人白细胞介素12双亚基共表达真核载体的构建

目的：为满足基因治疗的需要构建人白细胞介素12(hIL－12)双亚基共表达质粒。方法：先从人胚肾组织的逆转录产物中用PCR方法扩增出它的两个亚基P40和P35的cDNA全长，分别克隆入真核表达载体pcDNA3．1( ／-)中构建单亚基质粒——P( )／P40和P(-)／P35，然后再将二者串联克隆入真核表达载体poDNA3．1( )中得到P( )／IL-12质粒。脂质体转染HepG2后24，48h ELISA检测细胞培养上清内hIL-12蛋白质表达。结果：P( )／IL-12质粒经酶切和测序证明两亚基连接方向正确，序列无突变；ELISA检测细胞上清结果证实可表达hIL-12蛋白质。结论：成功构建P40和P35双亚基真核共表达质粒——P( )／IL-12，为模拟hIL-12生理表达方式，简化hIL-12基因治疗操作奠定了基础。     

人白细胞介素12双亚基共表达真核载体的构建

目的 :为满足基因治疗的需要构建人白细胞介素 12 (hIL 12 )双亚基共表达质粒。方法 :先从人胚肾组织的逆转录产物中用PCR方法扩增出它的两个亚基P4 0 和P3 5的cDNA全长 ,分别克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+/ )中构建单亚基质粒———P(+) /P4 0 和P( ) /P3 5,然后再将二者串联克隆入真核表达载体 pcDNA3.1(+)中得到P(+) /IL 12质粒。脂质体转染HepG2后 2 4,48hELISA检测细胞培养上清内hIL 12蛋白质表达。结果 :P(+) /IL 12质粒经酶切和测序证明两亚基连接方向正确 ,序列无突变 ;ELISA检测细胞上清结果证实可表达hIL 12蛋白质。结论 :成功构建P4 0 和P3 5双亚基真核共表达质粒———P(+) /IL 12 ,为模拟hIL 12生理表达方式 ,简化hIL 12基因治疗操作奠定了基础。     

细胞因子和一氧化氮与肝硬化病情变化的关系

由于促使肝硬化从代偿期向失代偿期发展的因素尚不十分清楚,给肝硬化治疗带来了一定的困难。肝硬化失代偿期的主要病理机制是肝细胞功能障碍、广泛的侧枝循环形成以及肝纤维化。研究表明,一氧化氮（ＮＯ）对肝细胞有损害作用,可加重门脉血流动力学紊乱［１］,同时发现某些炎性细胞因子如ＩＬ１β,ＴＮＦα及ＩＬ８等与ＮＯ产生有关［２］,其中ＴＮＦα及ＩＬ１β等对肝纤维化的影响已比较明确,但ＩＬ８及ＩＬ１２对肝纤维化的影响研究甚少。为此,笔者检测了肝硬化血清ＮＯ,ＩＬ８,ＩＬ１２及ＴＮＦα水平,旨在探讨…     

青春双歧杆菌和嗜酸乳酸杆菌对急性期和恢复期结肠炎小鼠Th1/Th2亚群的影响

Objective To observe and analyze the effect of B. Adolescentis and L. Acidophilus on the proportion of Th cell Th1/Th2 in peripheral blood of UC-mice in acute stage and recovery stage. Method 40 BABL/c mice were induced by 3% DSS water for 7 clays free drinking and then with distilled water for 10 days. They were randomly allocated in 4 groups: NS group, SASP group, BF0624 group and LT0637 group, also the fifth group-10 normal animals. The blood of mice were collected by removing their eyes at day 8 and day 18, and then the mononuclear cells were iso]atecl. The proportion of Th1/Th2 was analyze through flow eytometry,hy labeling the specific antibody ot Th cellular membrane with the CD4 antibody, and the cytoplastie antigen of Thl or Th2 with IIA antibody or IF'N-γ antibody. Result The proportion of Th1/Th2 in normal mouse was 0. 84 -0. 94,and it raised up in DSS-mice at both acute stage and recovery stage. It decreased unequally after 7 or 17 days'B, adoleseentis, L. Acidophilus and SASP treatment, but that of all three groups were lower than NS group (2.21±0. 83). Even the proportion got close to the normal animals after 17 days'L. Acidophilus -treated. Conclusion The proportion of Thl/Th2 increased at the acute stage and recovery stage of DSS-mice. Both B. Adoleseentis and L. Acidophilus had more effective than SASP on decreasing the proportion of Th1/Th2 at two stages,ospecially L. Acidophilus.     

