抗-CD36单克隆抗体对人CD34~+造血干(祖)细胞增殖和分化的影响

目的探讨抗-CD36单克隆抗体对人CD34~+造血干(祖)细胞体外增殖和分化的影响。方法选择无各种产科并发症的健康足月产妇3名,取脐带血20 mL/(人)份,以Ficoll细胞分离液(1.077 g/mL)密度梯度800 g离心30 min后,流式细胞仪分选CD34~+造血干(祖)细胞,培养2—3代,四唑盐(MTT)比色法检测抗-CD36单克隆抗体对CD34~+细胞生长的影响;流式细胞术检测细胞凋亡,Annexin V/PI双染法和碘化丙啶(PI)单染法检测细胞周期。观察抗-CD36单克隆抗体对CD34~+造血干(祖)细胞凋亡和细胞周期的影响、对造血干(祖)细胞红系分化能力以及对红系集落形成单位(CFU-E)和红系爆式集落形成单位(BFU-E)生成的影响。结果流式细胞仪分选出经Ficoll分离脐带血获得的单个核细胞中约0.44%CD34~+造血干(祖)细胞。2、8、32、64、128μg/mL抗-CD36单克隆抗体分别与CD34~+造血干(祖)细胞体外共培养:单纯CD34~+造血干(祖)细胞培养(正常)组、抗-CD36单克隆抗体2及32μg/mL组,IgG(对照)组的OD值分别为1.05±0.12 vs 0.9±0.15 vs 0.81±0.11 vs 1.06±0.18(P0.01)。Annexin V流式检测凋亡率(%):正常组、对照组与2μg/mL抗-CD36单克隆抗体组分别为10.13SymbolqB@1.42 vs 10.51SymbolqB@1.75 vs 24.57SymbolqB@2.75(P0.05)。G_1/S值:正常组、对照组与2μL/mL抗-CD36单克隆抗体组分别为3.95±0.25 vs 4.36±0.55 vs 7.35±0.65(P0.05)。CD34~+造血干(祖)细胞定向分化红系(CFU-E/BFU-E克隆形成数):正常组、对照组与抗-CD36单克隆抗体组分别为169±12、172±12和85±6(P0.05)。结论抗-CD36单克隆抗体诱导人CD34~+造血干(祖)细胞凋亡,细胞增殖减少和红系CFU-E/BFU-E克隆能力降低。     

32497例正常听力孕龄女性耳聋基因携带率与突变谱调查

目的 在正常听力孕龄人群中开展耳聋基因携带率与突变谱调查,为耳聋基因筛查、遗传咨询、疾病管理提供数据. 方法 32 497例听力正常且无耳聋家族史的孕龄女性在我院医学遗传中心门诊接受遗传咨询后,接受耳聋基因芯片筛查.对于检测结果提示为常染色体隐性遗传耳聋基因突变携带者,建议其配偶进行进一步耳聋基因检测.对于夫妇均为耳聋基因突变携带的家庭,给予遗传咨询与风险评估,必要时提供产前耳聋基因诊断. 结果 32 497位听力正常且无耳聋家族史的孕龄女性中,1 181例携带遗传性耳聋基因突变,携带率为3.63％.其中,1 117例携带常染色体隐性遗传的耳聋基因杂合突变,包括4种常见的GJB2基因突变665例,2种常见的SLC26A4基因突变407例,GJB3基因突变45例.此外,64例携带与氨基糖甙类药物诱导性耳聋密切相关的线粒体DNA 12S rRNA基因突变. 结论 在正常听力的孕龄人群中开展耳聋基因携带率与突变谱的研究,对优生优育与遗传咨询具有重要意义.     

胎儿血清β2-微球蛋白测定的临床意义

目的 通过比较检测正常胎儿和发育异常胎儿脐血β2-微球蛋白水平,并探讨其临床意义.方法 通过脐带穿刺取得胎儿血,应用免疫比浊法对107例产前诊断结果正常的胎儿以及77例宫内感染、胎儿发育迟缓(SGR)并羊水少和泌尿系畸形等发育异常的胎儿血清β2-MG含量进行测定.结果 妊娠18-34周正常胎儿血清β2-MG含量为(4.57±0.56)mg/L,与孕周变化无相关;妊娠34周后132-MG含量下降.妊娠35-38周胎儿血清β2-MG含量为(3.58±0.69)mg/L,与妊娠18～34周相比差异有统计学意义(P<0.05);宫内感染、SGR并羊水少和泌尿系畸形等胎儿β2-MG含量与正常胎儿相比明显升高,差异有统计学意义(P<.结论 .05).结论 检测胎儿血清β2-微球蛋白水平,可为宫内感染、SGR并羊水少和泌尿系畸形等发育异常胎儿诊断与评估提供参考指标.     

Identifiler体系在绒毛取样术中取材鉴定的应用

[目的]研究利用Identifiler体系对孕早期绒毛取材进行鉴定,以避免母体DNA的污染影响产前诊断的准确性。[方法]收集15例需行绒毛取样产前诊断的早孕期病人,用Identifiler体系的16基因位点进行检测病人外周血及绒毛DNA,判断绒毛DNA是否存在污染,从而决定是否利用绒毛进行产前基因诊断。[结果]检出2例存在母体DNA污染,于孕中期重新取羊水进行产前基因诊断,13例判断不存在污染的绒毛DNA进行基因诊断,其结果与出生后新生儿的结果完全符合。[结论]Identifiler体系在判断孕早期绒毛取样术取材的污染鉴定方面,有着非常准确的作用,可以考虑采用。     

