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从GenBank中获取新型甲型H1N1流感病毒(2009年流行株)HA和NA基因序列,通过多重序列比对之后,设计合成H1和N1基因特异性的引物和探针,用来建立新的甲型H1N1亚型流感病毒的多重实时RT-PCR检测方法.合成的两条荧光探针分别标记FAM和CY5荧光报告基团,荧光淬灭均使用BHQ基团.多重实时RT-PCR实验在ABl7500实时PCR仪上进行,经过40个循环的扩增之后,阳性对照出现标准的S型曲线,并且具有良好的特异性,可以很好地将新的甲型H1N1与传统的甲型H1N1以及H3N2、H5N1、H6N2和H9N2等流感病毒区分.多重实时RT-PCR可以检测到10个拷贝的模板,灵敏度接近检测方法的极限.检测时间短,从加样到反应结束只需要90 min.在对243例发热病人临床样品检测过程中发现7例阳性,1351份猪临床样品检测中未发现阳性,该检测结果和采用中国检验检疫科学研究院研制的试剂盒获得的检测结果一致.本研究所建立的快速、准确和高敏感性的多重实时RT-PCR方法非常适用于新型甲型H1N1流感病毒的实验室筛查. 相似文献
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本研究对人工感染鸡马克氏病强毒鸡外周血液各类白细胞进行的动态观察表明:感染鸡外周血液的白细胞总数和淋巴细胞数持续性增高,单核细胞和嗜酸性粒细胞数呈一定程度的下降趋势,而嗜碱性粒细胞和异嗜性粒细胞的变化则无明显的统计学意义。 相似文献
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预防试验组和治疗试验组雏鸡喂服清瘟毒菌净后.分别于接毒后1、3、5、7天扑杀.经病理组织学、组织化学及免疫组织化学方法比较观察.清瘟毒菌净具有抑制JBDV和提高机体免疫功能的作用.另对26900只自然发病鸡群进行田间治疗试验.治愈26824只.治愈率为96%.我们应用具有广谱抗菌和抗病毒效果的清瘟毒菌净(原名强效毒菌净).进行了传染性法氏囊病(IBD)的防治试验.现将结果报告如下. 相似文献
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为了防止牛海绵状脑病(俗称疯牛病)和羊痒病传入我国,对来自疫区国家的动物源性饲料进行动物种类鉴别非常必要。本研究根据牛羊特异性卫星DNA建立了同一PCR体系同时检测羊、牛源性物质的方法。应用DNA提取液制备模板,不但有效地缩短了试验时间,还大大降低了成本,有利于在生产实际中推广应用。 相似文献
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给8头3日龄同窝仔猪经口感染猪流行性腹泻病毒“吉”毒株的猪胎肠单层细胞培养物,于感染后在第18、30、45、96h扑杀,进行病理组织学和病理组织化学研究。病理组织化学(硷性磷酸酶、ATP酶、琥珀酸脱氢酶、单胺氧化酶)的变化早于病理组织学变化。组织学变化以小肠绒毛上皮细胞脱落、绒毛短缩为特征,其中以空肠中,后部的肠绒毛变化最严重;临床症状与病理变化呈正相关,感染后24~36h,实验仔猪呕吐、腹泻最明显,而感染30h扑杀的实验仔猪,小肠绒毛短缩,上皮细胞脱落最严重。作者认为,初期腹泻主要是小肠绒毛柱状上皮能量生成不足,吸收和运输障碍所致;而后期则是肠绒毛柱状上皮能量生成不足,吸收表面积严重减少,绒毛柱状上皮严重变性导致的消化不良共同作用的结果。 相似文献
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用疑似猪冠状病毒性脑脊髓炎自然病例脑组织,脑内或脑内兼滴鼻接种于4头4日龄同窝仔猪结果4头实验仔猪都出现和自然病例相似的神经症状及非化脓性脑脊髓炎病变。病变以脑脊髓的软膜、小脑、嗅脑和颈部脊髓的实质比较明显。 相似文献