高脂血症长爪沙鼠模型的转录组检测和代谢性炎症通路的初步研究

目的研究饮食诱发的高脂血症长爪沙鼠模型的关键基因及代谢性炎症通路调控网络。方法利用RNA-Seq测序技术及生物信息学技术对正常组与模型组两个RNA池进行测序和分析。结果 De novo拼接后获得有效长爪沙鼠基因47 522个(即≥100 bp的unigene),大小26.9 Mb,与GenBank中现有的基因比对结果表明,约82.53%的序列与基因组上的外显子序列同源;诱发高脂血症动物与正常动物之间共获得21 125个差异基因,其中16 087个下调,5 038个上调,模型组相对于正常组存在显著的下调关系(P0.01)。其中与长爪沙鼠高脂血症代谢性炎症密切相关的通路有8个(P0.01),这8个通路所表达的基因中有15个与免疫和炎症相关的基因显著下调(P0.01)。结论 RNA-Seq测序和生物信息技术可作为研究高脂血症动物模型的整体基因转录的工具,筛选出的关键基因和通路可作为研究的候选基因或操作靶点。     

基于高通量测序技术的实验动物沙门氏菌检测方法的建立与评价

目的建立基于高通量测序技术的实验动物沙门氏菌检测方法,应用于实验动物沙门氏菌的检测。方法提取小鼠粪便DNA样本,分别针对16S r DNA区域、23S r DNA区域、16S~23S r DNA IS、23S~5S r DNA IS、gyr B优选区域设计通用引物,对各个引物进行测试分析,优化扩增条件并建库,利用Illumina高通量测序技术检测区分42个样本中的沙门氏菌,评价该方法的特异性和稳定性。结果筛选发现沙门氏菌的菌种分类优选区域为gyr B基因,gyr B基因引物序列为FP5’-AACCACCGCAATCAGACCTT3’,FP5’-AGCCACGAAACCTTCACYA-3’。对引物进行优化,确定最佳扩增条件及样品上样量并正式建库,通过高通量测序和序列分析能检测出42个样品中极微量的沙门氏菌,检测方法稳定,灵敏度高,检测限可达0~102的cfu。结论本实验利用高通量测序技术,建立了一套完整检测实验动物沙门氏菌的生物体系,能检测出实验动物体内极微量的沙门氏菌,检测方法稳定性好,灵敏度高,可沿用至其他种类病原微生物的检测。     

未净化Z:ZCLA长爪沙鼠封闭群繁育及遗传稳定性分析

目的 分析未净化Z:ZCLA长爪沙鼠封闭群繁育和生长指标,并利用直接测序法分析其遗传稳定性.方法 随机选择40对Z:ZCLA长爪沙鼠,记录其繁殖胎次、产子数等指标,分析其仔鼠的生长发育情况.遗传稳定性分析选择Z:ZCLA长爪沙鼠非同胞、非亲代个体33只,提取肝脏基因组DNA,PCR扩增D-Loop序列,产物纯化后双向测序,测序结果与Z:ZCLA长爪沙鼠标准序列比对.结果 Z:ZCLA长爪沙鼠每胎产仔7只,胎间隔多在20～60d间,雄性体重高于雌性.遗传稳定性分析检测发现33只Z:ZCLA长爪沙鼠序列与标准序列完全一致.结论 Z:ZCLA长爪沙鼠群体内未发现遗传多态性,说明该群体具有较好的遗传稳定性.     

用19个生化基因位点研究普通级Z:ZCLA长爪沙鼠的遗传多样性

实验动物资源是国家生命科学研究的重要科技资源。实验动物资源的共享和充分利用是生物科技创新的基础和保障。有效的共享机制和合理的共享方式是实现实验动物资源共享和充分利用的重要保障,是规范实验动物资源共享行为和确保共享安全的迫切需要。     

实验动物疫病监测的最小抽样量研究

目的利用数学流行病学理论实现实验动物流行病学调查和监测中最小抽样规模。方法根据二项分布公式推导出最小样本抽样公式（n=log（a）／log（1-p）,a=0．05,p=检出率,n=样本规模）,用浙江省2007～2008年四个兔场四次调查的数据来验证该公式的可行性。结果利用该公式计算所得的最小抽样量,采用计算机模拟抽样的方法在四次调查的数据库中模拟抽样,得出的估计感染率与实际感染率基本相符。结论该公式可以用来指导抽样。     

