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目的探讨CD137-CD137L信号(简称CD137信号)是否通过调控巨噬细胞M1/M2极性转变促进血管新生。方法将3%巯基乙酸盐肉汤诱导的小鼠腹腔原代巨噬细胞分3组,即对照组、CD137信号激动组和CD137信号抑制组,通过检测M1和M2型巨噬细胞的相关特异性标志物观察巨噬细胞表型的变化,采用流式细胞术(FCM)检测巨噬细胞表面CD137、CD86及CD206的表达,Western blot和RT-PCR检测巨噬细胞诱导性一氧化氮合酶(iNOS)、Ⅰ型精氨酸酶(Arg-1)的蛋白和mRNA表达。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测巨噬细胞培养上清中白细胞介素(IL)-12和IL-10分泌水平。将巨噬细胞和内皮细胞(bEnd.3)共培养,上室种植巨噬细胞,下室基质胶种植内皮细胞,实验分为3组,即对照组、CD137信号激动组和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)抑制组,检测各组内皮细胞的管腔形成能力。结果 (1)分离的小鼠腹腔原代巨噬细胞纯度为(97.93±1.31)%,巨噬细胞表面CD137表达为(97.40±2.70)%。(2)与对照组比较,CD137信号激动组Arg-1 ... 相似文献
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目的探讨CD137-CD137配体(CD137L)信号是否通过调控巨噬细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达影响血管平滑肌细胞(VSMC)钙化形成。方法采用巯基乙酸盐腹腔灌洗法获取C57BL/6J小鼠腹腔巨噬细胞(PM),采用组织块贴壁法取3~6代胸主动脉VSMC分为对照组、共培养组、CD137激动组和MMP-9抑制组(n=3)。对照组用重组CD137L蛋白干预VSMC,共培养组用PM和VSMC共培养,CD137激动组和MMP-9抑制组分别用重组CD137L蛋白和MMP-9抑制剂干预PM后,与VSMC共培养,再加入重组CD137蛋白(10μg/ml)干预。采用Western blot检测各组钙化相关的骨桥蛋白(OPN)、Runt相关转录因子2(Runx-2)表达,微板法检测钙离子浓度和碱性磷酸酶(ALP)活性,Von Kossa和茜素红染色检测各组细胞钙化程度。结果CD137激动组VSMC中OPN和Runx-2蛋白表达、钙离子浓度及ALP活性明显高于共培养组(P<0.01),而MMP-9抑制组VSMC中OPN和Runx-2蛋白表达、钙离子浓度及ALP活性明显低于CD137激动组,差异有统计学意义[0.25±0.27 vs 2.12±0.34,0.30±0.32 vs 2.63±0.41,(1.92±0.09)mmol/g vs(4.99±0.37)mmol/g,(1.11±0.50)KU/g vs(2.63±0.04)KU/g,P<0.01]。共培养组VSMC中OPN和Runx-2蛋白表达、钙离子浓度及ALP活性与对照组比较,无统计学意义(P>0.05)。CD137激动组茜素红染色红色颗粒物质沉积和Von Kossa染色黑色颗粒物质沉积明显多于对照组和共培养组;MMP-9抑制组钙化程度显著降低;对照组和共培养组钙化程度则无明显差异。结论CD137-CD137L信号可能通过调控巨噬细胞MMP-9表达影响VSMC钙化形成。 相似文献
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目的 探讨OX40-OX40L相互作用对C57BL/6J小鼠活性氧(ROS)水平及亲环素A(CyPA)表达的影响。 方法 采用C57BL/6J小鼠颈动脉硅胶圈置入法快速建立动脉粥样硬化斑块模型,免疫组织化学法检测颈动脉粥样硬化(As)斑块内CyPA的表达;小鼠淋巴细胞表达CyPA采用Western Blot检测;采用流式细胞术检测CD4、OX40及细胞内ROS水平。 结果 C57BL/6J小鼠形成As斑块后,淋巴细胞表达OX40较非As小鼠明显增加,同时发现As小鼠淋巴细胞内ROS水平和CyPA表达水平显著增加;体外应用anti-OX40特异性刺激OX40-OX40L轴后,淋巴细胞表达OX40及ROS水平显著上调,anti-OX40L特异性阻断OX40-OX40L后,淋巴细胞OX40表达减少,细胞分泌ROS水平较刺激组降低(P<0.05);体外培养淋巴细胞6 h,刺激组分泌的CyPA水平明显高于抑制组(P<0.001)。 结论 OX40-OX40L相互作用能调控动脉粥样硬化小鼠活性氧水平及亲环素A表达。 相似文献
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目的探究血清Nε-羧甲基赖氨酸(CML)对1型糖尿病和2型糖尿病患者不同程度颈动脉钙化的影响。方法选取2016年1月至2017年6月在江苏大学附属医院就诊患者506例,其中1型糖尿病148例,2型糖尿病191例,无糖尿病者167例,所有患者均行彩色多普勒超声检测双侧颈动脉。将颈动脉钙化严重程度按照0~8分予以评估,以1~4分为低钙化组,5~8分为高钙化组。记录患者一般临床资料、体格检查结果、实验室检查结果,并通过酶联免疫吸附实验测量血清CML水平。进行多因素Logistic回归分析,以确定1型糖尿病、2型糖尿病患者不同程度颈动脉钙化的独立预测因子。随访复测CML并追踪主要不良心脑血管事件(MACCE);分析CML变化与MACCE的关系。结果在颈动脉高钙化组和低钙化组,糖尿病患者的CML、颈动脉内膜中膜厚度和低密度脂蛋白胆固醇水平均高于无糖尿病者(P<0.05),且2型糖尿病患者高于1型糖尿病患者(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,CML是1型糖尿病患者颈动脉钙化程度的独立预测因子(OR 2.025,95%CI 1.368~2.996,P<0.05),也是2型糖尿病患者颈动脉钙化程度的独立预测因子(OR 2.485,95%CI 1.481~4.171,P<0.05)。随访期CML水平明显升高与MACCE相关。结论CML是1型和2型糖尿病患者不同程度颈动脉钙化的独立预测因子,并在一定程度上预测糖尿病性心脑血管事件的发生。 相似文献
