型生存时间、生物化学指标(ALT、TBiL等)及病理损伤。 相似文献
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人胎肝干细胞的体外培养及诱导分化 总被引:8,自引:0,他引:8
为体外分离培养和诱导分化人胎肝干细胞 ,从原代分离培养人胎肝干细胞集落 ,免疫细胞化学鉴定细胞集落分子标志物的表达 ;在体外特定细胞因子作用下诱导干细胞定向分化为成熟肝脏细胞 ,对其生物学特性进行初步鉴定。结果 ,从人胎肝组织中成功分离表达AFP、Albumin、Cytokeratin等标志物的胎肝干细胞集落 ,在体外特定细胞因子作用下肝干细胞可定向分化为成熟肝脏细胞。因此人胎肝中同样存在具有干细胞特性的原始细胞 ,体外可定向分化为成熟肝细胞。人胎肝干细胞的分离培养对于生物型人工肝的制备及其深入研究奠定了良好的基础 相似文献
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肿瘤干细胞的研究现状 总被引:1,自引:0,他引:1
传统理论认为肿瘤生长是所有肿瘤细胞一起增殖的结果,因而治疗方法主要是针对肿瘤组织内的大多数细胞,常有复发和转移,使治疗失败。肿瘤干细胞的提出,可靶向性杀伤肿瘤干细胞从而使根治肿瘤和防止肿瘤复发和转移成为可能,且先前诸多关于肿瘤发生发展机制、细胞信号途径等研究成果可能需要重新评价,对传统的肿瘤治疗方式提出了巨大挑战。就肿瘤干细胞的起源、存在证据、肿瘤干细胞与正常干细胞之间关系、临床意义及展望综述如下。 相似文献
4.
因供肝缺乏,需人工肝的支持,以桥接肝移植。人工肝脏的研究已从非生物型发展到生物型。目前研制的生物型人工肝生物成分多用来源丰富、价格低廉的猪肝细胞。为适应生物型人工肝的临床应用,本研究参照和改良Naruse方法[2],大量制备了高活率的游离猪肝细胞,报道如下。材料与方法1.材料①杂种猪,雌雄不限,体重12~15kg。②Ⅳ型胶原酶(Sigma产品)、MEM、WEM(Gibico产品)。③氯胺酮、安定、肝素、生理盐水均为药用规格。④实验用水为三蒸水。2.试剂的制备(1)灌注液(perfusion bu… 相似文献
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小切口胆总管探查术后I期缝合的临床应用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 :探讨小切口胆总管切开取石后I期缝合的疗效及适应证。方法 :选择58例胆总管结石患者 ,常规经右上腹腹直肌开腹 ,切口长度6~8cm ,于十二指肠上方纵行切开胆总管 ,长度以结石大小而定 ,一般在2cm以内 ,胆总管切开取石后不放置T型管 ,以胆道镜探查胆道黏膜情况及结石 ,以取石钳及纤维胆道镜网篮取净结石 ,并确认远端通畅无残余结石及狭窄 ,应用5_0的可吸收胆肠吻合线I期缝合。结果 :所有病例均无胆瘘发生 ,术后平均住院时间为 (5 5±1 5)d ,具有住院时间短、痛苦小 ,并发症少、恢复快等优点。结论 :在严格掌握适应证前提下 ,胆总管切开取石后行I期缝合是可行的。 相似文献
6.
目的:探讨磁共振胆胰管造影(MRCP)对梗阻性黄疸患梗阻定位和定性的诊断价值及对治疗的指导意义。方法:对48例梗阻性黄疸的患进行MRCP检查,34例(70.8%)行手术治疗,14例(29.2%)行非手术治疗。结果:48例患中45例(93.8%)可通过MRCP明确诊断,并经手术或临床证实;2例(4.1%)硬化性胆管炎需结合其他临床资料做出诊断;1例(2.1%)胆总管结石误诊为胆管癌。结论:MRCP对胆道疾患诊断具有无创性、高灵敏度、高准确率等优点,能为梗阻性黄疸患临床治疗提供有效依据。 相似文献
7.