长爪沙鼠NAFLD模型的建立及其遗传学的研究

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)已成为目前主要代谢性疾病之一,针对传统的动物模型的缺陷,本研究首次建立了与人类NAFLD(从单纯脂肪肝到脂肪性肝炎,再进展到肝纤维化、肝硬化)极为相似、饲料配方简便的长爪沙鼠NAFLD模型,阐明了长爪沙鼠肝脏脂肪快速沉积的特征,揭示长爪沙鼠脂肪肝易感的分子机制、主要的调控靶点和网络作用特征,为临床治疗及新药研发提供一种背景相对清晰,耗时短的新型脂肪肝动物模型,同时也为NAFLD发病机制及药效新靶点的研究提供实验动物支撑,为选育近交系NAFLD长爪沙鼠奠定了理论与实践基础。     

非酒精性脂肪肝大鼠C-反应蛋白水平的变化及与肝功能的关系

目的 研究非酒精性脂肪肝模型大鼠的血清C-反应蛋白(CRP)水平变化,探讨其与肝功能之间的关系.方法 实验大鼠分为模型组(HF)、模型恢复组(FC)和对照组(NC).NC组采用基础饲料喂养,HF组采用高脂饲料喂养,FC组高脂喂养8周后改基础饲料喂养.模型建立后取大鼠空腹血测定血清肝酶系、血脂及CRP水平,肝脏标本作组织病理学检查.结果 高脂饲料喂养8周后,大鼠肝脏出现典型脂肪变性及炎症细胞浸润;12周后有重度脂肪变性伴大量炎症细胞浸润.HF组血清肝酶系(ALT、AST)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平均较NC组升高,血清CRP水平(0.43±0.14)mg/L亦高于NC组(0.14±0.08)mg/L.采取饮食控制的FC组肝脏病变程度减轻,ALT、AST、TC和HDL-C水平下降,CRP水平亦较HF组降低(0.21±0.14)mg/L.相关性分析显示脂肪肝大鼠的血清CRP水平与ALT水平正相关(r=0.56,P＜0.05).结论 非酒精脂肪肝模型大鼠血清CRP水平升高,并与肝功能指标(ALT水平)正相关,CRP可能是非酒精性脂肪肝的预测因素之一.     

不同频率电针对切卵大鼠松质骨空间结构的影响s

目的：观察电针不同脉冲频率对切卵大鼠松质骨结构的影响,探讨电针治疗原发性骨质疏松模型大鼠的最佳刺激参数。方法：采用电针2Hz、100Hz、2/100Hz不同频率对去卵巢骨质疏松大鼠进行治疗,以倍美力灌胃作为对照组,观察Micro-CT下大鼠松质骨空间结构参数以及血清E2、PICP、ICTP的变化。结果：电针组能不同程度提高模型大鼠骨小梁数目、厚度、骨体积分数和血清E2、PICP含量,减小骨小梁间隙、骨表面积体积比,降低血清ICTP水平;其中以100Hz频率电针组疗效更为明显。结论：电针对骨质疏松大鼠骨小梁空间结构具有一定的保护作用,并且这种保护作用以100Hz频率电针刺激更为明显。     

寄生虫学网络资源及网站建设初步构想

伴随着信息技术的发展，因特网越来越受到人们的重视，它是全球信息的集散地，其信息数量庞大、种类繁多、开放的环境和方便快捷的通信为信息的交流和资源共享打开方便之门，给医学教育、临床实践科学研究获取有价值的信息带来极大方便。近年来寄生虫学发展十分迅速，寄生虫学在生物医学领域的重要作用也逐渐为越来越多的人所认识。     

胆舒通片对胆道系统作用的实验研究

目的观察胆舒通片的利胆、镇痛、抗炎作用。方法用BL-410生物实验系统测定家兔胆囊运动,胆汁流量、Odd i括约肌紧张性和胆道末端内压,并采用相应的药理学模型研究胆舒通片的抗炎、镇痛作用。结果胆舒通片能增加胆囊收缩曲线下面积,显著增加家兔胆囊收缩的频率和收缩幅度,表明胆舒通片有增强胆囊收缩的作用。胆舒通片能促进胆汁分泌,可降低胆道末端内压,具有松弛Odd i括约肌的作用。可提高小鼠的热刺激痛阈,减少醋酸引起的扭体次数;对蛋清性足跖肿胀及对二甲苯引起的耳廓肿胀均有抑制作用,降低毛细血管通透性。结论胆舒通片具有利胆、抗炎、镇痛作用。