Alu-反向PCR检测HIV-1整合位点方法的建立

目的建立Alu-反向PCR检测整合型HIV-1DNA的实验方法。方法收集18例HIV-1感染者及12例健康者的抗凝血标本,根据整合型HIV-1DNA的特点设计引物,第一轮PCR5’端引物来自于人类保守的Alu序列,3’端引物来自于HIV-1gag序列,扩增片段包含了整合位点上游的人类基因组DNA序列和整合的HIV-1DNA序列。经PstⅠ酶切后进行自身片段环化,以此为模板设计针对HIV-1LTR和gag保守区域引物,进行巢式PCR。结果 16例HIV-1感染者成功扩增出目的片段,12例健康者均为阴性。结论本实验建立的检测整合型HIV-1的方法为进一步研究HIV病毒储藏库机制提供了参考。     

获得性免疫缺陷综合征相关淋巴瘤的诊治进展

由于人类免疫缺陷病毒(HIV)感染并破坏宿主CD4+T淋巴细胞导致机体免疫缺陷,恶性肿瘤成为获得性免疫缺陷综合征(AIDS)最重要的并发症之一,其中淋巴瘤位于AIDS相关恶性肿瘤第1位.HIV感染者所患淋巴瘤的临床特征与非HIV感染者明显不同,针对其化学治疗要充分考虑宿主免疫状况.文章依据国际最新研究成果和国际相关指南,对该疾病临床特征及治疗方面的注意事项进行综述.     

慢性HIV/AIDS患者T淋巴细胞凋亡与疾病进展关系的研究

目的 探讨慢性未经抗病毒治疗的HIV/AIDS患者T淋巴细胞及各亚群凋亡与疾病进展的相关性.方法 以36例慢性未经抗病毒治疗的HIV/AIDS患者为研究对象,根据CD4细胞计数分为3组:<200个/μl组,200～350个/μl组,>350个/μl组,同时选取16例健康志愿者作对照,分离外周血单核细胞(PBMC)后,采用CD45RO及CD27标记T细胞亚群,Annexin V标记细胞凋亡,用流式细胞仪检测各项指标.其中4例患者及4例健康志愿者的PBMC在体外培养,比较分析体外培养0、3、6、12、24 h不同时间点T细胞凋亡的变化情况.结果 (1)HIV/AIDS患者CD4~+、CD8~+T细胞及各亚群上Annexin V表达百分比均显著高于健康人(P<0.05),但3组患者之间比较差异无统计学意义(P>0.05);(2)HIV/AIDS患者CD4~+、CD8~+T细胞及各业群上Annexin V表达百分比与CD4~+T细胞计数及病毒载显均无显著相关性(P>0.05);(3)随着体外细胞培养时间的延长,HIV/AIDS患者CD4~+T细胞的凋亡及死亡细胞百分比均显著高于健康人(P<0.05),并且HIV/AIDS患者CD4~+T细胞较CD8~+T细胞更易发生凋亡和死亡.结论 HIV/AIDS患者的T细胞凋亡水平显著高于健康人,并且CD4~+T细胞较CD8~+T细胞更易发生凋亡和死亡,但是T细胞凋亡水平与HIV的疾病进展程度并没有相关性.     

HAART早期AIDS患者CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的变化及其与免疫活化关系的研究

目的了解高效抗反转录病毒联合疗法(highly active antiretroviral the rapy,HAART)早期AIDS患者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(regulatory Tcell,Treg)的变化规律,探讨抗病毒治疗过程中Treg细胞的作用。方法前瞻性分析21例接受HAART规律治疗的AIDS患者,收集患者服药前及服药第2、4、8、12周时的静脉血,采用流式细胞仪胞内染色技术检测CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的水平,分析Treg细胞在治疗过程中的变化规律,以及Treg细胞的变化与免疫活化间的相关性。结果 HAART治疗开始,Treg细胞计数呈逐渐上升的趋势,前4周呈现快速上升,而后上升速度减慢,Treg百分比变化也有相似的规律;CD8+CD38+表达水平随治疗时间延长而下降,未治疗时Treg细胞计数与免疫活化水平呈负相关,治疗后Treg细胞计数4周内的变化与12周CD8+CD38+水平呈负相关,即治疗开始后,前4周内Treg细胞增加越明显,治疗3个月时免疫活化水平下降越明显。结论抗病毒治疗过程中,活化CD8+淋巴细胞比例的下降与外周血中Treg细胞数的增加相关。Treg细胞数量恢复越早,活化CD8+淋巴细胞比例下降越明显。     

艾滋病合并结核分枝杆菌血症56例危险因素评估及特征分析

目的 评估艾滋病合并结核分枝杆菌血症的危险因素,并探究在临床上的具体表征。方法 整理2019年1月至2021年12月期间入院治疗的56例(男50例、女6例)艾滋病合并结核分枝杆菌血症患者资料,总结受试者临床表征,统计其实验室检查结果,分析不良预后影响因素。结果 受试者临床表征多为发热、消瘦和淋巴结肿大。正常出院组44例,预后不良组12例。预后不良组CD4⁺T淋巴细胞计数、血小板、血清白蛋白水平低于正常出院组。Logistic回归显示血清白蛋白<30g/L是预后不良的独立危险因素。结论 对于艾滋病合并结核分枝杆菌血症的患者出现发热、消瘦、淋巴结肿大等症状时,尤其是CD4⁺T淋巴细胞和血小板计数低下时,低蛋白血症是预后不良的独立危险因素。     