背景:目前研究认为在胚胎发育后的多种组织中存在一类干细胞群体,可分化为不同胚层的组织细胞;但又不同于胚胎干细胞,随着妊娠期间胚胎的发育胚胎干细胞会逐渐失去部分分化潜能,会出现一些特殊表型或分子标记,如CD105,称其为胚胎后亚全能干细胞.目的:根据胚胎后亚全能干细胞表达CD105的特性分离胎儿骨髓源性胚胎后亚全能干细胞,经体内外诱导使其分化为肝细胞样细胞并检测其功能.设计、时间及地点:动物随机分组,细胞分子生物学实验,于2003-03/2005-03在天津市第三中心医院卫生部人工细胞工程技术研究中心完成.材料:取22周龄左右胎儿股骨和胫骨骨髓分离出胚胎后亚全能干细胞.以雌性成年SCID鼠作为干细胞移植的受体.CD105免疫磁珠为德国Miltenyi Biotec产品.鼠抗人白蛋白抗体为美国Sigma产品.碱性成纤维细胞生长因子、肝细胞生长因子为英国PEPROTECH产品.方法:利用密度梯度离心结合免疫磁珠方法分离胎儿骨髓CD105(+)胚胎后亚全能干细胞,体外培养,用含30 μg/L肝细胞生长因20 μg/L碱性成纤维细胞生长因子的诱导培养基将其向肝细胞样细胞诱导分化.将24只SCID鼠随机分为干细胞治疗组和对照组,每组12只,均按800 mg/kg的剂量向腹腔内注射D-氨基半乳糖制备肝损伤模型.造模次日,干细胞移植组鼠在肝原位输注106左右CD105(+)细胞,对照组分别输注106左右的CD105(-)细胞或同等体积的培养液.主要观察指标:于干细胞移植后2,7d,1,3个月对肝脏组织行免疫组化检测人源白蛋白表达.结果:免疫磁珠筛选后的细胞免疫细胞化学检测CD105呈弱阳性表达:细胞在对数生长期的倍增时间为30 h左右:约传10代后进入衰退期.SCID鼠移植胚胎后亚全能干细胞3个月后在小鼠肝脏中可见有点状或小灶状的人白蛋白表达,对照组未见表达.结论:来源于胎儿骨髓的胚胎后亚全能干细胞可以在肝脏微环境下转化为肝细胞样细胞. 相似文献
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微囊肝细胞血液灌流治疗大鼠暴发性肝衰竭的实验研究 总被引:3,自引:0,他引:3
作为暴发性肝衰竭(falminanthepaticfailure,FHF)的一种治疗手段,人工肝辅助装置正在不断的发展,但至今尚无一种理想的人工肝[1]。我们在微囊肝细胞同种移植成功治疗FHF大鼠模型的基础上[2],建立起一种新型人工肝即微囊肝细胞血液灌流。一、材料和方法1.FHF大鼠动物模型应用健康雄性SD大鼠,10%D氨基半乳糖溶液一次腹腔内注射,剂量:1200mg/kg。2.采用改进的Seglen原位胶原酶(Ⅳ型)灌注法,经门静脉,腹主动脉双重灌洗分离新生雄性乳猪肝细胞。3.微囊肝细胞… 相似文献
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目的研究肝癌细胞发生发展及变化规律,探讨胎肝干细胞体外长期培养的变异归宿问题。方法原代分离培养人胎肝干细胞,从中筛选出一生长旺盛之集落,体外长期培养,并对其生物学特性进行初步鉴定。进行了细胞倍体分析;应用流式细胞术分析了细胞周期;在SCID鼠体内接种细胞进行成瘤性验证。结果从人胎肝组织中成功分离出一胎肝干细胞集落,在体外长期培养下可分化为肝癌细胞。其细胞增殖核抗原指数高达100%;倍体分析常见多倍体细胞;流式细胞术分析细胞周期,结果G1期细胞约占48%,G2期细胞约占18%,S期细胞约占34%。SCID鼠体内成瘤实验显示,接种细胞后2~3周成瘤,具有100%的成瘤性。显微镜下所见细胞大小不一,异型性明显,核仁大,核分裂活跃。结论人胎肝中存在具有干细胞特性的原始细胞,确实可分化为肝癌细胞。从人胎肝干细胞中成功分离培养出肝癌细胞对于肝癌发生发展及其变化规律的深入研究奠定了基础。 相似文献
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张金卷 《国外医学:生物医学工程分册》2003,26(3):117-122
肝干细胞又称肝卵圆细胞,在一定病生理条件下可向肝细胞和胆管上皮细胞、胰腺外分泌上皮等有限的几种组织细胞分化,具有多向分化增殖潜力,体外培养肝干细胞将为生物型人工肝提供一种新的细胞来源,肝干细胞移植不但可以替代坏死的肝组织,还可以刺激受体组织再生以达自身修复,治疗急性或亚急性肝坏死;同时为基因治疗提供新的可能。本将就肝干细胞分类、表面标志、来源、诱导分离方法及人类肝干细胞的研究综述如下。 相似文献