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本研究的目的在于利用重组猪结合珠蛋白(Haptoglobin,Hp)制备特异性单克隆抗体.以梅山猪肝脏总RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增猪hp基因,将其克隆到原核表达栽体pGEX-KG和pET-32a上,转化至E.coli BL21中,IPTG诱导下高效表达重组GST-Hp和HIS-Hp蛋白.用纯化的重组GST-Hp免疫BALB/c小鼠,用纯化的HIS-Hp作为包被抗原进行间接ELISA检测,通过淋巴细胞杂交瘤技术筛选阳性细胞株,制备单克隆抗体.结果表明筛选到2株高效分泌抗猪Hp单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为3B4和3C8.Western-blot和间接ELISA检测均表明制备的单克隆抗体具有良好的特异性. 相似文献
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过氧化物酶反应试纸法检验肉新鲜度试验 总被引:2,自引:0,他引:2
过氧化物酶反应试管法是病死畜禽肉和肉新鲜度检验中常用的定性方法 ,具有快速、简便、准确等优点 ,但因试剂保存期短、保存条件要求高 ,应用中受到了很大限制。孙锡斌等[6,7] 在病死畜禽肉的检验中初步建立的过氧化物酶反应试纸法更为简便、快速 ,能够代替试管法进行检验 ,且试剂保存期长 ,但对于该方法在肉新鲜度检验中的应用尚未进行研究。本试验旨在通过用对不同浓度酶反应试纸对肉新鲜度进行检测 ,并与传统理化检验方法进行比较 ,以探讨过氧化物酶反应试纸法进行肉新鲜度检验的可行性。1 材料与方法1 .1 材料1 .1 .1 器材 康维皿、… 相似文献
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1 世界兽医协会 1. 1 世界兽医协会的历史 1863年4月,爱丁堡兽医学院John Gamgee教授邀请欧洲各地的兽医参加7月14~18日在德国汉堡召开的一次会员大会,主题是讨论如何控制动物疫病. 相似文献
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旋毛虫肌幼虫分泌性蛋白P49基因的克隆与表达 总被引:3,自引:0,他引:3
通过设计、合成引物,以旋毛虫RNA为模板,用RT—PCR法扩增出旋毛虫P49序列,并进行了序列测定。将P49基因亚克隆至表达载体pET—28b中,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导表达,作SDS—PAGE及Western blot分析。结果表明,PCR法扩增出P49序列,其大小约为960bp,将构建的重组质粒pGEM—P49进行序列测定表明其与Genbank中的P49序列具有高度的同源性。成功构建了重组表达载体pET—P49;SDS—PAGR及Western blot分析表明,表达产物分子量约为38kDa,约占菌体总蛋白的7%左右,且能被感染旋毛虫猪阳性血清所识别。 相似文献
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化工污染场地氯苯分布特征 总被引:4,自引:2,他引:2
以某化工污染场地为研究对象,研究了该场地主要污染物氯苯在土壤中垂直和水平分布特征,分析了生产历史、场地水文地质等因素对氯苯空间分布的影响。结果表明:在重力和淋洗作用下,氯苯能够在黏土层和粉质黏土层中垂直迁移。氯苯在土壤中的垂直分布具有明显的富集特征,主要富集在12.0~15.6 m深的粉质黏土层中,其中14.4~15.6 m深的粉质黏土层污染最为严重,氯苯浓度高达1.0×10~4 mg/kg。在不同采样点位土壤中,氯苯浓度峰值出现的深度不同,在同一采样点位土壤中,氯苯出现多个浓度峰值,这与生产过程中氯苯的分批次、间歇性泄露有关。场地氯苯主要出现在氯苯存储、使用和处置及其附近区域粉质黏土层中,说明氯苯水平分布特征主要受企业生产功能分区影响,同时受场地水文地质的影响产生局部小范围扩散。 相似文献
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