一株携带三种β内酰胺酶基因铜绿假单胞菌的发现

近年来铜绿假单胞菌（Pa）耐药率不断增加，已经出现对三代头孢菌素和亚胺培南耐受的Pa菌，给临床治疗带来极大困难。我们从一例脑外伤合并严重肺部感染患者的气管分泌物中分离出1株多重耐药忍菌，并对其进行了12种β内酰胺类耐药相关基因的检测与分析。     

新生鼠脑损伤后松果体细胞的一氧化氮合酶与细胞凋亡关系的初步研究

为了探讨新生鼠发生缺氧缺血性脑损伤时松果体细胞的诱生型一氧化氮合酶 ( i NOS)表达与松果体细胞凋亡及形态学改变的关系 ,用 7日龄新生 Wistar大鼠 ,结扎左侧颈总动脉 ,术后 2 h吸入 8%浓度氧 2 h,建立新生儿缺氧缺血性脑病模型( HIBD)。分别于建模后 0 h、2 4h、48h处死动物 ,剥取松果体 ,观察松果体细胞的 i NOS表达及细胞凋亡 ,电镜观察松果体形态学改变。结果表明 :( 1)新生鼠脑损伤后松果体的 i NOS在 0 h、2 4h含量与对照组相比明显升高 ;( 2 )脑损伤后松果体凋亡细胞早期明显增多 ,尤以 0 h、2 4h为主 ;( 3)电镜观察 :脑损伤后松果体的形态学也以 0 h、2 4h改变为明显 ,出现线粒体明显肿胀、粗面内质网极度扩张、细胞变性。提示 :( 1)新生鼠缺氧缺血性脑损伤后 0 h、2 4h松果体细胞的 i NOS表达增加 ,以后逐渐下降 ,48h表达减少。 ( 2 ) TUNEL法原位检测细胞凋亡与 i NOS表达同步改变 ,i NOS表达对细胞凋亡有促进作用。 ( 3) i NOS表达和细胞凋亡参与了新生鼠缺氧缺血性脑损伤后松果体细胞形态学改变     

重症新生儿肺透明膜病临床病理分析

新生儿肺透明膜病临床上称新生儿呼吸窘迫综合征,是引起新生儿早期死亡的重要原因之一。临床上多见于早产儿,宫内窘迫,糖尿病孕妇的婴儿[1]。本文收集19例重症新生儿肺透明膜病临床病理资料,报告如下:l临床资料1.1一般资料本组男性13例,女性6例。早产儿14例,足月产儿5例.其中1例患儿母亲为糖尿病患者。顺产16例,剖宫产3例.出生时Apgar评分＞8分14例,5－8分4例．起病时间1～6小时不等.其中1例小于1小时12临床表ZQ。临床主要症状为进行性呼吸困难伴81。111、呼吸了规则．19例后期均有呼吸暂停、面色青紫体温不升H例,三凹征阳性14例,…     

血浆脑钠素和心钠素在心力衰竭中的诊断价值及评价

目的 探讨血浆脑钠素（BNP）、心钠素（ANP）浓度变化对心力衰竭的诊断价值。方法 分别采用酶联免疫法和放射免疫法检测75例心力衰竭患者（NYHAⅡ～Ⅳ级）（研究组）和25例健康对照组（对照组）的血浆BNP和ANP浓度，同时采用纽约心脏学会（NYHA）标准对心功能分级和超声心电图检查评定患者心功能。结果 ①研究组血浆BNP和ANP浓度显著高于对照组（P〈0．01）。②研究组心功能Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级患者血浆BNP浓度两两之间差异显著（P〈0．05）。心功能Ⅱ级患者血浆ANP和Ⅲ级、Ⅳ级患者之间差异显著（P〈0．05），在Ⅲ级和Ⅳ级之间无显著差异（P〉0．05）。③BNP在ROC曲线下的面积为0．97，95％的可信区间为0．943～0．998；ANP在ROC曲线下的面积为0．85，95％的可性区间为0．825～0．951，两者曲线下面积有显著性差异（P〈0．01）。④左心室射血分数（LVEF）〉40％与LVEF〈40％的患者血浆BNP水平差异显著（P〈0．05）；而两组患者的ANP水平无显著差异（P〉0．05）。结论 血浆BNP比ANP对心力衰竭患者的诊断具有更高的准确性，BNP与超声心电图反映的血液动力学状况指标LVEF及NYHA分级具有较好的相关性，可以作为心力衰竭分级的一个良好的诊断指标。     

