1例WHIM综合征患儿临床与免疫学特征研究

目的探讨1例CXCR4基因突变所导致的WHIM综合征患儿临床及免疫学特征。方法对1例以反复呼吸道感染、低丙种球蛋白血症、粒细胞缺乏和疣为主要临床表现的患儿行全基因组测序,并利用流式细胞术检测其外周血淋巴细胞亚群和PMA刺激前后淋巴细胞CXCR4表达变化。结果确诊1例由CXCR4基因杂合突变(c.1000C>T,p.R334X)导致的WHIM综合征患儿,PMA刺激后淋巴细胞CXCR4表达无降低,淋巴细胞亚群分析提示T、B细胞绝对数及相对数均减少,NK、中心记忆和效应记忆T细胞相对数升高,初始T细胞相对数明显降低。与健康人相比,患儿Tfh细胞相对数降低,进一步亚群分析显示Th1样细胞相对数升高而Th17样相对数降低。结论本研究从功能上证实该杂合突变可导致CXCR4内化功能受损,使CXCR4/CXCL12结合后下游信号持续活化,影响外周血淋巴细胞各亚群变化。发现WHIM综合征患者Tfh细胞及其亚群数量异常,提示此类患者体液免疫受损可能与Tfh数量变化所致生发中心功能障碍有关。CXCR4在维持免疫细胞稳态与功能行使中发挥重要的作用。     

JAZF1基因抑制对3T3-L1脂肪细胞糖、脂代谢的影响

目的 探讨JAZF1基因抑制对3T3-L1脂肪细胞糖、脂代谢相关基因的影响.方法 构建JAZF1小发夹RNA (shRNA)表达载体并转染3T3-L1细胞,实时荧光定量PCR(RT-QPCR)和蛋白印迹法检测JAZF1 mRNA和蛋白水平的表达;氢三放射示踪法检测3T3-L1细胞糖摄取率;蛋白印记法检测糖、脂代谢相关基因蛋白水平;油红O染色检测脂肪细胞甘油三酯(TG)含量变化.结果 成功构建JAZF1-shRNA;转染脂肪细胞48 h后,JAZF1 mRNA和蛋白水平明显低于对照组(P＜0.05);氢3放射性示踪法显示转染组葡萄糖摄取率明显降低(P＜0.05);PPAR-γ蛋白表达升高(P＜0.05),激素敏感脂肪酶(HSL)、内脏脂肪素(Visfatin)、胰岛素诱导基囚-2 (Insig-2)蛋白表达降低(均P＜0.05);油红O染色显示JAZF1转染组细胞内脂质积聚明显,比对照组升高约25％(P＜0.05).结论 JAZF1基因抑制可减少基础糖转运,增加脂质与胆固醇合成,减少脂质分解并减少相关脂肪细胞因子的表达.     

1例NEMO-ID患儿临床与免疫学特征研究

目的探讨1例无外胚层发育不良、反复感染伴淋巴结肿大患儿临床特征、IKBKG(NEMO)基因突变、NEMO蛋白表达及免疫学特征。方法对1例临床表现为反复发热、支气管肺炎及颈淋巴结肿大患儿行免疫学初筛、免疫相关基因高通量测序、蛋白印迹法检测NEMO蛋白表达及淋巴细胞增殖功能检测。结果基因分析示IKBKG基因第9号外显子拼接位点发生g.21819 GA杂合突变,其母为该突变携带者。患儿NEMO蛋白表达量明显降低,B细胞增殖功能明显受损。结论在国内首次确诊1例IKBKG基因突变致NEMO-ID患儿,不具备外胚层发育不良的反复感染患儿应考虑本病可能。假基因可能干扰高通量测序结果,仔细分析序列原始数据对最终获得确诊结果很有帮助。     

