Elafibranor对原代增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

目的探讨elafibranor对原代增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar fibroblast,HSFB)增殖的抑制作用及可能机制。方法取瘢痕切除术患者新鲜瘢痕组织标本,提取HSFB细胞培养至对数生长期,采用MTT实验检测0、5、10、15、20、30、40μmol/L elafibranor处理48h时细胞增殖率,筛选适宜elafibranor浓度进行后续实验。对数生长期HSFB细胞分为空白组、低浓度组、高浓度组,分别用0、5、15μmol/L elafibranor处理,采用MTT实验检测处理24、48、72、96、120h时细胞增殖率。处理48h时采用流式细胞术检测细胞周期,化学显色法检测氧化应激指标丙二醛(malondialdehyde,MDA)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)水平。结果随elafibranor浓度增加,HSFB细胞增殖率逐渐降低,其中15μmol/L最接近半数抑制浓度,选择5、15μmol/L进行后续实验。处理24、48、72、96、120h时高浓度组、低浓度组细胞增殖率均低于空白组(P<0.05),高浓度组均低于低浓度组(P<0.05);3组细胞增殖率均随时间延长而增高(P<0.05)。处理48h时高浓度组、低浓度组细胞G₀/G₁期比率[(66.4±0.3)%、(65.2±1.4)%]、MDA水平[(213.7±18.3)%、(126.3±10.2)%]均高于空白组[(61.2±0.4)%、(100.0±3.6)%](P<0.05),G₂期比率[(20.1±0.2)%、(21.3±0.7)%]及CAT[(58.6±8.6)%、(74.9±10.9)%]、GSH-Px[(47.6±8.8)%、(70.9±6.9)%]、T-SOD[(76.7±6.0)%、(92.4±2.6)%]水平均低于空白组[(24.5±0.4)%、(100.0±14.2)%、(100.0±5.5)%、(100.0±1.9)%](P<0.05);高浓度组细胞G₂期比率及CAT、GSH-Px、T-SOD水平均低于低浓度组(P<0.05),MDA水平高于低浓度组(P<0.05),G₀/G₁期比率与低浓度组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论Elafibranor可有效抑制HSFB细胞增殖,诱导细胞周期阻滞于G₀/G₁期,且呈剂量依赖性,作用机制可能与促进细胞内氧化应激有关。