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人Delta-like4~(ext)-93-217原核表达、纯化及蛋白活性检测 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:原核表达、纯化融合蛋白TRX/hDll4ext-93-217,并对其活性进行检测.方法:采用PCR方法扩增hDll4ext-93-217多核苷酸序列,克隆入pMD18T载体.测序正确后,将其亚克隆入pET32a(+)原核表达载体,获得pET32a(+)-hDll4ext-93-217载体.以该载体转化E.coli菌株BL21,IPTG诱导其表达.以镍离子螯合柱纯化目的蛋白,采用SDS-PAGE,Western Blot方法鉴定目的蛋白的表达;采用萤光素酶报告基因系统检测目的蛋白活性.结果:通过PCR扩增获得了目的片段hDll4ext-93-217,成功构建了该蛋白的原核表达载体pET32a(+)-hDll4ext-93-217.采用SDS-PAGE,Western Blot等方法均可检测到目的可溶性融合蛋白TRX/hDll4ext-93-217的表达.融合蛋白TRX/hDll4ext-93-217在25℃,IPTG终浓度0.5mmol/L条件下诱导表达8h的蛋白表达量最高.以镍离子螯合柱纯化,获得纯化融合蛋白TRX/hDll4ext-93-217浓度为1.5g/L,其荧光素酶报告基因的刺激活性与空白对照... 相似文献
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目的了解荧光标记法在医院环境清洁质量评估中的应用效果,为制定合理有效的考评策略提供依据。方法随机选择2014年10月-2015年2月某三甲综合医院病房的高频接触位点进行标记,待保洁员完成清洁后,同时采用荧光标记法与微生物培养法(金标准)评估医院环境清洁质量的效果。结果对病房216个高频接触位点进行采样,荧光标记法和微生物培养法合格率分别为43.06%、49.54%。荧光标记法评估环境清洁质量的灵敏度和和特异度分别为82.24%、94.50%,kappa值为0.88,阳性预测值和阴性预测值分别为93.61%、84.43%。荧光标记法每个采样点检测费为0.15元,而微生物培养法每个采样点检测费为8.20元。结论荧光标记法应用于环境清洁质量的真实性、可靠性及经济实用性较好,可应用于评估医疗环境的清洁质量。 相似文献
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摘要 目的 采用综合干预措施对医院病区保洁员进行干预,以提高其环境清洁质量。方法 通过培训、现场监督和清洁效果检测措施,对某教学医院病区在岗保洁员业务知识和工作质量进行干预,评价干预措施的效果。结果 综合干预后,该医院病区保洁员的8项保洁知识知晓率由干预前的37.98%~68.22%提高到78.68%~100.00%。日常清洁频次执行率由干预前的65.12%提高到100.00%。病房高频接触物体表面卫生质量合格率由干预前的46.23%提高到70.48%。结论 通过培训、现场监督和清洁效果检测的综合干预措施,明显提高了病区保洁员的业务素质和工作质量。 相似文献
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目的 研究外周血造血干细胞移植(PBSCT)供者外周血干细胞动员采集的方法及其效果。方法 198名健康供者每天皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)(5~10)μg/kg进行外周血干细胞动员,第5天开始采集。采用血细胞分析仪行单个核细胞(MNC)计数,流式细胞术(FCM)行CD+34 细胞计数。分析供者性别、身高、年龄、采集当天外周血白细胞(WBC)计数对动员采集效果的影响。结果 所有供者均成功动员采集,采集当天的MNC计数平均为(4.19±1.96)×108/kg,CD+34 细胞计数平均为(2.98±1.40)×106/kg;MNC和CD+34细胞计数与供者性别、身高、年龄无关;采集当天外周血WBC计数与MNC、CD+34 细胞计数呈正相关(r=0.9201,P=0.0035;r=0.8420,P=0.0149);采集当天外周血WBC计数≥20.0×109/L的供者比<20.0×109/L的供者采集效果更显著(F=4.688,P=0.0013;F=4.622,P=0.0006)。结论 rhG-CSF动员的健康供者采集当天外周血WBC计数是一项预测CD+34细胞采集数量的简单、可行的指标。 相似文献
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本研究旨在构建人IgG1 Fc蛋白及融合蛋白hJagged1^ext-Fc,并在毕赤酵母GS115中表达。用RT—PCR法从人骨髓细胞中扩增hJagged1基因的胞外段。在测序正确后,将hJagged1基因的胞外段插入构建好的PIC—Fc载体,得到PIC—hJagged1^ext-Fc。用MD平板筛选重组子,G418法筛选高拷贝转化子,经甲醇诱导表达后,采用SDS—PAGE分析表达蛋白。结果表明:hJagged1基因的胞外段被有效地扩增。序列分析显示所构建的含phJagged1^ext-Fc融合基因的质粒与设计相同,人IgG1Fc蛋白及融合蛋白hJagged11^extFc得到正确表达。结论:成功地构建了hJagged1^ext-Fc融合基因的毕赤酵母表达载体,并在毕赤酵母中正确表达,为进一步研究Jagged1在造血干/祖细胞的体外扩增奠定了基础。 相似文献
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心理干预对冠心病患者的康复作用 总被引:3,自引:1,他引:2
研究心理干预和冠心病康复的关系。将100例冠心病患者分为心理干预组和对照组,两组均常规药物治疗及临床处理,心理干预组加心理治疗。与对照组相比心理干预组心绞痛发作、心律失常发生、心肌缺血改善、血酯五项、再住院率、院外猝死率均有显著差异,心理干预对预防和延缓冠心病的发展,防止猝死有不可忽视的作用。 相似文献
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本文针对卫生统计学的特点提出,卫生统计学教学应注重概念教学、图表教学以及计算器应用能力、统计推断能力的培养。 相似文献
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对24例慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者设定营养和运动要求,2个月后测定体质量;第1秒用力呼气量(FEV1)、FEV1占预计值的百分率(FEV1%)、第1秒用力呼气量/用力肺活量(FEV1/FVC);进行6mim步行试验;评估生活质量总均分。结果表明营养支持结合运动锻炼能改善COPD患者呼吸功能和生活质量。 相似文献