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猪瘟病毒E2蛋白在酵母中分泌表达条件的优化 总被引:5,自引:0,他引:5
影响外源基因在毕赤酵母中表达的因素很多,除了基因序列本身的内在特性外,表达条件对外源基因的表达量的高低也有着极显著的影响。本文对猪瘟病毒E2基因在毕赤酵母中不同的时间、不同的诱导型、不同的pH、不同的诱导剂量等方面表达量的差异进行了详细对比研究。结果表明,诱导后72~96h,重组E2蛋白的表达量最高。与单纯甲醇诱导相比,甘油/甲醇诱导后的表达量明显提高。在pH7.5和pH8.0表达E2蛋白是比较合适的。甲醇浓度在3%左右时E2蛋白的表达量较高。 相似文献
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牛皮肤成纤维细胞的体外培养与冻存 总被引:10,自引:0,他引:10
利用牛皮肤组织块直接培养法,得到牛皮肤细胞的原代培养物,再用酶消化法和反复贴壁法处理,能够纯化成纤维细胞。成纤维细胞的冻存是通过选用6种分别含有二甲基亚砜(DMSO)、甘油(GL)及乙二醇(EG)的保护液,以相同的冻前处理方法,对牛皮肤成纤维细胞进行缓慢冷冻,冰箱预冷平衡1-2h,逐步投入液氮(-196℃)中保存,再经37℃水浴解冻,Hanks液脱保护剂,以贴壁率评价冻存效果。结果表明,20%DMSO保护液对牛皮肤成纤维细胞表现出较好且稳定的冷冻保护效果,其平均贴壁率达87.9%。 相似文献
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山羊乳腺上皮细胞的分离、培养与超微结构观察 总被引:16,自引:2,他引:16
从山羊乳腺取部分组织进行细胞培养,并通过控时消化分离纯化山羊乳腺上皮细胞,建立了山羊乳腺上皮细胞系。结果表明:用含150U/mL Ⅰ型胶原酶和100U/mL透明质酸酶的混合液,37℃消化组织块4h,可得到大量的分散单细胞用于原代培养,该法是获得山羊乳腺组织单细胞的适宜方法;以含10%胎牛血清和双抗的RP-M11640或DEME/F12培养液为基础液,在培养液中添加氢化考的松、胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)、表皮生长因子(EGF)及胰岛素一转铁蛋白一硒钠(ITS)对山羊乳腺上皮细胞的生长具有较明显的促进作用。上皮细胞显微和超微结构显示:山羊乳腺上皮细胞在体外培养过程中可形成岛屿状单层聚集和类似圆顶状的结构;传代培养到第7代的细胞仍增殖旺盛,细胞内有丰富的脂滴和高尔基小泡,细胞分泌活动旺盛。 相似文献
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奶牛超排方法的研究进展 总被引:11,自引:2,他引:11
超数排卵技术是胚胎工程研究的重要内容,随着胚胎生物技术的延伸以及发育生物学研究的不断深入,牛胚胎需求量日益增大,超数排卵,胚胎移植技术的为加快育种步伐,纯种扩群提供有力的技术支持,为了筛选一种有效,稳定的超数排卵程序,解决良种胚胎不足的矛盾,本文对近年来奶牛超排方法进行了综述。并比较了各种方法的优点及存在问题,从而得到将FSH溶解在PVP中进行超排,不但延长了FSH的半衰期,增加FSH的作用效果,而且一次注射避免了母牛的应激反应,是目前较理想的一种方法。 相似文献
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端粒和端粒酶与衰老关系的研究进展 总被引:6,自引:0,他引:6
端粒是存在于线性染色体末端的一段特殊的DNA-蛋白质复合物,由于末端不能复制,正常体细胞随着细胞分裂的进行而逐渐丢失端粒序列,导致细胞老化和死亡。端粒酶是维持端粒长度的一种特殊的DNA聚合酶,在细胞的增殖、衰老及永生中起重要作用。本文就端粒和端粒酶及其与衰老的作一综述。 相似文献
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