5-氮杂胞苷诱导大鼠心脏成纤维细胞向心肌样细胞分化进程相关基因的表达差异

目的 探讨5-氮杂胞苷（5-aza）诱导心脏成纤维细胞（CFs）向心肌样细胞分化5 d、7 d、14 d、21 d和28 d相关基因的表达差异。方法 新生1～3 d SD大鼠12只,胰蛋白酶/胶原酶联合消化法分离培养新生大鼠CFs,采用CFs分子标记盘状结构域受体2（DDR2）并行细胞免疫荧光染色。含15 μmol/L 5-aza心肌细胞诱导液培养第3代CFs, Real-time PCR检测心肌化诱导不同时间点相关基因vimentin、DDR2、Nanog、sox2、c-kit、sca-1、Tbx5、CD73、CD34、cMyc、klf4、Gata4、Oct4、Mef2c和心肌肌钙蛋白T（cTnT）的表达差异,细胞免疫荧光检测心肌化诱导后5 d、7 d、14 d、21 d和28 d肌钙蛋白T（cTnT）的表达。透射电子显微镜观察心肌化诱导28 d CFs的超微结构变化。结果 5-aza诱导CFs后3 d 细胞生长速率减慢,部分细胞由三角形、梭形向圆形和杆状转变。诱导后7 d、14 d、21 d 和28 d,与诱导前相比,DDR2表达稳定,vimentin在14 d表达下降,Nanog、c-kit、sox2和Tbx5伴随着心肌化进程呈现表达下降趋势,而CD73、Mef2c、CD34、Gata4、Oct4和cTnT表达逐步增加,sca-1在7 d 表达上升又下降,cMyc和klf4在14 d表达上升又下降。诱导后 5 d少量细胞表达cTnT,14～21 d cTnT阳性细胞数明显增高,28 d表达cTnT较多且趋于稳定。透射电子显微镜显示,CFs心肌化诱导28 d,细胞与细胞间出现端-端连接,细胞质内出现大量的肌原纤维,排列较为规律,但肌节不明显,H带、Z线和M线显示不清。结论 CFs经5-aza诱导,可向心肌样细胞分化,但不能形成成熟的心肌细胞。     

心脏成纤维细胞生物表型多样性

目的 探讨心脏成纤维细胞（CFs）生物表型多样性。方法 新生1～3天SD大鼠12只,胰蛋白酶/胶原酶联合消化法分离培养新60只生大鼠CFs,比较原代和传代培养细胞形态学变化,免疫组织化学学检测鉴定常见成纤维细胞标记波形蛋白（vimentin）、成纤维细胞特异性蛋白1（FSP1）和盘状结构域受体（DDR2）的表达,细胞免疫荧光检测CFs干细胞标记nanog、c-kit、sca-1、CD73和CD90的表达,细胞免疫荧光三标技术检测CFs干细胞标记间的共表达情况。 结果 酶联合消化法分离培养的CFs收获细胞量大,第3代细胞活力好、纯度高。Vimentin、FSP1和DDR2在CFs中均表达,但DDR2在CFs中呈强表达。部分CFs分别表达nanog、c-kit、sca-1、CD73和CD90,部分nanog阳性的CFs分别和CD73、CD90和sca-1,及其CD90和sca-1存在共表达,nanog⁺ /CD73⁺共表达阳性率最高（59.02%±8.39%）,与其他3组相比差异均有极显著性（P<0.01）;而 nanog⁺ /CD90⁺共表达阳性率与nanog⁺ /sca-1⁺之间差异无显著性（P>0.05）,但这两组与CD90⁺ /sca-1⁺相比差异均有极显著性（P<0.01）;CD90⁺ /sca-1⁺共表达阳性率均低于其他3组,差异具有极显著意义（P<0.01）。 结论 CFs是具有干细胞特征混合细胞群,在表型上具有多样性。     