阴沟肠杆菌质粒型AmpC酶基因的研究

目的调查阴沟肠杆菌质粒型AmpC酶基因的流行状况及基因型。方法采用ATB药敏试验板微量肉汤法,对44株临床分离的阴沟肠杆菌进行抗菌药物敏感试验,PCR方法检测DHA和ACT型AmpC酶基因。结果44株阴沟肠杆菌呈多重耐药;36株质粒AmpC酶基因阳性(81.8%),DHA和ACT-1基因阳性率分别为11.4%、79.5%,而且3株阴沟肠杆菌同时携带DHA和ACT-1基因。结论临床分离的阴沟肠杆菌多重耐药严重、质粒AmpC酶基因携带率高;阴沟肠杆菌中检出ACT-1基因为国内首次报道。     

Toll样受体4活化增强乳腺癌细胞株MCF-7侵袭力的研究

目的:研究Toll样受体4(TLR4)在人类乳腺癌MCF-7细胞株中的表达及在肿瘤增殖和转移中的作用?方法:脂多糖(LPS) 刺激MCF-7细胞株,RT-PCR?Real-time PCR?FCS 和 Western blotting 检测TLR4在mRNA和蛋白水平表达变化;MTT检测细胞增殖;RT-PCR 和 real-time PCR检测基质金属蛋白酶(MMP-2)?MMP-9 和血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA表达并用ELISA检测培养上清中其蛋白表达水平;Western blot检测TLR4信号传导通路下游蛋白MyD88的表达;CBA测定细胞培养上清的炎性细胞因子;划痕实验检测癌细胞的生物学侵袭力?结果:实验表明,LPS刺激MCF-7细胞株能明显上调TLR4 mRNA和蛋白表达(P < 0.05)?MTT结果显示,LPS对癌细胞增殖没有影响?LPS激活TLR4后,MMP-2?MMP-9和VEGF在mRNA和蛋白水平的表达均明显上调 (P < 0.05)?划痕实验表明,LPS能显著增强MCF-7细胞株的划痕愈合能力?此外,LPS能诱导TLR4信号通路下游MyD88蛋白表达的显著上调(P < 0.05),IL-6的分泌增多(P < 0.05)?结论:LPS能明显增强MCF-7细胞株TLR4的表达,增强癌细胞的侵袭力?     

新生儿葡萄球菌败血症病原菌分布及耐药性分析

目的:探讨新生儿葡萄球菌败血症病原菌分布及耐药性特点,指导临床用药。方法:利用法国生物梅里埃微生物鉴定系统及试剂,对2001年1月至2002年6月收住我院新生儿科临床诊断败血症的患儿,血培养分离出的118株葡萄球菌作细菌鉴定及药敏试验。结果:葡萄球菌占新生儿败血症病原菌的76.1％,金黄色葡萄球菌感染占首位(34.2％);耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)占50.8％,MRS的耐药性明显高于MSS,表现为多重耐药,对万古霉素完全敏感。结论:葡萄球菌为新生儿败血症主要致病菌;应根据细菌鉴定及药敏试验选择敏感药物治疗,并检测MRS。     

