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逆转录病毒介导的IL-2和TNF-α融合基因在卵巢癌细胞中的表达及其对肿瘤细胞生长的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
IL-4和TNF-α是引人注目的抗肿瘤活性因子,两者在抗肿瘤及免疫调节方面具有协同作用。我们利用逆转录病毒载体Xd1构建了插入IL-2和TNF-α融合基因的重组逆转录病毒载体XdF,融合基因包括编码IL-2前导肽和IL-2和TNF-α成熟肽的序列。重组载体用Lipofectin方法引入病毒包装细胞PA317,挑选G418抗性克隆,用NIH3T3细胞测定病毒滴度,获得一滴度为1×10 ̄4CFU/ml的高滴度克隆。超速离心浓缩这一重组病毒上清,转导人卵巢癌细胞系SKOV3,经G418筛选获得抗性克隆。PCR可从融合基因转导的细胞DNA中扩增出1.1kb的融合基因片断,证明目的基因完整的整合在细胞的基因组DNA中,测其上清中的IL-2和TNF-α活性结果显示:IL-2的活性为8-15U/10 ̄6cells/24h,TNF-α的活性为150-400U/10 ̄6cells/24h。这一结果表明逆转录病毒介导的融合基因可以在卵巢癌细胞中获得有效表达,表达的融合基因产物在体内和体外部对肿瘤细胞的生长具有抑制作用。 相似文献
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直接从外周血或骨髓进行定量RT-PCR北京医科大学人民医院中心实验室颜世庆,白桃,王申五PCR方法是基因表达定量和定性检测的简便方法,外周血和骨髓是临床检测和遗传研究中常用标本。通常是利用白细胞分离液从全血中制备白细胞,然后提取白细胞总RNA,检测基... 相似文献
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腺病毒介导的LacZ基因在乳腺癌细胞中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
观察腺病毒介导的基因转移在乳腺癌细胞的转导效率及腺病毒转导对细胞生长的影响。方法:腺病毒介导的基因转导。结果:在病毒的重复感染率为500时细胞的转导效率达到100%;不同数量的病毒转导乳腺癌细胞对癌细胞的生长没有明显影响。低温冻存可使病毒的感染性明显下降。结论:腺病毒介导的基因转移在乳腺癌细胞中有高的转导效率,而病毒载体本身对细胞的生长没有影响,可用作乳癌特异物前体酶激活基因治疗的基因转移方法。 相似文献
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RT-PCR和免疫组化方法在白血病多药耐药基因分析中的应用北京医科大学人民医院中心实验室颜世庆,白桃,王申五北京协和医院血液科陈嘉林,李蓉生在肿瘤与白血病的治疗中对化学药物的抗药性是治疗失败的主要原因,多药耐药基因(Multi-DrugRe-sist... 相似文献
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目的:观察腺病毒介导的基因转移在乳腺癌细胞的转导效率及腺病毒转导对细胞生长的影响。方法:腺病毒介导的基因转导。结果:在病毒的重复感染率(MOI)为500时细胞的转导效率达到100%;不同数量的病毒转导乳腺癌细胞对癌细胞的生长没有明显影响。低温冻存可使病毒的感染性明显下降。结论:腺病毒介导的基因转移在乳腺癌细胞中有高的转导效率,而病毒载体本身对细胞的生长没有影响,可用作乳癌特异药物前体酶激活基因治疗的基因转移方法。 相似文献
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多药耐药基因(MDRI)在急性白血病细胞中表达北京医科大学人民医院中心实验室颜世庆,白桃,王申五北京协和医院血液科陈嘉林,李蓉生急性白血病(AcuteLeukemia)是一种常见的恶性肿瘤,现在的主要治疗手段是化学药物疗法,在白血病的治疗中对化学药物... 相似文献