人胚雪旺细胞组织工程神经修复坐骨神经缺损的实验研究

目的：探索人胚雪旺细胞作为组织工程的种子细胞修复周围神经缺损的可行性。方法：通过组织工程方法用PLGA导管和polyglactin 910纤维负载人胚雪旺细胞预先构置好人工神经，然后用于修复大鼠20mm的坐骨神经缺损，并与神经切断后原位缝合以及用单纯的PLGA导管进行修复的实验组进行对照。通过活体肢体功能观察、靶器官肌肉测量、电生理检测、辣根过氧化物酶示踪、连续组织切片图像分析以及透射电镜等检查神经再生情况。结果：人工神经修复组神经再生良好，效果接近于神经原位缝合组，明显优于单纯的PLGA导管修复组。结论：人胚雪旺细胞构建的人工神经可以修复20mm的周围神经缺损。     

重组人血小板源性生长因子增加细胞外信号调节激酶磷酸化促进糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面愈合

目的 在体观察重组人血小板源性生长因子（recombinant human platelet—derived growth factor，rhPDGF）促进糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面修复可能涉及的细胞和分子机制，研究其可能涉及的信号通路。方法 26只糖尿病大鼠，每只动物背部制备4个全层皮肤缺损创面，选取其中52个创面，随机分成3组，即对照组，创面自然愈合；rhPDGF治疗组，创面rhPDGF用量为7．0μg／cm^2；赋形剂组，创面用等量赋形剂凝胶。观察治疗后3、7和14d创面肉芽形成、胶原沉积、再上皮化速率以及炎性细胞浸润情况，并采用免疫荧光和免疫组织化学技术观察创面周围和创面修复细胞内细胞外信号调节激酶1／2（extracellular signal—regulated kinase1／2，ERK1／2）磷酸化和增殖细胞核抗原（proliferative cell nuclear antigen，PCNA）的表达。结果 组织学观察，rhPDGF治疗组创面可见大量炎性细胞浸润，毛细血管胚芽及成纤维细胞明显多于另两组（P〈0．05）；胶原沉积明显，肉芽组织生长活跃，创面收缩显著，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫学研究显示，应用rhPDGF7～14d后，rhPDGF治疗组ERK1／2明显强于对照组和赋形剂组（P〈0．05）；且损伤后3～7d rhPDGF治疗组修复细胞PCNA的表达明显高于对照组和赋形剂组（P〈0．05）。结论 rhPDGF促糖尿病大鼠刨面愈合的作用部分是通过ERK1／2信号通路的磷酸化来完成的。     

进一步重视脂肪新功能对创面愈合作用的研究

创面愈合的研究范围正随着相关领域的研究进展而不断拓展和完善。以皮下脂肪组织为例 ,以往多数的研究认为 ,脂肪组织来源于间充质细胞 (mesenchymalcell,MC) ,其功能仅是一个能量贮存仓库。但近年来的研究表明 ,脂肪组织还可能是一个重要的内分泌器官 ,在发育学、信号转导 ,以及干细胞作用等多方面与组织修复存在着密切联系。有专家认为 ,加强对脂肪细胞新功能的研究和开发 ,有可能对创面修复和组织再生机制产生新的认识 ,并寻找出新的促愈合手段。脂肪细胞参与创面愈合首先表现在它可能作为一个内分泌器官。迄今为止 ,已经发现人的脂肪细…     

端侧神经吻合后GAP-43和Tau蛋白在背根神经节和受神经内的变化

神经端侧吻合后 ,供神经干能够经侧枝发芽再生轴突[1] 。吻合初期 ,供、受神经的第 2颈椎 (Ｃ2 )背根节内生长相关蛋白 43(ＧＡＰ 43)含量发生改变 ,反映了ＧＡＰ 43在供、受神经有不同的表达变化规律[2 ] 。而轴突再生与细胞骨架系统的形成密不可分 ,生长锥的延伸必须有微管形成 ,才能算作成功的神经再生。Ｔａｕ蛋白是一种重要的微管相关蛋白 ,影响着微管的形成 ,而ＧＡＰ 43是富含在生长锥中的神经生长相关蛋白。我们利用Ｔａｕ和ＧＡＰ 43抗体进行免疫组织化学染色 ,观察Ｔａｕ在神经节和神经纤维中的变化规律及其与ＧＡＰ 43表达的关…     

成年兔坐骨神经雪旺细胞的分离纯化培养

目的：探讨从成年新西兰兔坐骨神经分离培养获得大量雪旺细胞的有效手段,方法：利用成年免发生Wallerian变性的坐骨神经用植块法进行培养,通过相差显微活细胞计数和S－100细胞化学标记相结合鉴定了雪旺细胞增值和纯化程度。结果：通过上述方法获得大量雪旺细胞纯度达95％,并绘制其生长曲线,体外培养的雪旺细胞倍增时间为8d。结论：本方法能获得大量高纯度的雪旺细胞,为组织工程修复周围神经缺损打下基础。     