应用鸡胚活体电转GFP示踪技术观察脊髓左右两侧神经元纤维投射

目的:探索鸡胚发育过程中,脊髓左右侧神经元经纤维之间的联系,为脊髓两侧神经纤维投射提供形态学基础;方法:采用鸡胚带壳开窗培养技术,待胚胎发育至第3天,通过活体电转基因,将pCAGGS-GFP质粒0.1～0.5μl准确注射到脊柱,在电压18 V、每次脉冲60 ms,间隔100 ms,电脉冲6次的条件下进行定时定位活体电转基因,电转后6小时开始到10天,分别收集胚胎,甲醛固定冰冻切片,DAPI染细胞核观察组织形态结构变化。结果:电转后6小时便可以观察到GFP的表达,24小时后可以看到GFP标记细胞纤维的投射,3天可以清晰的观察到转入GFP一侧脊髓的运动神经元纤维束投射到另外一侧脊髓。结论:电转GFP成功标记运动神经元纤维在脊髓左右两侧的投射。     

circRNA 404524在PM_(2.5)致BEAS-2B细胞炎症过程中的功能及机制研究

目的研究circRNA 404524在PM_(2.5)致永生化人支气管上皮样细胞(BEAS-2B)炎症过程中表达改变,探索circRNA在PM_(2.5)致气道炎症过程中的功能及机制。方法 BEAS-2B细胞分为6组:NT组(DMSO),PM_(2.5)组(75μg/ml PM_(2.5)),NC组(转染空载体质粒+DMSO),NC+PM_(2.5)组(转染空载体质粒+75μg/ml PM_(2.5)),OE组(转染circRNA 404524+DMSO),OE+PM_(2.5)组(转染circRNA 404524+75μg/ml PM_(2.5))。使用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测circRNA 404524在75μg/ml PM_(2.5)染毒BEAS-2B细胞中的表达水平,同时通过转染circRNA 404524的过表达载体联合75μg/ml PM_(2.5)染毒后检测circRNA404524、IL-6及IL-8的表达水平。检测circRNA 404524在BEAS-2B细胞胞浆/胞核的表达水平,分析其表达位置。通过KEGG生物信息学软件分析circRNA 404524可能参与调控的基因通路,而后检测NF-κB炎症通路关键基因的表达水平。结果与NT组相比,circRNA 404524在PM_(2.5)组表达下调,相对变化倍数为2.63,差异有统计学意义(P0.01)。转染circRNA 404524过表达载体后,通过检测发现,相比于NC组,OE组中circRNA 404524上调154.74倍,差异有统计学意义(P0.01)。检测炎症因子表达水平发现,与NC组相比,OE组中IL-6及IL-8表达均下调,差异均具有统计学意义(P0.05),NC+PM_(2.5)组中IL-6和IL-8表达均上调,差异均具有统计学意义(P0.01)。胞浆胞核定位结果显示circRNA 404524主要在胞核表达,检测NF-κB炎症通路关键基因的表达水平发现,相比于NC组,OE组中IKK-alpha、IKB-alpha及NFKB1表达均下调,NC+PM_(2.5)组中表达均上调,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论 circRNA 404524在PM_(2.5)染毒的BEAS-2B细胞中低表达,将其过表达后,PM_(2.5)引起的炎症水平降低,提示其在PM_(2.5)染毒致BEAS-2B细胞炎症过程中发挥抑炎基因的作用,并可能通过对NF-κB炎症通路的调控发挥功能。     

浅析我院门诊药房的药学服务

药学服务以患者方便、安全、满意为标准,通过药品调剂、用药咨询和用药指导,为患者提供药学知识和信息。药学服务可以达到减少药害、提高药物治疗质量、节省医药资源、降低医疗费用的积极效果。其具有高度专业性和技术性,包括药物咨询、指导合理用药、不良反应收集等。本文结合药师在门诊药房的具体工作实践,从门诊药房窗口药学服务的常见问题及应对措施,探讨如何做好门诊药房药学服务工作,以便我们更好地为患者服务。     

大鼠冠状动脉粥样硬化钙化组织与c-kit+和sca-1+细胞的关系研究

目的 探讨大鼠冠状动脉粥样硬化钙化区域sca-1、c-kit的表达变化,为进一步研究冠状动脉粥样硬化机制奠定细胞学基础。方法 30只健康成年SD大鼠,随机分为正常对照组(n=8)和动脉粥样硬化钙化模型组(n=22)。采用丙基硫氧嘧啶灌胃、高脂高胆固醇饲料喂养和维生素D3腹腔注射方法制备模型。模型制备成功后,通过免疫组织化学和免疫荧光技术观察sca-1、c-kit在模型组与正常组的大鼠冠状动脉组织中的表达变化。利用免疫荧光双标技术证明sca-1与α-SMA的共定位表达。利用western blotting技术检测模型组与正常组的冠状动脉组织c-kit、sca-1蛋白的表达差异。结果 造模12周,大鼠冠状动脉管壁明显增厚,内膜明显增生,平滑肌纤维排列显著紊乱,坏死物质沉积、脂质沉积和钙结节沉淀。免疫组化和免疫荧光结果显示sca-1⁺细胞和c-kit⁺细胞在动脉粥样硬化钙化区域的冠状动脉内膜、中膜、外膜中数量明显高于正常对照。病变区域的部分细胞存在sca-1与α-SMA的共表达。Western blotting结果显示动脉粥样硬化和钙化区域的c-k...     

