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【目的】构建小鼠高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1 protein,HMGB1)启动子全长序列的荧光素酶报告基因用于药物筛选。【方法】采用PCR技术扩增小鼠HMGB1基因启动子全长序列,用GV238载体构建报告质粒GV238-HMGB1-P-Luc,以pGL3-basic作为阴性对照质粒,与内参质粒pRL共转染Hela细胞,以内毒素(LPS,0.2μg/mL)作为激活剂,以正丁酸钠(SB,10 mmol/L)作为抑制剂,分组处理24 h后检测荧光素酶活性。【结果】经酶切、PCR及测序鉴定证实克隆的HMGB1基因启动子全长2 140 bp,DNA序列正确无突变。与pGL3-basic组比较,GV238-HMGB1-P-Luc组荧光素酶活性显著增强(P0.05);与GV238-HMGB1-P-Luc组比较,LPS组荧光素酶活性显著增强(P0.01);与LPS组比较,SB组荧光素酶活性显著降低(P0.01)。【结论】HMGB1基因启动子报告基因构建成功,LPS可以增强其表达,SB则可以抑制LPS刺激下的HMGB1启动子表达增强,可为下一步筛选具有调控HMGB1启动子活性的药物奠定基础。 相似文献
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跟腱断裂术后即刻功能锻炼的临床研究 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:通过与跟腱断裂术后2周进行功能锻炼及下地部分负重行走的比较,探讨跟腱断裂术后即刻功能锻炼及下地部分负重行走对患肢功能及跟腱再断裂的影响。方法:将2012年3月至2013年3月收治的64例闭合性跟腱断裂手术患者分为两。治疗组34例,男18例,女16例;年龄(41.4±7.6)岁;于术后第2天即行功能锻炼及佩戴支具下地部分负重行走。对照组30例,男16例,女14例;年龄(39.9±7.6)岁;术后予患肢短腿石膏跖屈位固定2周,2周后行功能锻炼及佩戴支具下地部分负重行走。两组患者由同一组医生采用相同的手术方式处理,观察并比较两组患者AOFAS踝关节功能评分、跟腱再断裂及伤口并发症情况。结果 :术后2个月AOFAS评分治疗组74.3±3.9,对照组71.7±4.2,治疗组高于对照组;术后1年治疗组93.3±3.9,对照组92.0±4.1,两组比较差异无统计学意义。术后治疗组无跟腱再断裂,对照组1例发生跟腱再断裂;术后治疗组2例发生伤口并发症,对照组1例发生并发症,差异无统计学意义。结论:跟腱断裂术后患者即刻功能锻炼,踝关节AOFAS功能评分优于固定2周后再行功能锻炼,同时不增加术后跟腱再断裂率及并发症发生率,有利于患肢功能恢复。 相似文献
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目的探讨现代医学模式下医院健康体检中心的有效管理方法。方法本文从制度、人才、环境、设备四个方面阐述我院健康体检中心管理的主要内容。结果近几年来体检质量逐步提高,体检收益创我院历史最好水平。2005年、2007年连续两届被广州媒体评为"广州地区最信赖的十大健检中心"。结论科学、高效的现代管理方法是做好健康体检工作的可靠保障。 相似文献
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目的:分析中医体质辨识中属虚性偏颇体质的老年患者经纯中药干预调理后对体质分数、骨密度及骨代谢指标的影响。方法:选取2019年8月至2021年11月在深圳市大鹏新区葵涌人民医院三溪高源社区健康服务中心等11家社康机构干预治疗的164例老年虚性偏颇体质患者作为研究对象,通过中医体质辨识评分量表将患者分为气虚质组(34例)、阳虚质组(50例)及阴虚质组(80例),依据中医辨证分别给予补中益气丸、金匮肾气丸、六味地黄丸/知柏地黄丸/杞菊地黄丸干预治疗调理体质1年。各组患者均配合进行情志调摄、饮食调养、起居调摄、运动保健及穴位保健指导,干预治疗前及治疗1年后进行中医体质评分,同时检测骨密度和骨钙素水平。分析纯中药对老年患者中医体质评分、骨密度及骨代谢指标的影响。结果:治疗1年后,三组患者体质评分均较治疗前显著降低,差异具有统计学意义(P <0.01);三组患者骨密度水平均较治疗前升高,骨钙素水平均较治疗前降低,差异具有统计学意义(P <0.01)。结论:采用纯中药干预能调节改善老年患者的虚性体质,提高骨密度及改善骨代谢指标,使患者体质相对平和,能起到预防骨质疏松的效果。 相似文献
