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目的构建携带胰岛素基因逆转录病毒载体,使其在人骨髓间充质干细胞(hMSCs)内稳定表达。方法通过RT-PCR法从人胰腺组织中提取胰岛素基因片段,并将其连接入逆转录病载体pLNCX,经包装细胞PT67的包装后,获得含外源性胰岛素基因的病毒颗粒(病毒滴度达4.2×106cfu/ml)并感染hMSCs,经过G418筛选后,用RT-PCR法、免疫荧光法、放射免疫法、葡萄糖刺激试验分析胰岛基因的表达情况。结果携带胰岛素基因的逆转录病毒载体构建成功,转导入hMSCs后能够稳定表达胰岛素基因,并分泌至细胞外持续3周以上,但对葡萄糖刺激无明显反应。结论重组人胰岛素基因逆转病毒载体能够将胰岛素基因导入hMSCs并稳定表达。 相似文献
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本例患者男性, 32岁, 因"腹痛1 d"入院。患者于2020年7月6日在南通大学附属医院入院。术前检查提示十二指肠乳头及胰头部神经内分泌肿瘤。拟行腹腔镜下胰十二指肠切除, 随后术中探查见全胰灰白、质地硬, 胰颈快速冰冻病理结果提示恶性病变可能, 倾向神经内分泌肿瘤, 遂中转开腹行全胰十二指肠加脾切除。术后病理证实为G2期胰腺神经内分泌肿瘤, 肿瘤侵犯十二指肠全层及胆管肌层。术后随访18个月, 患者生存情况良好。 相似文献
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目的 观察八聚体结合转录因子4(Oct4)和胚胎干细胞转录因子(Nanog)对胰腺癌干细胞(PCSCs)在体内干性特征的影响.方法 利用流式细胞分选技术分选人胰腺癌细胞-1(PANC-1)中CD44+ CD24+上皮特异性抗原(ESA)+胰腺癌干细胞,通过慢病毒载体介导特异性短发卡RNA (shRNA)沉默胰腺癌干细胞中的Oct4、Nanog基因,并通过Western blot检测干扰效率;将Oct4、Nanog沉默的胰腺癌干细胞、未沉默的胰腺癌干细胞及胰腺癌PANC-1细胞株分别接种于BALB/c裸鼠皮下及腹腔,建立裸鼠异位移植瘤模型,观察沉默Oct4、Nanog对胰腺癌干细胞体内致瘤性、侵袭性及耐药性的影响.结果 PANC-1细胞株中CD44+ CD24+ ESA+胰腺癌干细胞占细胞总数的0.1% ~0.8%;shRNA沉默Oct4和Nanog的效率分别是(46.00 ±0.08)%和(78.00±0.12)%;体内实验结果显示,沉默Oct4、Nanog基因后,裸鼠的致瘤性和肿瘤转移性显著下降,对吉西他滨耐药性减弱.结论 沉默Oct4、Nanog表达可抑制裸鼠体内胰腺癌干细胞的干性特征. 相似文献
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目的:使用内皮祖细胞再内皮化胰腺脱细胞支架,并初步评价其在宿主体内生成血管的能力。方法:采用灌注法制备结构完整的全胰腺脱细胞支架;并提取大鼠骨髓单个核细胞,诱导分化为内皮祖细胞,进行原代培养;将培养完成的内皮种植于支架内,并行体内移植。结果:在移植后第10天,实验组中包含红细胞的血管管腔数为(43±6)cm2,而对照组为(8±3)cm2;在移植后第20天,实验组中包含红细胞的血管管腔数为(62±9)cm2,而对照组为(16±5)cm2,此结果具有统计学意义(P<0.05,n=6)。种植内皮祖细胞后,支架在体内能更快更多的生成新生血管,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:再血管化的支架在体内移植后,与对照组相比,可以更快的与宿主循环系统形成吻合。 相似文献
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阳和汤治疗外科疑难杂症验案 总被引:2,自引:0,他引:2
