铅对大鼠C6细胞GRP78表达的影响

目的观察不用时间点暴露于不同剂量醋酸铅后大鼠神经胶质瘤C6细胞葡萄糖调节蛋白78(glucoseregulated protein 78,GRP78)表达量的影响,探讨不同时间不同剂量铅暴露对内质网应激反应的影响。方法Wistar大鼠神经胶质瘤C6细胞培养于含醋酸铅的培养液中,分别于不同时间终止染铅,用Western印迹法检测内质网GRP78表达量。结果(1)0.2μmol/L染铅组:7和30 d GRP78蛋白表达显著增高,其余各个时间点均无显著性变化;(2)1.0μmol/L染铅组:1 d后GRP78蛋白表达量开始显著增高,染铅30 d时已达到染铅前的6.3倍;(3)2.0μmol/L染铅组:0.5 h起GRP78表达量即显著增高,染铅7 d时达到高峰,是染铅前的4.3倍,到30 d时表达量又下降为染铅前的2.6倍。结论铅可以使Wistar大鼠神经胶质瘤细胞内质网上的GRP78蛋白应激性表达增加,内质网上的GRP78是铅的重要蓄积库。     

急、慢性染铅对大鼠海马细胞外信号调节激酶2影响

目的探讨急、慢性染铅对大鼠海马总量细胞外信号调节激酶2(ERK2)含量的影响。方法取正常30 d大鼠海马脑片培养,分别用含20μmol/L醋酸铅和不含醋酸铅的人工脑脊液(ACSF)孵育,作为急性染铅试验标本。大鼠在体染铅,取新生大鼠海马作为慢性染铅标本。用Western印迹法测定标本总量ERK2含量。结果急性染铅实验:染铅组和对照组总量ERK2含量均无明显变化。慢性染铅实验:慢性染铅总量ERK2含量于出生20 d后显著下降。结论急性染铅对总量ERK2含量无明显影响。慢性染铅使ERK2基因表达水平下降,总量ERK2含量明显减少。     

急、慢性染铅对cAMP反应元件结合蛋白的影响

目的探讨急、慢性染铅对大鼠海马cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的影响。方法急性染铅实验:取正常30d大鼠海马脑片培养,分别用含20μmol·L-1醋酸铅及不含醋酸铅的人工脑脊液(ACSF)孵育,作为急性染铅标本。慢性染铅实验:孕鼠在体染铅,取新生大鼠海马作为慢性染铅标本。用蛋白质免疫印迹法测定标本CREB的活性(即磷酸化CREB)和总量CREB的含量。结果急性染铅实验:海马脑片培养中,染铅组CREB的活性随时间延长而下降,染铅组和对照组总量CREB含量均无显著性变化。慢性染铅实验:总量CREB的含量无显著性变化。结论急性染铅引起CREB的活性下降,对总量CREB含量没有显著影响。慢性染铅总量CREB含量无显著性变化。     

pRIT—5质粒转化枯草杆菌及地衣芽孢杆菌NM105的研究

迄今文献中报道枯草杆菌基因克隆化都采用枯草杆菌１６８例及其突变体。采用我国分离的枯草杆菌Ｋｉ－２及突变体Ｋｉ－２－１３２ｔ ｆ ｙｅ ａａｈ ＃猓瘢? ｓｆｈ ａｌｔ ＮＭ１０５ｏ ＰＲＩＴ－５ｒｆｍ ｏｕｇ ＤＮＡｒ ｅｐｃ ｗｓｇ ａｌ? ｓｒｉ ，ｅｔ     

胞外蛋白酶对外源基因表达的影响

根据Ａ蛋白基因产物－Ａ蛋白特异与许多动物的免疫蛋白的Ｆｃ段结合这一特性，应用ＥＬＩＳＡ检测方法，测定Ａ蛋白基因地衣芽胞杆菌ＮＭ１０５中的表达情况，进而研究外蛋白酶对外源基因表达的影响。     

枯草杆菌对A蛋白基因表达的影响

Ａ蛋白基因载体质粒ｐＲＩＴ－５是一个Ｅ．ｃｏｌｉ和枯草杆菌的穿梭质粒。它在大肠杆菌中呈现氨基苄青霉素抗药性，氯霉素抗药性，在枯草杆菌中仅呈现Ｃｍｒ。利用细胞感受态转化及原生质体转化，将ｐＲＩＴ－５由大肠杆菌分别导入枯草杆菌Ｒ２５及地衣芽孢杆菌ＮＭ１０５，经Ｃｍ＾ｒ转化株筛选及酶切电泳，结果表明该Ａ蛋白基因载体质粒ｐＲＩＴ－５成功地转化至Ｒ２５及ＮＭ１０５中。     

急性染铅对大鼠海马CREB、c-FOS蛋白表达的影响

目的研究急性染铅对大鼠海马钙-钙调蛋白-钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ(Ca2+/CaM-CaMKⅡ)信号转导通路下游因子cAMP反应元件结合蛋白(CREB)、c-FOS蛋白表达的影响。方法取生后30d大鼠海马,将其切成350μm脑片,置于人工脑脊液(ACSF)液内稳定培养2h后,将其分为4组,对照组(ACSF液)、激活剂组(含谷氨酸的ACSF液)、抑制剂组(含KN-93的ACSF液)、染铅组(含谷氨酸及醋酸铅的ACSF液)。30min后收集脑片,采用免疫印迹法检测谷氨酸、KN-93及染铅对CREB、c-FOS的表达的影响。结果大鼠海马脑片培养时,各组总量的CREB、c-FOS表达差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,激活剂组活化的CREB、c-FOS表达显著增强,而抑制剂组及染铅组活化的CREB、c-FOS的表达显著降低。结论急性铅中毒对Ca2+/CaM-CaMKⅡ信号转导通路的影响可能通过抑制CaMKⅡ下游因子CREB、c-FOS的活性从而导致学习记忆功能的受损。     

60名鞍山地区孕期妇女对铅污染的认知程度调查分析

环境中工业化污染日趋加重,给我们现代化的生活带来了一系列潜在的社会及健康问题,孕期铅暴露对胎儿、婴幼儿的影响就是其中之一。孕期妇女的低水平铅暴露对妊娠过程的影响、对子代生长发育、智力发育的远期危害已日益受到重视。     

急性染铅对大鼠海马Ca2+-CaMKⅡ信号通路影响

目的 探讨急性染铅对大鼠海马Ca²⁺-Ca²⁺/钙调蛋白依赖蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)信号转导通路影响及作用机制.方法 取30 d健康大鼠海马脑片分别用含醋酸铅(20μmol/L)及不含醋酸铅的人工脑脊液(ACSF)孵育,分对照组、谷氨酸组、CaMKⅡ抑制剂(KN-93)组、谷氨酸+醋酸铅组,培养30 min后收集脑片,用Western Blot方法检测谷氨酸组、KN-93组、铅组中环腺苷酸(cAMP)反应元件结合蛋白(CREB)的活性.结果 染铅组于染铅0、120min时CREB活性分别为(0.305 6±0.020 8)和(0.172 2±0.023 3),随染铅时间延长明显降低;谷氨酸使磷酸化CREB活性提高47%,对非磷酸化CREB活性无影响;KN-93及谷氨酸+醋酸铅组CREB活性分别下降20%,45%,总量CREB表达无明显改变.结论 急性铅中毒可能通过抑制CaMKⅡ活性影响下游信号分子,造成对学习记忆功能的损伤.