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目的探讨ABx亚型相关的B型糖基转移酶(GTB)突变p.R180C的酶动力学特征。方法以本课题组已构建的野生型GTB-pcDNA3.1真核表达载体为基础,采用定点突变试剂盒构建携带GTB突变p.R180C的表达载体突变体,并以DNA直接测序法验证突变质粒的序列;以野生型和突变型表达载体转化人胚肾上皮细胞(293F)做蛋白表达;再将经亲和柱Ni-IDA纯化后的表达蛋白以SDS-聚丙酰胺凝胶电泳法鉴定;最后采用酶动力学活性检测试剂盒检测酶动力学参数米氏常数(Km)和催化常数(Kcat)。结果 DNA直接测序:成功构建野生型和突变型GTB-pcDNA3.1真核表达载体;SDS-聚丙酰胺凝胶电泳:野生型和突变型GTB蛋白在293F内成功表达并获得纯化;酶动力学检测:p.R180C突变型GTB的Kcat及Km值分别为野生型GTB的1.7%、3.4倍[岩藻糖(H)受体]与25%、5.2倍[二磷酸尿苷半乳糖(UDP-Gal)供体]。结论 GTB突变p.R180C降低了该酶对H受体和UDP-Gal供体的亲和力和其催化速率,尤其是对H受体的催化速率,进而导致了红细胞表面H抗原生成B... 相似文献
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目的探讨急性白血病免疫表型特征,为急性白血病诊断及治疗提供科学依据。方法利用四色流式细胞仪,以CD45/SSC双参数散点图设门法,检测147例白血病患者骨髓细胞表面标记。结果 AML髓系抗原表达率以cMPO为最高,其余依次为CD33、CD13、HLA-DR、CD117等,CD14、CD36和CD64在M4和M5表达最高,而淋巴细胞抗原CD7、CD19、CD56等有少数表达。B-ALL表达最高的是CD19和cCD79a,其次是CD10,T-ALL中表达最高的是cCD3、CD7和CD5。结论应用多参数FCM对急性白血病进行分型,对于白血病的诊断治疗和预后判断,特别是在跨系表达白血病及混合型白血病的诊断中具有重要价值。 相似文献
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目的 研究复方大承气汤灌服和芒硝、冰片、吴茱萸适量混合后于脐眼外敷预防大鼠模型术后肠粘连的作用及机制.方法 雄性SD大鼠120只,随机分为对照组、模型组、医用几丁糖组、生长抑素组、中草药一组和中草药二组.除正常对照组外,其余各组大鼠均采用Ellis法制备肠粘连模型,造模后对照组和模型组正常喂养,其余各组分别给予相应药物:医用几丁糖组在造模关腹时局部涂抹几丁糖;生长抑素组给予皮下注射醋酸奥曲肽0.1 μg/g,1次/12 h;中草药一组给予复方大承气汤煎液0.05 mL/g灌服,2次/d;中草药二组在一组用药的基础上,用芒硝、冰片、吴茱萸适量混合后外敷于脐眼.各组于造模术后第8天下腔静脉取血后处死,ELISA法测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,肉眼观察肠粘连的程度并分级,采用免疫组化法测定腹膜粘连组织转化生长因子-β1(TGF-β1)表达.结果 与模型组对比,医用几丁糖组、生长抑素组、中草药一组和中草药二组大鼠血清中TNF-α含量依次降低,局部粘连程度依次减轻,粘连组织中TGF-β1表达依次减少,中草药一组和二组与模型组、医用几丁糖组、生长抑素组相比差异有统计学意义(P<0.05),中草药二组和中草药一组之间相比差异有统计学意义(P<0.05),医用几丁糖组和生长抑素组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 联合应用复方大承气汤灌服和芒硝、冰片、吴茱萸适量混合后于脐眼外敷能显著抑制纤维结缔组织的增生,减轻造模大鼠模型局部粘连程度. 相似文献