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HSP70-肿瘤肽复合物的纯化及其对肝癌细胞株HepG-2增殖的作用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:应用快速蛋白液相色谱(FPLC)系统从肝癌组织中分离和纯4EHSP70-肽复合物,并研究其对肝癌细胞系HepG-2增殖的影响.方法:将组织进行匀浆、高速离心提取总蛋白后依次进行ConA-Sepharose亲和层析和 DEAE-Sephacel子交换层析分离纯化,所得蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot进行蛋白分子质量及性质鉴定,Bradford 法测定蛋白浓度;利用MTT方法检测HSP70- 肽复合物对HepG-2细胞增长的情况.结果:分离、纯化得到的蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、考马斯量蓝鉴定为单一带, 分子质量为70 kDa;Western blot结果证实为 HSP70,每10 g组织最终获得1.5 mg的HSP70; HSP70刺激组12,48,72 h与对照组的A值之间有显著差异(0.1 mg/L:t=-0.2500,P=0.00; t=-0.1777,P=0.001:t=-0.3094,P=0.001; 0.5 mg/L:t=-0.2878,P=0.00;t=-0.2044,P= 0.00;t=-0.3285,P=0.00;1 mg/L:t=-0.3118, P=0.00;t=-0.2592,P=0.00;t=-0.1994, P=0.025;5 mg/L:t=-0.4007,P=0.00;t= -0.1302,P=0.016;t=-0.2537,P=0.005),细胞存活率明显高于对照组(P<0.01).结论:使用本分离纯化方法可获得高纯度 HSP70肽复合物;HSP70肽复合物可以促进 HepG-2细胞的生长. 相似文献
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1病例报告例1:女,35岁。入院前2 d感觉右下腹疼痛,为持续性疼痛,时轻时重,可以忍受,轻微恶心,低热,无盗汗,既往健康。查体:T 37.5℃,体态偏瘦,呼吸平稳,心肺未见异常,腹平软,右中下腹部压痛,以右下腹部为重,无肌紧张及反跳痛。血WBC11.5×109/L,N 0.58,L 0.37。诊断:急性阑尾炎。术中所见:阑尾细长,无明显炎症改变,小肠及系膜未见异常,盲肠正常。行阑尾切除术。术后体温波动于37.3~37.8℃之间,出现胸闷乏力。胸片示:右胸腔中量积液。经结核菌素试验及胸穿抽液化验诊断为结核性胸膜炎。抗结核治疗好转,转结核病院。阑尾病理:正常阑尾。例2… 相似文献
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目的了解吸烟情况与女性乳腺癌发病的关系,为预防乳腺癌提供相关依据。方法采用以医院为基础的1:1病例对照研究方法,对从2009年1月-2012年6月前往沈阳医学院奉天医院、沈洲医院和沈阳市第五人民医院就诊的163例女性乳腺癌患者和同期就诊的163例非肿瘤、非生殖及内分泌系统疾病女性患者进行了相关危险因素问卷调查。结果病例组的主动吸烟、被动吸烟、主动吸烟量大、被动吸烟量大、被动吸烟年限长、怀孕期间吸烟和首次吸烟时<18岁所占比例分别为9.20%、34.36%、5.52%、27.61%、25.15%、23.31%和17.79%,均高于对照组的3.68%、13.49%、1.23%、6.13%、9.20%、5.52%和4.29%(均P<0.05),多因素条件logistic回归分析表明,有肿瘤家族史、遭遇重大生活事件、肥胖、主动吸烟量大、被动吸烟量大及怀孕期间吸烟是女性乳腺癌发病的危险因素。结论主动及被动吸烟量大、孕期吸烟行为可增加女性乳腺癌患病风险。 相似文献
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目的:构建人热休克蛋白70(HSP70)的原核表达载体,诱导其表达并纯化.方法:应用PCR技术从人胆管癌组织中扩增出HSP 70基因片段,经T-A克隆连接到末端经平滑处理后的pMD18-T Simple质粒并测序.利用双酶切技术构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-HSP 70,并转化大肠杆菌JM 109,经IPTG诱导后表达得到HSP70融合蛋白.应用Glutathione-Sepharose4B亲和层析柱提纯融合蛋白,用生物素化凝血酶分离并纯化目的蛋白,最后行Wsetern blot鉴定.结果:PCR扩增结果与预计目的基因大小一致;序列分析与GeneBank中收录完全一致;重组表达载体pGEX-4T-1-HSP 70构建成功;Western blot结果显示目的蛋白可以与兔抗人的HSP70单克隆抗体特异性结合.结论:HSP 70编码序列已经成功克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,并在大肠杆菌JM 109中获得表达. 相似文献
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甲状腺良性病变术中损伤喉返神经的原因及预防(附2 266例分析) 总被引:29,自引:1,他引:29
目的探讨甲状腺良性病变手术所致喉返神经(RLN)损伤的原因及预防措施。方法回顾分析2000年1月至2004年7月2266例甲状腺良性痛变的手术资料,对甲状腺良性病变的位置及手术方法与RLN损伤的关系进行比较分析。结果位于甲状腺背侧的良性病变RLN损伤率为8.62%(81/940),显著高于甲状腺其他部位病变的手术损伤率(0.15%)。位于甲状腺背侧的结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤,显露RLN组的喉返神经损伤率为1.56%(1/64)、0(0/33),显著低于未显露喉返神经的损伤率[8.53%(59/692)、13.9l%(21/151)]。位于甲状腺其他部位的良性病变,显露RLN组与未显露喉返神经组的RLN损伤率差异无显著性。结论甲状腺良性病变手术,喉返神经损伤与病变位置有关;结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤位于甲状腺背侧,手术应常规显露RLN,而位于其他部位则不需常规显露RLN,可采用RLN区域保护法。 相似文献
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目的:探讨固醇携带蛋白2(SCP2)与胆囊固醇结石形成的关系.方法:胆囊胆固醇结石病人的肝组织标本20例,正常肝组织标本10例.应用逆转录聚合酶链反应技术检测SCP2 mRNA.结果:实验组的SCP2 mRNA的光密度值为0.90±0.34,对照组的光密度值为0.56±0.19,两组间存在显著性差异(P<0.05).结论:SCP2与胆囊胆固醇结石的形成可能存在一定关系. 相似文献
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目的探讨肝细胞胆管膜上转运子BSEP、MRP2和MDR3与胆囊胆固醇结石形成的关系。方法收集胆囊胆固醇结石患者的肝组织标本20例,正常肝组织标本10例。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术和Western blot技术检测BSEP、MRP2及MDR3 mRNA和蛋白的表达。结果胆囊胆固醇结石患者肝组织中BSEP、MRP2和MDR3的mRNA及蛋白表达均显著低于正常肝组织(P〈0.01)。结论BSEP、MRP2和MDR3的表达降低可能与胆囊胆固醇结石的形成有关。 相似文献