HIV-1B/C重组毒株gp160假病毒的构建及其活性检测

目的以CD4+T细胞DNA为模板,进行gp160扩增,构建艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)前病毒假病毒,通过中和试验验证其具有感染活性。方法选择高效抗反转录病毒治疗(HAART)成功的病人3例,分离外周血单核细胞(PBMC),纯化CD4+T细胞,提取DNA,以其为模板扩增gp160全长基因,并克隆到pcDNA3.1(+)表达载体上,酶切验证得到阳性克隆。将此阳性克隆和pNL4-3质粒共转染,获得HIV-1假病毒。用免疫兔血清验证假病毒的感染活性。结果成功地获得了1株假病毒。用免疫后的兔血清测定半数抑制浓度(IC50)的滴度约在1∶90~1∶270之间。病毒的加入量与细胞感染率之间存在良好的线性关系,说明该假病毒感染系统可以通过细胞感染率较好地反映出感染性病毒的含量。结论获得了具有感染活性的HIV-1B/C重组型假病毒。     

甘露糖结合凝集素与肝脏疾病

甘露糖结合凝集素作为人类天然免疫系统中重要的一线抗感染分子,在免疫系统清除"异物"中起重要作用,已经证实血清甘露糖结合凝集素的含量及其基因多态性与多种肝脏疾病相关,此文将分两部分对甘露糖结合凝集素及其与肝脏疾病的关系进行综述.     

重组人干扰素α-2b注射液雾化吸入治疗儿童手足口病的疗效观察

目的观察重组人干扰素α-2b注射液雾化吸入治疗儿童手足口病的临床疗效。方法选取2013年5—9月来首都医科大学附属北京佑安医院儿科就诊的患儿164例,随机分为治疗组(84例)和对照组(80例)。对照组给予对症基础治疗。治疗组在对照组基础上再加用重组人干扰素α-2b注射液300万单位,生理盐水2 mL稀释,空气压缩雾化吸入,体积流量4L/min,2次/d,观察期为7 d。3 d为1个疗程,观察3、6 d内两组体温、进食及疱疹改善情况。结果治疗组的效果明显优于对照组,治疗组的总有效率(98.8%)高于对照组(91.3%),差异具有统计学意义(P<0.05);同时治疗组3、6 d内体温和疱疹情况皆优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗组3、6 d进食情况差异无统计学意义。结论重组人干扰素α-2b注射液雾化吸入对于促进手足口病患儿体温恢复及疱疹愈合方面的临床疗效满意,且安全性好,值得临床进一步研究推广。     

63例艾滋病合并隐球菌脑膜炎患者临床特点分析

目的?分析AIDS合并隐球菌脑膜炎（cryptococcal meningitis, CM）患者的临床特点。方法?采用横断面研究,收集首都医科大学附属北京佑安医院于2019年1月—2022年1月确诊并治疗的AIDS合并CM患者的临床特点、实验室检查结果及预后资料。结果?共纳入63例AIDS合并CM的病例。患者平均年龄（37.22±10.95）岁,CD4+ T淋巴细胞计数中位数为22个/μl。总病死率为15.9%（10/63）。63例患者中,死亡（死亡组）10例,中位生存时间5 d,正常出院（正常出院组）53例。分析结果显示死亡组的低CD4+ T淋巴细胞计数、合并隐球菌菌血症、颅内高压、白细胞计数升高及血小板计数降低发生率高于正常出院组（P均＜0.05）。死亡组临床表现包括脑膜刺激征、颅神经受累、意识障碍的发生率高于正常出院组（P均＜0.05）。结论?AIDS合并CM患者病死率较高,应针对高危人群加强宣教及隐球菌筛查,保持良好依从性,及时发现耐药,避免自行停药,便于早期诊断,早期干预。     

重组人干扰素α-2b注射液雾化吸入治疗儿童手足口病的疗效观察

目的观察重组人干扰素α-2b注射液雾化吸入治疗儿童手足口病的临床疗效。方法选取2013年5—9月来首都医科大学附属北京佑安医院儿科就诊的患儿164例,随机分为治疗组（84例）和对照组（80例）。对照组给予对症基础治疗。治疗组在对照组基础上再加用重组人干扰素α-2b注射液300万单位,生理盐水2mL稀释,空气压缩雾化吸入,体积流量4L／min,2次／d,观察期为7d。3d为1个疗程,观察3、6d内两组体温、进食及疱疹改善情况。结果治疗组的效果明显优于对照组,治疗组的总有效率（98．8％）高于对照组（91．3％）,差异具有统计学意义（P〈0．05）;同时治疗组3、6d内体温和疱疹情况皆优于对照组,差异具有统计学意义（P〈0．05）;治疗组3、6d进食情况差异无统计学意义。结论重组人干扰素α-2b注射液雾化吸入对于促进手足口病患儿体温恢复及疱疹愈合方面的临床疗效满意,且安全性好,值得临床进一步研究推广。‘