热力学平衡对加速稳定性的影响

目的 体外诊断试剂的稳定性作为试剂体系的重要技术指标之一,在体外诊断试剂的质量和使用安全中具有重要的指导意义,本文主要以磁微粒β2-MG检测试剂盒为例,为解决磁微粒化学发光试剂稳定性提供一种新思路。方法 通过对化学试剂进行热平衡处理,研究热平衡对稳定性的影响,以2～8℃校准品的发光值（RLU）为对照,测定经处理的试剂放置37℃10 d后的发光值的下降率（ROD）来观察稳定性的改善,并对其进行统计学分析。结果 通过热平衡酶结合物的方式可显著提高磁微粒β2-MG试剂盒热加速稳定性。结论 在不改变配方的条件下仅通过热平衡方式可以显著提高试剂热稳定性,为体外诊断试剂同行提供一种新思路。     

老年人睡眠紊乱可能与激素有关

一项研究成果显示,老年人常见的睡眠紊乱可能与老年人血液中的激素水平有关。研究人员比较了来自年轻和年老供体皮肤细胞的生理周期。他们发现,这些细胞在牛血清中生长时生物钟没有差异,而在来自老年人的人类血清中生长时,这些细胞的生物钟出现紊乱。     

回顾分析胃转流术治疗2型糖尿病的近期效果

目的研究对80例2性糖尿病采用胃转流手术后的近期效果。方法选取80例于2009年3月—2012年3月在该院被确诊的2型糖尿病患者,对所有研究患者行胃转流手术,对手术前后患者的各项指标进行观察。结果经胃转流手术后,所有患者的2h PG、Hb Alc、FBG值均达到正常水平,相比于手术前数值明显减少(P0.05),具有统计意义。结论采用讨胃转流术在治疗2型糖尿病中的应用价值较高,近期效果较好,值得与临床推广。     

CA50靶向抗体文库的构建筛选及应用评价

目的 获得针对CA50靶点的高亲和力、高特异性抗体,建立体外诊断CA50检测试剂盒,提高肿瘤诊断的特异性和灵敏度。 方法 PCR 技术获得单链抗体( ScFv)基因并克隆入pcomb3XSS噬粒载体,通过电转化获得ScFv噬菌体抗体库。用CA50特性识别表位LST a(唾液酸化-乳糖-N-四糖a)的抗原淘洗筛选,获得针对CA50靶点的特异性抗体基因序列。随机挑选克隆测序,验证ScFv抗体库的多样性。利用重叠PCR技术获得人鼠嵌合抗体基因,经过抗体表达纯化及配对筛选建立双抗体夹心法CA50检测试剂盒。同时收集临床诊断阳性样本54例和临床阴性对照样本146例,利用该研究建立的CA50检测试剂盒与罗氏CA50试剂盒进行平行对照,评价其检测相关性。 结果 建立噬菌体抗体库的容量为2.5×10⁸,具有较好的多样性。24个PCR鉴定阳性克隆测序,结果为20个正确插入且插入序列均不相同。经过3轮淘洗筛选出5个阳性克隆,经过抗体配对筛选建立的CA50试剂盒临床样本检测结果与罗氏的临床相关性(r=0.98)。 结论 通过噬菌体展示抗体库技术成功筛选出了针对CA50的高特异性、高亲和力抗体,为CA50检测在相关肿瘤辅助诊断中的应用提供可能性。     

基于三种检测方法的17α羟孕酮临床检测比对

目的 评价具有不同检测原理的3个17α羟孕酮试剂盒,分析其临床检测结果的相关性和一致性. 方法 收集2015年2月至10月临床确诊为先天性肾上腺皮质增生症患者的血清120例,设为试验组;收集同期体检健康者血清120例,设为对照组.分别采用3个产品的17α羟孕酮试剂盒进行定量检测,对检测结果进行统计分析. 结果 3个产品的相关性R2分别为0.82、0.76和0.77,临床的阳性符合率为100％、100％和99.2％,阴性符合率为97.5％、98.3％和98.3％,总符合率为98.8％、99.2％和98.8％.3个产品的临床符合率差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 不同检测原理的3个产品的17α羟孕酮试剂盒的临床检测结果具有等效性,符合临床应用要求.     