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目的探讨肠道菌群代谢物氧化三甲胺(TMAO)对糖尿病冠状动脉钙化的预测价值。方法选取行冠状动脉造影(CTA)的2型糖尿病患者为研究对象,根据Agatston钙化积分评分将其分为无钙化组、轻度钙化组、中度钙化组、重度钙化组。检测各组患者血清空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、TMAO水平。采用多元线性回归模型分析冠状动脉钙化的影响因素,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析TMAO对冠状动脉钙化的预测价值。结果各组患者糖尿病病程、LDL、TMAO水平比较,差异有显著性(P<0.05)。糖尿病病程、LDL、TMAO是冠状动脉钙化的影响因素;糖尿病患者冠状动脉钙化程度与血清TMAO浓度呈正相关(P<0.05);ROC曲线下面积为0.80。结论糖尿病患者血清TMAO与冠状动脉钙化程度有关,可作为预测冠状动脉钙化的指标。 相似文献
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目的探讨CXC趋化因子配体14(CXCL14)对高糖暴露环境中脂肪细胞焦亡的影响。方法利用“鸡尾酒法”诱导3T3-L1细胞分化为成熟脂肪细胞,用5.5 mmol/L低糖(NG)或25 mmol/L高糖(HG)葡萄糖培养基培养脂肪细胞24 h;HG环境下用不同浓度CXCL14处理3T3-L1细胞不同时间。Western blot检测消化道皮肤素(GSDMD)、核苷酸结合寡聚化结构样受体蛋白3(NLRP3)、天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)蛋白、白细胞介素-6(IL-6)蛋白表达水平。实时荧光定量PCR检测GSDMD、NLRP3、白细胞介素-1β(IL-1β) mRNA转录水平。LDH测定试剂盒检测脂肪细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活力;Annexin V-FITC荧光检测细胞死亡情况;CCK-8法检测各组细胞增殖活力。结果高糖环境下脂肪细胞焦亡发生率升高,CXCL14处理可提高脂肪细胞增殖活力,但脂肪细胞焦亡相关指标却受到CXCL14浓度梯度的不同影响。50 nmol/L CXCL14处理可降低高糖环境下脂肪细胞GSDMD、NLRP3、IL-1β mRNA以及NLRP3蛋白的表达,下调脂肪细胞LDH活力,减少Annexin V-FITC荧光染色细胞死亡率,但25、100、200 nmol/L CXCL14对其焦亡的指标却呈反向趋势。并且50 nmol/L CXCL14干预后脂肪细胞NLRP3、Caspase-1蛋白随干预时间的延长呈先下降再上升趋势。结论CXCL14对高糖环境中脂肪细胞焦亡的影响与其浓度存在相关性。 相似文献
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临床医学研究生教育是关乎医学后备人才培养的百年大计,努力提高其科研能力与临床应用能力可有力推动中国医疗卫生事业的健康发展。在临床医学各亚类学科中以心血管疾病对中国国民健康造成的影响最大。故在本文中笔者结合心内科科学学位研究生培养中出现的一些问题,进行深入分析并提出自己的一些意见,希冀推动专科教育持续前行。 相似文献
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目的探究分拣蛋白(Sortilin)在糖尿病血管钙化中的作用机制。方法选取2015年6月至2017年6月在江苏大学附属医院骨科因糖尿病足截肢治疗的患者30例,根据钙定量检测胫前动脉钙化情况并分为对照组(钙定量2μmol/mg,n=15)和钙化组(钙定量≥2μmol/mg,n=15)。Western blot测定两组Sortilin水平,并对患者血清学及临床指标进行相关分析。基于人主动脉平滑肌细胞株(HA-VSMC)构建糖尿病血管钙化体外模型,利用茜素红染色检测钙化程度,Western blot检测该模型中Sortilin表达水平。而后用Sortilin及Sortilin中和性抗体处理该钙化模型,用钙盐染色和钙结节长径测定的方法显示Sortilin对于钙化模型的影响。结果钙化组胫前动脉钙化是对照组的4.9倍,同时Sortilin表达量也增加3.92倍。用含有羧甲基赖氨酸(CML)和氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)的钙化培养液处理HA-VSMC后,钙化明显增加。在Sortilin重组蛋白刺激下,HA-VSMC钙化程度进一步加重,钙结节长径明显增加,同时组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)表达水平也显著提高。结论 Sortilin促进糖尿病血管钙化,并使其向大钙化发展。 相似文献
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<正>动脉粥样硬化是心脑血管系统常见病的重要病理基础,严重危害人类的健康和生命。大量研究已经证实,氧化型胆固醇是动脉粥样硬化重要危险因素氧化低密度脂蛋白的关键活性成分,包括羟胆固醇、酮胆固醇和环氧胆固醇三大类,在诱导血管壁细胞凋亡进而发动脉荆样硬化不稳定性斑 相似文献