3种设门方法在多发性骨髓瘤免疫表型分析中的应用比较

目的探讨CD45/SSC、CD38/SSC及CD45/CD38 3种设门方法在多发性骨髓瘤(MM)免疫表型分析中的应用价值,并分析不同免疫表型与反映MM疾病进展的实验室指标的相关性。方法采用CD45/SSC、CD38/SSC、CD45/CD38 3种设门方法的多色流式细胞术,对20例初诊MM患者浆细胞表面CD138、CD56、CD117、CD13、CD19等的表达情况进行检测,比较不同检测方法间的差异。另仅使用CD38/SSC设门术,对44例初诊MM患者及12例对照组患者浆细胞进行免疫表型检测,分析浆细胞表面各CD抗原表达与反映MM疾病进展指标血红蛋白(Hb)、清蛋白(Alb)、肌酐(Cr)、β2-微球蛋白(β2-MG)、C-反应蛋白(CRP)及乳酸脱氢酶(LDH)的相关性。结果 CD38/SSC、CD38/CD45设门组CD56、CD138表达率均明显高于CD45/SSC组(P0.05),CD38/SSC与CD38/CD45设门间各CD抗原表达率差异无统计学意义(P0.05)。CD138阳性率在CD45/SSC设门组明显低于CD38/SSC及CD45/CD38组(P0.05),余各组间CD抗原阳性率差异无统计学意义(P0.05)。使用CD38/SSC设门术时,MM组与对照组CD56阳性率(70.5%和8.3%)及CD19阳性率(13.6%和100%)间差异有统计学意义(P均0.01)。MM浆细胞典型免疫表型为CD38++CD138+CD56+CD19-,而正常浆细胞为CD38++CD138+CD56-CD19+。CD56+MM患者清蛋白降低的发生率明显高于CD56-MM患者(71.0%vs 38.5%,P0.05),CD13+MM患者比CD13-患者更易出现LDH异常增高(50.0%vs 13.9%,P0.05)。Spearman相关性分析显示,MM患者CD56表达率与Cr水平呈负相关(r=-0.353,P0.05),CD13表达率与LDH水平呈正相关(r=0.359,P0.05),其他CD抗原表达与Hb、Alb、Cr、β2-MG、CRP及LDH水平无明显相关性(P0.05)。结论流式细胞术中采用不同设门方法圈定浆细胞的有效性不同,CD38/SSC及CD45/CD38设门明显优于CD45/SSC设门,常规临床检测可使用CD38/SSC设门技术。MM具有独特的免疫表型特征,选用恰当方法进行免疫表型分析对MM的辅助诊断及预后判断有重要价值。     

3-甲基腺嘌呤改善四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化及其肠道菌群

目的探讨肠道菌群在3-甲基腺嘌呤(3-MA)改善四氯化碳(CCl_4)介导小鼠肝纤维化过程中的作用。方法 15只小鼠随机分为正常对照组、肝纤维化组和3-MA处理组;用CCl_4构建肝纤维化模型,3-MA处理组第3周开始额外给予3-MA。8周后处死小鼠并取其血液、肝组织及肠道内容物,分析血清ALT、AST和GGT水平、肝组织病理及肠道菌群情况。结果 3-MA处理组血清ALT和AST明显低于肝纤维化组[(68.6±4.2) U/L vs (111.0±7.8) U/L,(179.0±12.9) U/L vs (253.2±26.7) U/L,P0.01],且肝组织病变程度减轻。PCoA及NMDS分析将3组小鼠肠道菌群区分。与正常对照组比较,肝纤维化组肠道群落Alpha多样性降低,毛螺菌科丰度显著下降,放线菌门、脱硫弧菌等肠道菌丰度显著升高(P0.05)。与肝纤维化组比较,3-MA处理组肠道群落Alpha多样性增高,毛螺菌科、Blautia菌丰度明显增高,双歧杆菌丰度减低;较正常对照组乳酸杆菌丰度明显增高(P0.05)。结论 3-MA改善了CCl_4介导的小鼠肝纤维化,而肠道菌群可能在此过程中起着积极作用。     

铜绿假单胞菌氯已定—磺胺耐药基因型研究

目的探讨临床分离的铜绿假单胞菌耐药性和氯已定—磺胺耐药基因存在状况。方法测定临床分离的66株铜绿假单胞菌对6种抗菌药物的敏感性,采用PCR检测qacE△1-sulⅠ基因。结果66株PA菌对6种抗菌药物的不敏感率在12.5%~87.5%之间。qacE△1-sulⅠ基因阳性菌33株(阳性率50.0%)。结论铜绿假单胞菌具明显的多重耐药特征。qacE△1-sulⅠ基因携带率很高。