妊娠肺结核患者血清白蛋白的检测分析

目的 :调查分析妊娠肺结核患者血清白蛋白 (ALB)水平变化规律 ,探讨低白蛋白血症在妊娠肺结核病的发生率及临床意义。方法 :对 40例不同孕期的妊娠肺结核患者及 47例正常妊娠妇女进行血清ALB项目对照分析。结果 :妊娠肺结核患者的平均血清ALB水平除孕早期外 ,孕中、晚期均比正常妊娠妇女低 ,差异具有显著性 (P<0 0 5 )。妊娠肺结核患者低白蛋白血症的发生率高于对照组 ,差异具有显著性 (P <0 0 1)。结论 :低白蛋白血症(ALB <3 5g/L)可能与妊娠肺结核病的发生有关 ,及时纠正低白蛋白血症 ,有助于结核病的愈合。     

TaqMan-MGB探针实时荧光PCR在β地中海贫血植入前诊断中的应用研究

目的建立单细胞MGB探针荧光PCR检测β地贫的方法以及在β地贫PGD中的应用研究。方法获取β地贫基因携带者单个淋巴细胞,建立稳定的单细胞MGB探针荧光PCR检测技术,并对2例双方均为β地贫基因携带者的夫妇应用MGB探针荧光PCR进行了β地贫的PGD。结果利用单细胞MGB探针荧光PCR检测了β地贫基因携带者的200个单个淋巴细胞的基因型,平均扩增效率为94%,平均等位基因脱扣(ADO)率为2.5%。对两对夫妇进行4个周期PGD,共活检16个胚胎,获得16个卵裂球,其中15个卵裂球扩增成功,扩增效率为93.8%,ADO率为6.2%。14个胚胎经PCR分析后获得明确诊断,移植了4个胚胎,获得1例临床妊娠。孕11周时经腹吸取绒毛,证实为完全正常胚胎,最终分娩了一正常女婴。结论应用单细胞MGB探针荧光PCR技术可对β地贫以及其它单基因遗传病进行植入前遗传学诊断,达到优生目的。     

经腹绒毛活检术的护理配合

目的 探讨经腹绒毛活检术 （TA-CVS）的护理配合.方法 对因不同原因要求产前诊断的602例孕妇进行经腹绒毛活检术,术前做好孕妇心理护理及术前准备工作、术中密切配合医生、做好术后护理及预防感染等措施,术后一周左右孕妇复诊及新生儿出生后 3~6个月进行电话随访.结果 602例孕妇中有 2例分别因胎盘位置及母体组织污染原因而二次穿刺成功,其余均一次性穿刺成功,术后随访中 1例新生儿早产,出生体重 2.5 kg,无异常,未出现皮肤感染、宫内感染、流产及肢端缺损等并发症发生.结论 TA-CVS是孕早期安全可靠的产前诊断方法,充分的术前准备,熟练的术中配合及术后相应护理是手术成功和减少并发症的重要因素.     

Array—CGH技术用于产前诊断可疑胎儿染色体异常

目的探讨微阵列比较基因组杂交技术（array—based comparative genomic hybridization,array—CGH）在产前诊断胎儿染色体异常中的应用价值。方法产前诊断发现4例常规G显带染色体核型分析不能明确的胎儿染色体异常,按照标准的array—CGH操作分析对这些病例进行全基因组检测。结果通过array—CGH技术分析,明确了4例胎儿可疑染色体异常的诊断并且进行精确定位,1例染色体部分缺失,1例正常,1例染色体部分重复,1例不平衡易位。结论array—CGH技术对产前诊断胎儿染色体异常具有高分辨率,能够精确定位异常片段,明确胎儿预后,对产前诊断具有重要应用价值。     

妊娠早期孕妇血清中ADAM12-S水平与异位妊娠的相关性研究

目的:探讨妊娠早期孕妇血清中ADAM12-S水平变化与异位妊娠的关系。方法:选取2010年7月至2011年5月就诊于我院的60例异位妊娠孕妇(研究组),120例正常单胎妊娠孕妇(对照组),于5～9孕周应用时间分辨荧光免疫分析法检测其血清中ADAM12-S水平,并分析ADAM12-S水平与异位妊娠的关系。结果:①120例正常对照组孕妇5、6、7、8、9孕周血清中AD-AM12-S水平分别为6.80±0.56、17.45±1.22、40.24±2.72、88.64±5.31、162.42±15.78μg/L,总体趋势是随孕周的增加而增加,且明显的线性关系,相关系数(r)为0.898(P<0.05)。②60例研究组孕妇血清ADAM12-S水平一直处于低值状态,且随着孕周的增加变化不明显,甚至有所降低,未呈现线性关系,r为0.064(P>0.05)。③研究组各孕周的中位数倍数明显低于正常对照组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论:异位妊娠孕妇血清ADAM12-S水平明显低于正常单胎妊娠者,可以作为异位妊娠早期诊断的指标之一,检测血清ADAM12-S水平可提高异位妊娠的早期诊断率。     

中国大陆首例血红蛋白C病的检出

目的:报道在中国大陆首次诊断出血红蛋白C(hematoglobin C,HbC)病的病例。方法:在广东省妇幼保健院行产前筛查的一对夫妇,男方临床疑似HbE病基因携带者(非洲多哥人),女方临床疑似轻型β-地中海贫血基因携带者(中国人),应用聚合酶链反应联合反向点杂交技术及DNA测序技术,检测β血红蛋白基因,并取羊水对其胎儿进行产前诊断。结果:男方的基因型为CD6(GAG→AAG)/N,为HbC病。女方的基因型为IVS-2-654(C>T)/N。胎儿基因型与其父亲的相同。结论:在中国大陆首次诊断出HbC病的病例。DNA测序技术能准确、快捷地诊断血红蛋白病。