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PCR技术在畜禽细菌病诊断中的应用 总被引:3,自引:0,他引:3
PCR技术在畜禽细菌病诊断中的应用罗满林张楚瑜(武汉大学病毒研究所,430072)聚合酶链反应(PCR)技术,是一种模拟体内DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA片段的有效手段。该技术自1985年问世以来,在国际上引起极大的反响,并以惊人速度广泛应用... 相似文献
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以新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)为IFN-β诱导剂,将猪瘟病毒(Classical swine fever vires,CSFV)E0基因的C末端与增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protem,EGFP)基因相连,瞬时表达于猪。肾细胞PK15中,利用荧光素酶报告基因系统检测IFN-β启动子的活化状态,结果显示CSFV E0蛋白可抑制NDV对IFN-β启动子的诱导作用,抑制效应随E0蛋白量增加而增强;半定量RT-PCR结果显示,E0蛋白可明显降低IFN-βmRNA的生成量。结果表明,E0蛋白具有干扰素拮抗功能。该研究为阐明CSFV的致病及持续感染机制提供了理论支持。 相似文献
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采用RT-PCR技术,利用2对引物,从猪瘟病毒(CSFV)强毒石门株感染的猪血中成功扩增了NS4B基因,片段大小分别为757bp和774bp。克隆后经酶切鉴定,自动测序和序列分析,结果显示该基因较为保守,与其他猪瘟病毒毒株均有很高的同源性,与同属的BVDVSD-1株和NADL株也有较高的同源性。 相似文献
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猪瘟病毒囊膜糖蛋白DNA疫苗的研制 总被引:6,自引:0,他引:6
构建了含有猪瘟病毒石门株囊膜糖蛋白(E2)基因的重组真核表达质粒pRCSE2。将pRCSE2和空载体pRC分别免疫小鼠,ELISA检测结果表明:仅pRCSE2免疫鼠可以产生猪瘟病毒的特异抗体。DNA疫苗在许多传染病研究中已取得可喜成果,因此猪瘟病毒DNA疫苗可能会成为防制猪瘟的一条新的途径。 相似文献
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伪狂犬病病毒HS株tk基因的PCR扩增与克隆 总被引:5,自引:0,他引:5
参照伪狂犬病病毒(Pseudorabiesvirus,PRV)NIA-3株tk基因序列,设计并合成1对长22mer的引物,引物间距1.5kb,其内包含完整的PRVtk基因。以BHK21细胞繁殖的PRV湖北地方强毒株(HS-9304)基因组为模板进行PCR扩增。琼脂糖凝胶电泳检测显示扩增主带清晰,长约1.5kb,符合设计要求。扩增片段克隆至由pUC18质粒改制而成的T载体中,限制性内切酶BamHI、SmaⅠ、XhoⅠ、HindⅢ酶切分析证实,扩增片段的酶切位点与tk基因一致,说明扩增和克隆片段包含PRVtk基因。 相似文献
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采用RT-PCR技术,利用2对此物,从猪瘟病毒(CSFV)强毒石门株感染的猪血中成功扩增了NS4B基因,片段大小分别为757bp和774bp。克隆后经酶切鉴定,自动测序和序列分析,结果显示该基因较保守,与其他猪瘟病毒毒株均有很同的同源性,与同 BVDVSD-1株和NADL株也有较高的同源性。 相似文献
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根据已发表的猪瘟病毒序列,设计并合成了3对引物,利用RT-PCR技术,从猪瘟病毒石门株感染猪血中成功扩增了各cDNA片段,覆盖整个NS5A基因,片段大小各为774,685,917bp。克隆后测序。序列比较结果显示,该基因在CSFV中较为保守。与同属的BVDV的序列同源性较低,且氨基酸的同源性低于核苷酸的同源性。推测它参与决定瘟病毒的特异性。 相似文献
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