中枢nesfatin-1表达下调对大鼠胰岛素敏感性的影响

目的探讨中枢nesfatin-1表达下调对SD大鼠胰岛素敏感性的影响。方法将60只雄性SD大鼠用随机数字表法分为普食喂养+人工脑脊液(aCSF)组(NCA组,n=10),普食喂养+Ad-shGFP组(NCG组,n=10),普食喂养+Ad-shNUCB2组(NCN组,n=10),高脂喂养+aCSF组(HFA组,n=10),高脂喂养对照组(HFC组,n=10),高脂喂养+Ad-shGFP组(HFG组,n=10),高脂喂养+Ad-shNUCB2组(HFN组,n=10)。构建大鼠脑室内微量给药系统;测定中枢Ad-shNUCB2病毒干预后各组大鼠摄食、体重、血糖、血脂及血浆胰岛素;采用3-3H葡萄糖和2-脱氧-~3H葡萄糖(~3H-2DG)为示踪剂的扩展胰岛素钳夹技术评价各组大鼠糖代谢和胰岛素敏感性的变化。结果和NCA组相比,HFA组空腹血浆胰岛素(FIns)、血浆游离脂肪酸(FFA)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)显著升高(P0. 05或P0. 01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)显著降低(均P0. 05);和NCA组和HFA组相比,NCN组和HFN组的血浆相关脂代谢指标未见显著差异(P 0. 05)。在钳夹稳态期,NCN组葡萄糖输注率(GIR)及葡萄糖清除率(GRd)显著低于NCA及NCG组(P0. 05),而HFN组GIR及GRd同样显著低于HFA和HFG组(P0. 05);NCN组和HFN组肝糖输出分别被抑制24. 7%和20. 3%,显著低于NCG组和HFG组(均P0. 05)。HFA组各组织葡萄糖摄取率明显低于NCA组(均P0. 05),HFN和NCN各组织葡萄糖摄取率分别显著低于HFG组和NCG组(均P0. 05)。结论中枢nesfatin-1低表达降低SD大鼠胰岛素敏感性及加重高脂诱导的胰岛素抵抗,加重糖代谢紊乱。     

血浆锌α2糖蛋白与动脉粥样硬化的相关性研究

目的:观测人血浆锌α2糖蛋白(Zinc-α2-glycoprotein,ZAG)与动脉粥样硬化的相关性,并探讨血浆ZAG在动脉粥样硬化方面的临床应用价值。方法:纳入242例研究对象,完善临床指标和血浆ZAG水平的检测,并进行冠状动脉造影、颈动脉及下肢动脉彩色多普勒超声等评估动脉粥样硬化的检查。根据评估动脉粥样硬化的检查结果,将210例发现有其中任一部位动脉粥样硬化者纳入动脉粥样硬化组(AS组),32例未发现粥样动脉硬化者纳入非动脉粥样硬化组(非AS组)。采用t检验分析AS组与非AS组的血浆ZAG水平的统计学差异。采用Spearman分析ZAG与临床指标的相关性,多因素Logistic回归分析动脉粥样硬化的影响因素。采用ROC曲线评估ZAG诊断不同部位动脉粥样硬化的效能,并分析其灵敏度和特异度。结果:AS组血浆ZAG水平低于非AS组,差异有统计学意义[(45.79±5.39)μg/ml:(54.24±2.69)μg/ml,P<0.01]。Spearman相关分析显示,BMI、腰围、WHR与ZAG呈负相关(P<0.01或<0.05);HDL-C与ZAG呈正相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,血浆ZAG是动脉粥样硬化独立的影响因子(B=-0.424,95%CI:0.564-0.760,P<0.01)。血浆ZAG评价冠状动脉粥样硬化、颈动脉粥样硬化、下肢动脉粥样硬化的敏感度分别为89.8%、83.6%、76.8%,特异度分别为91.2%、78.5%、81.1%。结论:血浆ZAG水平与动脉粥样硬化呈负相关,血浆ZAG水平的降低是动脉粥样硬化的独立影响因素。血浆ZAG水平的检测对动脉粥样硬化的筛查具有一定的应用价值,对冠状动脉粥样硬化的筛查价值大于对颈动脉和下肢动脉的筛查价值。     

