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单核细胞增生性李斯特氏菌hly基因的克隆表达 总被引:1,自引:0,他引:1
以单核细胞增多性李斯特氏菌(Listeria Monocytogengs,LMO)LMO-0586基因组DNA为模板,运用PCR扩增得到片段大小为1646bp的致病基因李氏溶血素(hly)基因,并克隆到pMD18-T载体上,构建克隆载体pMD18-T-hly。经测序正确后,将hly基因克隆至表达载体pGEX上构建表达质粒pGEX-6P-1-hly。在IPTG诱导下,携带pGEX-6P-1-hlyA的E.coli BL21(DE3)高效表达分子量约为82KDa的可溶性蛋白及包涵体形式的蛋白。为进一步研究溶血素蛋白的结构、功能,LMO的分子流行病学调查、诊断试剂盒的开发提供依据。 相似文献
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为了解铜对猪肾细胞增殖和代谢的影响,了解铜促生长机理,采用猪传代肾细胞PK15,在培养液中添加不同铜水平对PK15细胞进行体外培养,计算了PK15细胞的增殖率和3H-TdR掺人率.结果表明PK15细胞对铜刺激敏感,铜可有效促进PK15细胞增殖,铜添加组细胞增殖率和3H-TdR掺人率显著,高于对照组(p<0.05),且以培养液中添加31.2μmol·L-1Cu PKl5细胞的增殖作用最强. 相似文献
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揭示热休克蛋白27(Heat Shock Protein 27,HSP27)可通过参与机体的氧化应激过程从而影响奶牛RFM发生的具体机制.采集奶牛胎衣不下(RFM)组及胎衣正常排出母体组的胎盘组织,应用WB及试剂盒检测HSP27的相对表达以及葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;还原型... 相似文献