抑制mTOR增强索拉非尼介导的HSC铁死亡

目的：探究mTOR信号通路在索拉非尼诱导肝星状细胞(HSC)铁死亡改善肝纤维化进程中的作用及其机制。方法：用四氯化碳(CCl₄)诱导C57BL/6雄性小鼠肝纤维化模型,随机分为正常组、模型组、索拉非尼低(2.5 mg/kg),中(5 mg/kg),高(10 mg/kg)剂量组,每组6只。除正常组外,其余4组均腹腔注射CCl₄建立肝纤维化模型,第4周开始给予索拉非尼灌胃。各组小鼠于造模第8周末处死。Western blot检测肝组织中mTOR和p-mTOR表达情况。体外实验中,采用PDGF-BB诱导HSC-T6细胞活化,并加入不同浓度索拉非尼(5μM,10μM,20μM)和mTOR抑制剂及激活剂,CCK8检测HSC-T6细胞活力;Western blot检测α-SMA、COL1α1、GPX4、mTOR和p-mTOR蛋白表达情况;试剂盒检测HSC-T6中iron、GSH、MDA含量;采用双氯荧光素(2′,7′-dichlorofluorescin diacetate,DCFH-DA)检测ROS水平。结果：结果显示,索拉非尼可显著降低α-SMA、C...     

PCa组织Mfn2 mRNA表达及转染Mfn2过表达质粒的人PCa细胞株增殖、迁移、侵袭、凋亡观察

目的 观察前列腺癌（PCa）组织Mfn2 mRNA表达及转染Mfn2过表达质粒的人PCa细胞株增殖、迁移、侵袭、凋亡情况。方法 体外培养人PCa细胞株（PC3细胞和DU145细胞）,分别转染Mfn2过表达质粒、空白载体质粒及不转染质粒,PC3细胞分别记为A、B、C组,DU145细胞分别记为D、E、F组。CCK-8实验检测各组细胞OD值,细胞集落形成实验测算各组细胞集落数目,以OD值和细胞集落数目表示细胞增殖能力。细胞划痕实验测算各组细胞迁移率,以细胞迁移率表示细胞迁移能力。Transwell实验测算各组细胞侵袭数目,以细胞侵袭数目数表示细胞侵袭能力。流式细胞术测算各组细胞凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3、caspase-3及PI3K/AKT通路相关蛋白（p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT）。结果 PCa、癌旁组织Mfn2 mRNA相对表达量分别为0.36±0.32、0.72±0.35,两者比较,P<0.05。与同组24 h比较,A、B、C组48和72 h的OD值增加（P均<0.05）;与同组48 ...