一个鳃-耳-肾综合征家系的EYA1基因新致病性变异及诊断探讨北大核心CSCD

通过家系调查、临床检查和遗传学特征分析,对一个鳃-耳-肾综合征家系的临床表型及致病原因进行系统研究。该家系表现为常染色体显性遗传,4位先证者均表现为听力损失、鳃裂瘘管、耳前瘘管、肾异常中的两种及以上的混合症状,症状轻重不等。遗传性耳聋基因芯片检测未发现常见的耳聋基因突变,sanger法基因检测结果显示4位先证者的EYA1基因c.889C>T(p.R297X)突变,为无义突变且均为杂合变异,根据美国医学遗传学与基因组学学会(American College of Medical Genetics and Genomics,ACMG)指南初步判定为致病性变异,现结合文献报道如下。     

靶向下调Cav3.1诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡

目的 探讨Cav3.1在喉鳞癌组织和细胞中的表达以及靶向下调Cav3.1在喉鳞癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 应用免疫组织化学、RT-PCR和Western blot方法检测30例喉癌患者中Cav3.1在喉癌组织、正常切缘黏膜组织中的表达情况;siRNA瞬转技术构建靶向下调Cav3.1的Hep-2细胞系,应用Western blot检测各组细胞BAX、Cleaved-caspase-3、BCL-2的表达情况,应用CCK-8实验检测该喉癌细胞增殖的情况,Annexin V-PI染色技术检测喉癌Hep-2细胞凋亡的情况.结果 相对癌旁组织,Cav3.1在喉癌组织中高表达(P＜0.05);下调组Cav3.1在喉癌细胞中mRNA和蛋白的表达水平明显降低(P＜0.05);下调Cav3.1可抑制喉癌细胞的增殖(P＜0.05),促进喉癌细胞的凋亡(P＜0.05),Western blot验证下调Cav3.1,BAX、Cleaved-caspase-3蛋白表达显著升高,BCL-2表达明显下降(P＜0.05).结论 Cav3.1在喉癌组织和喉癌细胞系中高表达,下调Cav3.1抑制喉癌细胞的增殖,促进喉癌细胞凋亡.     

氯化锂通过JNK信号通路诱导HEI-OC1毛细胞样细胞的凋亡

目的 探讨氯化锂对HEI-OC1毛细胞样细胞的毒性作用及可能作用机制.方法 首先采用CCK-8试剂盒检测0、25、50、75、100、125、150 mM氯化锂浓度处理12、24、48、72小时对HEI-OC1毛细胞样细胞的抑制作用,计算出IC50的浓度值.然后将对数生长期的HEI-OC1毛细胞样细胞分为对照组(不进行...     

一个非综合征型聋家系MITF基因致病性新突变

目的 研究一个非综合征型聋家系的致病基因突变.方法 通过家系调查、临床检查和遗传学特征分析,对一个非综合征型聋家系的临床表型及致病原因进行分析,提取家系成员的外周血DNA,应用遗传性耳聋基因芯片结合耳聋基因靶向测序筛选致病基因,然后利用Sanger测序对发现的致病基因位点进行验证,分析该突变位点在各物种中的保守性及该突...     

一个鳃-耳-肾综合征家系EY A1基因新致病性变异

目的 研究一个鳃-耳-肾综合征(branchio-oto-renal,BOR)家系的临床表型及遗传学特征.方法 通过家系调查、临床检查和遗传学特征分析,对一个鳃-耳-肾综合征家系的临床表型及致病原因进行系统研究,提取家系成员的外周血DNA,采用遗传性耳聋基因芯片进行最常见的GJB2(135 del G、176 del ...     

质膜钙ATP酶异构体1～4的剪接体在新生大鼠前庭器官的表达

目的：研究质膜钙 ATP 酶异构体（plasma membrane Ca2＋－ATPase isoforms,PMCAs）1～4（PM-CA1～4）的 A 端和 C 端剪接变异体在新生大鼠前庭器官的表达。方法取出生2天的健康 SD 大鼠10只,断头后分离出前庭器官（椭圆囊斑和球囊斑）,提取总 RNA,通过逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）方法,检测 PMCA1～4的 A 端和 C 端剪接变异体的表达。结果在新生大鼠的椭圆囊斑和球囊斑 PMCA1～4表达的剪接体分别为PMCA1x／b,PMCA2w／（a、b）,PMCA3z／（a、b、c）和 PMCA4（x、z）／b。结论在新生大鼠前庭器官,PMCA1、PM-CA2、PMCA3和 PMCA4之间表达的 A 端和 C 端剪接变异体类型均不同,这可能是由于椭圆囊斑和球囊斑对这些 PMCA 亚型有着不同的 Ca2＋调节需求。     

一个听神经病家系的AIFM1基因致病性新突变

目的 探讨一个听神经病(AN)家系的致病基因突变和可能分子机制。方法 收集2020年10月中国科学技术大学附属第一医院耳鼻咽喉头颈外科收治的1个三代12人的AN家系,采集其病史,绘制系谱图,行听力学、影像学及体格检查;利用高通量测序筛选致病基因;采用Sanger测序对致病基因位点进行变异确认及家系共分离验证;通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)对致病基因进行验证。结果 该家系中的父亲(Ⅰ:1)及两个女儿(Ⅱ:4,Ⅱ:5)为耳聋患者,表现为言语识别率差,与纯音听阈不符,听力学检查符合AN特殊表现;高通量测序结果显示致病基因为AIFM1:C.250-4G>A位点剪接突变;Sanger测序结果显示致病基因突变位点与该家系的AN表型完全符合共分离;qRT-PCR结果显示患者AIFM1 mRNA表达显著上调;该家系的遗传方式可能为X-连锁显性遗传。结论 本研究检测出听神经病AIFM1基因新的剪接突变,其遗传模式可能为X-连锁显性遗传。     

高迁移蛋白A1与埃兹蛋白在喉癌组织中的表达及相关性研究

目的 探讨高迁移蛋白A1（HMGA1）与埃兹蛋白（Ezrin）在喉癌组织中的表达及关系。方法 采用免疫组织化学染色方法检测HMGA1、Ezrin蛋白在50例喉癌组织、30例喉不典型增生组织、30例喉息肉中的表达;采用实时定量PCR法检测HMGA1、Ezrin mRNA在30例喉癌组织及30例癌切缘组织的表达,统计分析二者表达与临床病理特征的相关性。结果 HMGA1和Ezrin蛋白、mRNA在喉癌组织中的阳性表达率均高于对照组(P<0. 05), HMGA1和Ezrin蛋白、mRNA表达与喉癌组织的临床分期(P<0.05)、组织学分级(P<0.05)及转移(P<0.05)相关,而与患者年龄、性别、吸烟差异无统计学意义(P>0.05)。喉癌组织中HMGA1及Ezrin蛋白、mRNA水平表达正相关(实时定量PCR,r=0.385,P=0.000;免疫组化,χ2=7.172,r=0.379,P=0.012)。结论 HMGA1与Ezrin在喉癌的侵袭、转移过程中发挥调控作用,可为喉癌的早期诊断和治疗提供新的分子指标。