ZEPHIR^TM钢板系统在颈椎前路手术中的初步应用

法国枢法模公司 2 0 0 0年最新推出ＺＥＰＨＩＲＴＭ前路钢板系统 ,可治疗颈椎退变、创伤和肿瘤等疾病。其设计原理来源于骨科内固定协会 (ＡＯ)的颈椎前路单皮质带锁钢板系统 ,但又作了大胆的改进 ,应用简单 ,易操作 ,适应证更广。我院自 2 0 0 0年 10月开始用ＺＥＰＨＩＲＴＭ 前路钢板系统治疗颈椎病获得良好疗效。对象和方法对象　自 2 0 0 0年 10月开始应用ＺＥＰＨＩＲＴＭ 前路钢板系统进行手术治疗的 7例颈椎病患者 ,其中男 5例女 2例 ,年龄 38～ 6 2岁 ,颈椎间盘突出 6例 ,后纵韧带钙化 1例。钢板系统　ＺＥＰＨＩＲＴＭ 前路钢板…     

血管紧张素转化酶抑制剂对表皮干细胞增殖、分化、迁移的影响

目的 观察血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂卡托普利对表皮干细胞(ESCs)增殖、迁移、分化的影响,探讨ACE在维持ESCs生物学功能中的作用.方法 利用差速贴壁法获得10例儿童的ESCs,进行离体培养,检测ACE在ESCs的表达.用XTT法检测不同浓度(1 ×l0-5、1×10-6、l×10-7、1×10-8mol/L) ACEI卡托普利对ESCs增殖的影响;体外创伤模型观察1×10-6mol/L的卡托普利对ESCs 6、12、18、24h各时间段的迁移能力;流式细胞仪检测K10的表达观察1×10-6mol/L的卡托普利对ESCs分化的影响.结果 培养的细胞经β1-整合素和K19免疫荧光双重标记染色,83.55％细胞为双标记阳性细胞,即ESCs.免疫荧光染色和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)结果显示ESCs表达ACE.流式细胞仪定量检测培养的细胞ACE阳性率为74.2％.1×10-6mol/L的卡托普利可明显抑制ESCs的增殖(P＜0.05),且在第5天达到峰值.1×10-6 mol/L的卡托普利可明显抑制细胞的迁移能力(P＜0.05)和克隆能力(P＜0.05).流式细胞仪检测结果表明,l×10-6 mol/L的卡托普利并不影响K10的表达(P＞0.05).结论 ACE通过影响ESCs的增殖,迁移从而影响皮肤的损伤修复和自我更新.     

血管紧张素Ⅱ受体在深Ⅱ度烧伤大鼠创面愈合过程中的表达

目的 观察血管紧张素(Ang)Ⅱ1型(AT1)和2型(AT2)受体在烧伤创面愈合过程中的表达及其与细胞增殖和凋亡的关系.方法 在大鼠深Ⅱ度烧伤后即刻、3、7、14和21 d取创面皮肤标本,采用免疫荧光组织化学染色法检测AT1和AT2的表达;采用增殖细胞核抗原(PcNA)标记和原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色法观察细胞增殖和凋亡.结果 在正常皮肤,AT1和AT2表达强度较弱.但伤后第7天表达达高峰,14 d降低,AT1的表达下调更明显.烧伤后7 dPCNA阳性细胞数最多,14 d后降低.烧伤后7～14 d TUNEL阳性细胞数维持在较高水平,随后下降.结论 烧伤愈合过程中AT1和AT2的表达具时空特性,这种变化与创面修复细胞增殖和凋亡密切相关.     

关节镜下臀肌挛缩松解术治疗髌股关节不稳定的疗效分析

目的 探讨关节镜下臀肌挛缩松解术对改善髌股关节不稳定的疗效。方法 选取了66例在2016年1月—2018年12月于同济大学附属第十人民医院行关节镜下臀肌挛缩松解术的患者,所选的研究对象术前必须伴有髌股关节不稳定的症状和相关影像学证据。并于术前术后评估患者的膝关节Lysholm功能评分,运用CT检查获取髌股关节相关指标并进行统计分析。结果 所有入组患者均获得了较好的临床效果,术前的髋关节活动弹响和异常姿势症状明显改善。此外,术后患者膝关节的疼痛也有显著的缓解,术前术后的Lysholm评分差异有统计学意义（P<0.05）。在膝关节CT影像学的对比中可以发现,髌骨倾斜角,髌股指数和髌骨外移度指标在术后明显减小（P<0.05）。平均的外侧髌股角术后明显增大(P<0.05)。结论 关节镜下臀肌挛缩松解术可以显著改善髌骨的外移和倾斜,从而增强髌股关节的稳定性。