阳和汤出自清·王洪绪所著的《外科全生集》。笔者在临床以阳虚、寒凝、痰滞为辨证要点 ,用阳和汤加减治疗外科疑难杂症每获良效。现撷验案 4则介绍如下。1 股骨头无菌性坏死王某 ,男 ,3 0岁。干部。右侧腰腿痛反复发作5年 ,加重月余。在外院以“腰椎增生”、“类风湿性关节炎”予抗风湿及推拿治疗月余无效 ,而来我院 ,就诊时患者神疲 ,消瘦 ,面白少华 ,纳差 ,右髋关节周围软组织压痛 ,直腿抬高试验阳性 ,屈膝屈旋试验阳性。X线检查示 :右侧股骨头无菌性坏死 ,血沉 :46mm/小时 ,血常规、抗“O”、粘蛋白、类风湿因子、免疫球蛋白等各项指… 相似文献
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目的:探讨改良后Madden胰管空肠吻合术在胰十二指肠切除术后预防胰瘘的临床价值。方法:回顾性分析2000年7月~2007年4月施行改良后Madden胰管空肠吻合术36例。Madden吻合法基础上进行改良,游离胰远断端3 cm,胰管内置入硅胶管。电刀灼破空肠全层形成直径2~5 mm小孔,胰管支架硅胶管经此孔插入空肠,胰管-空肠黏膜对合后以4-0的可吸收线间断吻合4针,将胰断面与空肠壁浆肌层连续缝合1周,收紧打结,使胰管周围的胰腺断面和空肠浆肌层贴合紧密。结果:采用此法治疗36例患者均顺利出院,未发生胰瘘。结论:改良后Madden胰管空肠吻合术设计合理,操作简便,疗效确切,值得临床推广应用。 相似文献
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2006年1月-2009年6月,笔者采用中药辨证治疗妊娠期咳嗽68例,疗效满意.现介绍如下.临床资料 相似文献
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目的比较小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)、小鼠骨髓单核细胞(BM-MNCs)和小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)重编程为诱导性多能干细胞(iPS细胞)的效率。方法用慢病毒LV-ef1a-mOct4-IRES-EGFP、LV-ef1a-mSox2-IRES-EGFP、LV-ef1a-mKlf4-IRES-EGFP和LV-ef1a-mc-Myc-IRES-EGFP感染BMSCs、BM-MNCs和MEFs,通过计算碱性磷酸酶染色阳性克隆数比较这3种细胞重编程为iPS细胞的效率。用胚胎干细胞表面标记检测、胚胎干细胞内源基因检测、拟胚体形成实验和畸胎瘤形成实验验证重编程获得的iPS细胞的多能性。结果起源于小鼠BMSCs、BM-MNCs及MEFs的3种iPS细胞均能形成边缘光整的致密克隆,可表达干性基因Nanog、Rex-1、SSEA-1,并能在体内外分化为三胚层组织。但是BMSCs来源的碱性磷酸酶阳性克隆数低于BM-MNCs和MEFs来源的克隆数。结论小鼠BMSCs、BM-MNCs及MEFs均可重编程为iPS细胞,但BMSCs重编程为iPS细胞的效率低于BM-MNCs和MEFs。 相似文献
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目的探讨类β细胞自体肝内移植对糖尿病Beagle犬的长期疗效及安全性。方法通过逆转录病毒载体pMSCV将外源性胰岛素基因和EGFP基因转导入Beagle犬骨髓间充质干细胞(BMSCs),制备类β细胞。然后运用肝动脉介入技术,将类β细胞自体移植入糖尿病Beagle犬肝内,通过监测比较糖尿病Beagle犬移植前后各项生理指标,评价其是否具有长期稳定的治疗效果,同时进行肝脏生理功能及病理组织形态学检测,并对其生物安全性进行验证。结果自体移植类β细胞对糖尿病Beagle犬血糖、体质量、胰岛素水平均有明显改善(均P〈0.01),且疗效持续80周以上;Beagle的肝功能正常(P〉0.05),移植部位的肝脏未发现肿瘤形成,具有可靠的生物安全性。结论自体肝内移植类β细胞对Beagle犬糖尿病有长期疗效且具有相对可靠的生物安全性。 相似文献