聚乙二醇在无蛋白酶稀释液中的应用

目的 酶稀释液是磁微粒化学发光试剂的关键组成成分之一,对酶标抗体或抗原的灵敏度、准确度和稳定性有显著影响。牛血清白蛋白(BSA)是酶稀释液中常用的保护蛋白,但由于它本身的性质和批间差等缺点不能完全满足试剂研发对性能的要求,因此对非BSA等天然蛋白替代品的寻找备受瞩目。方法 大量研究表明水溶性高分子聚合物聚乙二醇(PEG)是有效的抗非特异性吸附材料,在医疗、化妆、涂料等领域有广泛应用。在磁微粒化学发光平台,关于PEG酶稀释液无蛋白配方方面的应用很少被报道,因此本研究将酶稀释液中常用的BSA替换为了不同分子量的PEG,对多个项目的信噪比和稳定性进行了考核。结果 在信噪比方面,胰岛素样生长因子1(IGF-1)、糖类抗原72-4(CA72-4)、糖类抗原125(CA125)和促甲状腺激素(TSH)项目上不同分子量的PEG酶稀释液相对BSA酶稀释液都有很大提升,PEG1500在铁蛋白(Ferritin)项目中提升了信噪比,但戊型肝炎病毒抗体IgM(HEV-IgM)项目中无显著提升。Ferritin和HEV-IgM项目中PEG4000显著提升了信噪比,PEG6000无显著变化,PEG10000则显...     

自配清洗液在佳能TBA-FX8全自动生化分析仪上的应用分析

目的 研究自配酸、碱清洗液与佳能TBA-FX8全自动生化分析仪原装清洗液性能的一致性,为实验室临床使用自配酸、碱清洗液提供数据支持,降低实验室临床检测试剂使用成本。方法 通过自配清洗液和原装清洗液比对验证实验,比较自配清洗液和原装清洗液相关性、准确度、精密性等性能指标的一致性。结果 自配清洗液与原装清洗液检测结果差异无统计学意义(P>0.05),相关性良好(r>0.99),检测准确度高、精密性好,与原装清洗液性能一致。结论 自配酸、碱清洗液能替代原装进口试剂,应用于佳能系列全自动生化分析仪,降低试剂使用成本。     

两种厂家碱性磷酸酶性能评估

目的 通过测定灵敏度、信号值、临床相关性比较3种碱性磷酸酶（AP）标记抗-抗体工艺的优劣。方法 用同一种常用的蛋白质标记方法,将碱性磷酸酶和抗促甲状腺激素（TSH）的单抗进行偶联,进一步制成TSH的化学发光法定量测定试剂盒。结果 对用同种标记工艺获得的不同试剂的各项性能指标进行考察,结果厂家S的AP性能最好,信号值最高;而厂家C的两种AP性能较差。结论 从构建的磁微粒TSH检测试剂盒各项性能来看,厂家S的AP经过是本研究推荐的一种可用于化学发光免疫分析的标记物。     

荧光法研究免疫试验抗体包被过程

目的:以荧光法作为定量和示踪手段,研究免疫试验中抗体在固相载体上包被的行为及意义。方法:以异硫氰酸荧光素(FITC)标记后的抗体包被固相载体,构建化学发光免疫分析(CLIA)体系。通过荧光光度计精确测定包被前后包被液中游离抗体的浓度,定量抗体的包被量,并研究其包被量对免疫反应的影响。结果:抗体包被量与CLIA发光值非线性相关;间接法较直接吸附法包被更有利于保持抗体活性;热处理后化学发光系统发光值降低与包被抗体脱落有关。结论:荧光法为构建有效CLIA体系提供了一种研究方法。