套扎和硬化夹心联合与单纯硬化治疗食管静脉曲张出血的对比研究

目的了解套扎与硬化夹心联合法治疗食管静脉曲张出血(EVB)能否获得优于单纯硬化(EIS)的疗效。方法84例肝硬化EVB患者随机接受夹心法或单纯EIS治疗(夹心法组43例,EIS组41例)。EIS组硬化剂采用血管旁、内的联合注射法,夹心法组每条曲张静脉结扎2个皮圈,并于其间曲张静脉内注射1～3mL硬化剂。间隔7～12d重复1次内镜治疗,直至静脉曲张消除。结果夹心法组与EIS组静脉曲张消除率相似(93.0%比92.7%),但夹心法组达到消除的平均治疗次数明显减少(1.8±0.6比3.8±1.1),所需平均时间显著缩短[(17.1±7.1)d比(36.5±15.7)d],再出血率与并发症率明显下降(9.3%比31.7%;8.4%比26.8%)。随访期内两组静脉曲张复发率比较差异无显著性(11.6%比14.6%)。结论内镜下套扎与硬化夹心联合法治疗食管静脉曲张出血的疗效优于单纯硬化治疗的疗效。     

不同胃液中一氧化氮水平变化

目的：研究十二指肠球部溃疡和慢性浅表性胃炎患者胃液的ＮＯ水平，以及胃液ＮＯ水平与幽门螺杆菌（ＨＰ）感染的可能联系。方法：通过胃镜，抽取２３例十二指肠球部溃疡患者、２１例慢性浅表性胃炎患者和１９例正常人的胃液。用Ｇｒｉｅｓ法测胃液中ＮＯ水平。结果：十二指肠球部溃疡患者胃液ＮＯ水平是（３５．５６±６．１５μｍｏｌ／Ｌ），ＨＰ感染者是（３４．１２±８．１０μｍｏｌ／Ｌ）。两者显著高于正常个体（１８．６０±３．０７μｍｏｌ／Ｌ）。慢性浅表性胃炎患者（１９．７３±２．３２μｍｏｌ／Ｌ）和ＨＰ阴性者（２０．２６±３．４４μｏｍｌ／Ｌ）胃液中ＮＯ水平（Ｐ＜０．０１）。结论：结果提示ＮＯ可能是引起十二指肠球部溃疡的一个因素，ＨＰ感染可能是十二指肠球部溃疡患者胃液中ＮＯ增高的原因     

组织胺及地塞米松引胸腺细胞凋亡的研究

近来发现糖皮质激素在体内外均可诱导胸腺细胞凋亡，这就使Ｔ细胞在胸腺中成熟过程的细胞凋亡的调节机理变得复杂。为了发现其它因素对Ｔ细胞在胸腺成熟过程的影响及探讨其可能机理，本实验研究了组织胺与地塞米松诱导胸腺细胞凋亡。取Ｓｐａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠胸腺细胞，分别与组织胺、地塞米松、雷尼替丁及组织胺＋雷尼替丁体外培养。在０，６，２４及４８小时取培养细胞。用台盼蓝染色计死亡细胞，吖啶橙细胞核染色观察凋亡细胞形态。二苯胺法及ＤＮＡ电泳检测ＤＮＡ断裂片段。结果表明，６小时以前组织胺及地塞米松主要使细胞ＤＮ…     

N-乙酰半胱氨酸对葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠溃疡性结肠炎的保护作用

目的观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)灌肠对小鼠急性溃疡性结肠炎的作用。方法5%葡聚糖硫酸钠(DSS)自由饮用7 d诱导小鼠急性溃疡性结肠炎,同时予以生理盐水(NS)、5-氨基水杨酸(5-ASA)、NAC保留灌肠,观察小鼠体重、粪便性状、隐血便血,计算疾病活动度(DAI)积分,检测结肠长度、结肠过氧化物酶(MPO)活性、血清过氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量及肠黏膜病理改变。结果NAC组小鼠隐血、便血、体重下降、DAI积分、病理改变等均好于模型组、NS组(P<0.05),与5-ASA组疗效相似。NAC组SOD活力高于模型组,MPO活性、MDA含量则低于模型组(P<0.05)。结论NAC对DSS诱导的小鼠急性溃疡性结肠炎黏膜损伤有保护作用,其机制可能与抗氧化应激有关。     

原发性肝癌患者IL-8、IL-12、NO水平及意义

为探讨原发性肝癌患者机体内免疫细胞功能状况以及与肿瘤细胞之间的关系,检测了３８例原发性肝癌,３３例肝炎后肝硬化,３０例健康对照组血清中白细胞介素－８（ＩＬ－８）,白细胞介素－１２（ＩＬ－１２）,一氧化氮（ＮＯ）水平。结果表明：肝硬化组三项指标均显著升高（Ｐ〈０．０５）,肝癌组ＩＬ－８升高显著,ＩＬ－１２和ＮＯ水平无显著升高,认为此与肝癌患者机体内巨噬细胞存在严重功能障碍有关,动态检测三项指标对原发