小鼠胚胎发育过程中N-Cadherin异常表达对大脑皮层神经元迁移的影响

目的:探究N-Cadhetin异常表达对小鼠大脑皮层发育过程中神经元迁移的影响.方法:通过小鼠活体子宫电转基因技术和RNA干扰技术相结合,在小鼠胚胎大脑皮层发育过程中实现对N-Cadherin的超表达和抑制表达,荧光免疫组化检测超表达结果,用GFP示踪N-Cadherin超表达和抑制表达后神经元在大脑皮层发育过程中的迁移特征.结果:与对照组相比,N-Cadherin超表达后有更多的GFP阳性神经元迁移到皮层的Ⅱ-Ⅳ层;N-Cadherin被抑制后大量GFP阳性神经元停滞在SVZ区.结论:N-Cadherin在小鼠大脑皮层发育过程中对神经元的迁移具有影响作用.     

生物功能性全口义齿修复治疗无牙颌患者的临床效果

目的 探讨生物功能性全口义齿修复治疗无牙颌患者临床效果及安全性。方法 将80例在我院行无牙颌义齿修复治疗的患者随机分别采用传统常规全口义齿修复与生物功能性全口义齿修复。由同一组口腔科医师取模并进行3次复诊,分别行托盘试戴、蜡型试戴、义齿试戴。对患者常规全口义齿试戴、生物功能性全口义齿试戴2周后进行义齿固位力测试、咀嚼效率测试、义齿满意度测评。按照所佩戴的全口义齿分为常规全口义齿组和生物功能性全口义齿组,对上述佩戴指标进行测评并比较。结果 无牙颌患者佩戴常规全口义齿时上颌与下颌固位力均明显小于佩戴生物功能性全口义齿的固位力,差异有统计学意义(P<0.05);无牙颌患者佩戴常规全口义齿时咀嚼30次色调值明显高于佩戴生物功能性全口义齿,差异有统计学意义(P<0.05);患者配电生物功能性全口义齿的佩戴满意度的各项评分均明显高于常规全口义齿佩戴时的各项评分,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 生物功能性全口义齿修复治疗无牙颌患者相较于常规全口义齿修复,可显著提升上、下颌固位力及咀嚼效率,患者获得更优的佩戴满意度。     

临床药师参与1例产后绒癌患者化疗的药学实践

 目的 通过临床药师实践过程,探索临床药师的工作方式及思维方法。方法 临床药师全程参与产后绒癌的化疗过程,充分利用专业背景,在给药方案设计、调整、药物不良事件药学监护、患者出院宣教等环节,作为临床治疗团队一员,为患者提供全面的药学服务。结果 临床药师参与的临床治疗团队能更好的为患者提供服务。结论 临床药师应做好知识储备,积极主动参与临床治疗工作,做好药学监护。
     

胆舒胶囊联合四味降酶片治疗慢性胆囊炎的疗效

〔摘 要〕 目的：探讨胆舒胶囊联合四味降酶片治疗慢性胆囊炎的临床疗效及对胆囊功能、炎症因子水平的影响。方法： 选取解放军联勤保障部队第 990 医院 2019 年 3 月至 2021 年 3 月期间收治的 78 例慢性胆囊炎患者,按随机数字表法分为对 照组与观察组,各 39 例。对照组予以常规西药治疗,观察组在对照组基础上予以胆舒胶囊联合四味降酶片治疗。比较两组 临床疗效、胆囊情况、炎症因子水平〔C 反应蛋白（CRP）、白细胞介素 –6（IL–6）〕及不良反应情况。结果：观察组患者 治疗总有效率为 94.87 %,高于对照组的 79.49 %,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）;治疗后观察组患者的胆囊壁厚度低于 对照组,胆囊排空率高于对照组,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）;治疗后观察组患者的 CRP、IL–6 低于对照组,差异具 有统计学意义（P ＜ 0.05）;观察组患者不良反应发生率为 10.26 %,与对照组的 7.69 % 比较,差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。 结论：胆舒胶囊联合四味降酶片可增强慢性胆囊炎治疗效果,减轻胆囊部位炎症反应,促进胆囊功能恢复,安全可靠。