砂梨扩展蛋白基因cDNA克隆及全序列分析

设计植物EXP扩展蛋白简并引物,以砂梨果实cDNA为模板,克隆得到EXP基因cDNA片段,该片段长465 bp。根据该片段序列,分别设计2条5’和3’末端扩增的特异引物,利用RACE技术,获得了该片段的5’端和3’端序列。用DNAMAN5.22软件对3个序列进行拼接和分析,获得了该基因的cDNA全长,命名为Pyp-EXP。该cDNA全长为1 395 bp,5’端起始密码子ATG始于72 bp,3’端终止子TAG止于830 bp,Ploy+(A)从1 363～1 395 bp。该基因已在GenBank基因数据库注册,注册号为EF602031。Pyp-EXP核苷酸序列有一个759 bp完整的开放阅读框,编码区与西洋梨、苹果、湖北海棠、桃的同源性分别为96%,96%,94%和86%;该cDNA推导编码252个氨基酸,含有1个组氨酸(His_Phe_Asp,HFD)功能域,与西洋梨、苹果、湖北海棠、桃中相应序列同源性分别为98%,97%,95%和93%。该基因的克隆为研究扩展蛋白的时空表达及其在果实发育和成熟过程中的作用奠定了基础。     

苹果IRAP技术体系的建立及优化

通过苹果逆转座子长末端重复序列(LTR)保守区域设计引物,对影响苹果IRAP反应的重要因素进行了研究,建立并优化了苹果IRAP分子标记技术体系。优化的苹果IRAP分子标记体系为:25μL反应体系中,模板DNA50ng、Mg2+2.5mmol·L-1、dNTPs0.2mmol·L-1、10×buffer2.5mmol·L-1、TaqDNA聚合酶1.0U、引物0.4μmol·L-1。该体系在所试苹果品种中均获得了较理想的扩增效果,并能鉴定部分芽变品种。     

苹果避雨栽培技术(下)

八、花果管理1.授粉花期宜采用蜜蜂授粉或人工授粉等方法。2.疏花疏果在花序伸出期至花蕾分离期,按间距疏除过多、过密的瘦弱花序,仅保留中心花和1朵边花,每个花序留1个果。3.套袋避雨栽培条件下,宜采用无袋栽培模式。4.铺反光膜铺反光膜前应适当摘叶,使树冠下地面透光率达到30%以上为宜。时间应在果实开始着色后进行。5.摘叶转果(1)摘叶。一般分2次进行。第1次在果实采收前     

山梨醇对李果肉组织总RNA提取的影响

探讨了不同浓度的山梨醇清洗溶液对李果肉组织中RNA提取效果的影响。经琼脂糖凝胶电泳、核酸蛋白分析仪和RT-PCR等方法对RNA质量和产率进行了分析,结果表明:李果肉组织研磨后用山梨醇清洗溶液处理有利于总RNA的提取,而不添加山梨醇的清洗溶液,提取液中检测不到RNA,当清洗溶液中山梨醇浓度为1.10mol/L时,李果肉组织总RNA的产率明显高于山梨醇浓度为0.35 mol/L和3.00 mol/L时的产率;以不同贮藏天数的李果实为试材提取总RNA,其结果是一致的;通过RT-PCR扩增蛋白延伸因子EF-2基因,结果证明本试验提取的总RNA可以用于基因转录表达特性分析。     

叶面喷施不同铁肥对苹果叶片缺铁黄化的防治效果

为探究不同复配铁肥对苹果幼苗缺铁黄化的防治效果,本研究选用了二年生‘红星’品种苗木,设置7个处理：0.3% FeSO4(T1)、0.3% FeSO4+0.3%柠檬酸铁（T2）、0.3% FeSO4+0.3%尿素(T3)、0.3% FeSO4+0.3% SNP(T4)、0.3% FeSO4+0.5%乙氧基改性聚三硅氧烷(T5)、0.3% FeSO4+0.1%碧护可湿粉剂(T6),以清水处理为对照(CK),分析各处理苹果叶片的叶绿素含量、荧光参数、叶片活性铁及全铁含量等。结果表明,与对照相比较,叶面喷施铁肥可显著提高‘红星’叶片的叶绿素含量,增加叶片生长量,同时具有提高叶片最大光化学量子效率Fv/Fm、实际光化学量子效率ΦPSⅡ值、叶片活性铁及全铁含量等效果。综合分析各项指标,T6处理（0.3% FeSO4+0.1%碧护可湿粉剂）处理效果较好。     

转番茄铁载体基因（LeIRT2）八棱海棠株系的鉴定

 【目的】选育具有抗缺铁能力的苹果属植物新种质。【方法】通过半定量式RT-PCR检测、印迹杂交、营养液pH的变化和低铁(铁浓度为10-6 mol•L-1)水培条件下，根系和叶片的金属元素含量分析。【结果】在通过Southern杂交获得的9个转番茄铁载体蛋白基因八棱海棠（Malus robusta Rehd.）株系中，有6个转基因株系成功转录，目的基因在叶片和根系中都有表达。其中2个在缺铁情况下显著提高了根系总铁的含量和叶片中活性铁的含量，同时也大幅度提高了根系和叶片中锌的含量。【结论】转番茄铁载体蛋白基因八棱海棠株系表现出较强的抗缺铁胁迫能力。     

不同基质对红颊草莓生长发育及果实品质的影响

本研究以红颊草莓为试验材料,在温室立体阶梯式高架栽培模式下,通过对比国外专用基质和国内基质对“红颊”草莓的生长和果实品质的影响,从而筛选出适合“红颊”草莓的基质。结果表明上层国外专用基质红颊草莓在营养生长阶段比国内基质上层生长健壮;中层和下层国外专用基质和自己配制基质处理对草莓营养生长发育没有显著性差异;果实品质方面无论是上层、中层或下层,国外专用基质和国内基质处理也没有显著性差异。同一基质上、中、下三层之间果实品质也没有差异。综合这两种基质对草莓植株生长和果实品质等指标的影响,两种基质对草莓的生长发育差异不显著,国内基质完全可以代替国外专用基质使用。     

不同继代培养次数对苹果八棱海棠离体培养和遗传转化的影响

以苹果八棱海棠离体新梢和幼叶为外植体,研究不同继代次数对其离体繁殖、再生和遗传转化的影响。结果表明,随着继代培养次数的增加,继代10次和48次的八棱海棠离体增殖倍数、生根能力、不定芽的再生频率、每外植体再生芽数和GUS基因瞬时表达率均显著高于继代5次的;继代10次的增殖倍数和GUS阳性率明显多于继代48次的,其它指标相互间差异不显著;说明继代10次的芽苗较适合用于八棱海棠离体培养的外殖体材料,其幼叶较适于遗传转化研究。     

柿蒂去除萼片和激素处理对甜柿果实生长发育及品质的影响

以甜柿品种"阳丰"为试验材料,在果实迅速生长期人工去除柿蒂萼片,并在萼片剪口处涂抹不同激素.通过测定不同处理果实纵横径、单果质量、可溶性固形物含量、可溶性糖含量、可滴定酸含量等果实品质,来探究柿蒂对果实生长发育及品质的影响.结果表明,去除柿蒂后,柿果的生长发育受到明显的抑制,使用100 mg/L浓度的CA3处理能有效地减缓去除1个和4个柿蒂对柿果生长发育的影响,使柿果的生长恢复到正常水平;使用100 mg/L的ABA处理则可以促进去除1个柿蒂的柿果生长发育.去除柿蒂会影响柿果的单果质量以及可溶性糖含量,涂抹100 mg/L ABA可以促进柿果可溶性糖的积累.