血浆锌α2糖蛋白与冠状动脉粥样硬化病变程度的相关性分析

目的 探讨人血浆锌α2糖蛋白(ZAG)与冠状动脉粥样硬化病变程度的相关性.方法 纳入242例研究对象,完善临床指标和血浆ZAG水平的检测,并进行冠状动脉造影(CAG),根据检查结果分为冠状动脉粥样硬化组(CAD组)和对照组.Gensini评分评估冠状动脉病变程度,根据评估结果分为不同程度的亚组,比较血浆ZAG水平在各组间的差异.Spearman分析ZAG与临床指标的相关性.受试者工作(ROC)曲线评估ZAG诊断冠状动脉粥样硬化的效能,并分析其灵敏度和特异度.结果 CAD组患者血浆ZAG水平(45.12±5.02)μg/mL明显低于对照组(53.93±2.96) μg/mL,差异有统计学意义(P＜0.05).随着Gensini评分的增加,血浆ZAG水平呈下降趋势,各组间差异均有统计学意义(P＜0.05).Spearman相关分析显示,BMI、腰围、腰臀比(WHR)与ZAG呈负相关(P＜0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)与ZAG呈正相关(P＜0.05).血浆ZAG评价冠状动脉粥样硬化的敏感度为89.8％,特异度为91.2％.结论 血浆ZAG与冠状动脉粥样硬化病变程度呈负相关,其水平的检测对冠状动脉粥样硬化的筛查具有一定的应用价值.     

慢性阻塞性肺疾病证型与实验室指标相关性研究

目的:探究慢性阻塞性肺疾病中医辨证分型与实验室指标的相关性。方法:选取300例慢性阻塞性肺疾病患者进行中医辨证分型,并检测其血常规指标、血气分析指标,以及肺功能指标,通过数据分析寻找中辨证型与实验室指标参数的相关性。结果:阳虚水泛证的血红蛋白计数(Hb)水平其他证型(P﹤0.05);痰热壅肺证的中性粒细胞百分比(N)、白细胞计数(WBC)其他证型(P﹤0.05);痰浊阻肺证的红细胞计数(RBC)其他证型(P﹤0.05);痰浊阻肺证、痰热壅肺证、痰蒙神窍证的PaO₂明显阳虚水泛证(P﹤0.05);痰浊阻肺证、痰热壅肺证、痰蒙神窍证的动脉血二氧化碳分压(PaCO₂)肺肾气虚证(P﹤0.05);阳虚水泛证动脉血氧饱和度(SaO₂)下降程度比较高;痰蒙神窍证的pH下降程度比较高;肺肾气虚证、阳虚水泛证的第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)、第1秒用力呼气容积/用力肺活量(FEV1/FVC),下降程度最高(P﹤0.05)。结论:慢性阻塞性肺疾病的不同证候,肺功能、血气指标、血常规指标等有不同的倾向,可以为中医临床辨证提供...     

2型PI3Kδ过度活化综合征临床与免疫学特征分析

目的分析2型PI3Kδ过度活化综合征(APDS2)患儿的临床与免疫学特征。方法回顾性分析重庆医科大学附属儿童医院收治的1例APDS2患儿临床资料、免疫相关基因测序、影像学和实验室检查结果,利用流式细胞术对患儿淋巴细胞亚群及其表型进行检测,并以正常同龄儿童或患儿父亲为对照进行对比分析。结果患儿女,6岁4月龄,因"面色苍白1个月余,咳嗽7 d"于2017年6月首次入院,IgA(<0.067 g/L)降低伴IgM(2.55 g/L)升高,腹部超声提示肝脏(肋下1.7 cm)和脾脏(肋下3.6 cm)肿大,基因测序显示患儿PIK3R1基因c.1425+1G>A杂合突变,予醋酸泼尼松(10 mg/次,3次/d,逐渐减量)口服治疗7个月,患儿IgM降至正常(1.72 g/L),肝脾缩小(肝肋下0 cm,脾肋下0.5 cm)。2019年7月因"面色苍黄半个月"二次入院,精细免疫分型提示初始CD4+T细胞(0.386)和初始CD8+T细胞(0.271)比例降低,终末分化效应记忆CD8+T细胞(0.377)和过渡性B细胞(0.223)比例增高。患儿CD3+T、CD4+T、CD8+T细胞(4 ...     

白藜芦醇对小鼠血小板氧化应激和衰老指标及储存时间的影响

目的 探究白藜芦醇对小鼠血小板氧化应激和衰老指标水平及储存时间的影响.方法 选取6周大小的C57 black 6品系小鼠,制备富含血小板的血浆,将每个样本平均分为观察组与对照组,观察组中加入白藜芦醇,并使用二甲基亚砜标定至50μmol/L;对照组加入等量二甲基亚砜;分别于储存第1、2、3、4、5、6、7 d进行取样测定...