尾叶香茶菜二萜类化合物B对人宫颈癌细胞的生长抑制作用及其机制

目的:观察尾叶香茶菜二萜类化合物B(DB)对人宫颈癌细胞株Hela细胞的生长抑制作用并探讨其机制。方法:处于对数生长期的Hela细胞分为正常对照组,0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、32.0mg.L-1DB实验组,MTT法观察不同剂量DB作用24和48h后Hela细胞增殖抑制率,相差显微镜观察DB作用后Hela细胞形态的改变,RT-PCR和Western blotting分别观察DB作用后Hela细胞P53、P21、CDK2mRNA和蛋白表达水平。结果:MTT检测,24h时2.0、4.0、8.0DB组Hela细胞增殖抑制率分别为18.18%、28.89%和32.84%,48h时2.0、4.0、8.0DB组Hela细胞增殖抑制率分别为26.64%、47.03%和51.90%,呈时间-剂量依赖性(P<0.05或P<0.01);形态学观察,DB作用后Hela细胞变圆、体积缩小,有部分细胞漂浮;2.0、4.0和8.0mg.L-1DB分别作用Hela细胞24和48h后,P53和P21mRNA和蛋白表达水平明显高于正常对照组(P<0.01),CDK2mRNA和蛋白表达水平明显低于正常对照组(P<0.01)。结论:DB可抑制Hela细胞生长,其机制可能与上调细胞周期相关基因p53、p21的表达,下调CDK2表达,从而影响细胞从G1期进入S期有关。     

细胞死亡调节因子GRIM-19蛋白在肾脏透明细胞癌组织中的表达及意义

目的：探讨细胞死亡调节因子（GRIM-19）蛋白在肾脏透明细胞癌组织和正常肾组织中的表达及意义,阐明GRIM-19在肾脏透明细胞癌发生发展中的抑癌作用。方法： 采用免疫组织化学染色方法检测21例肾脏透明细胞癌组织和7例正常肾组织GRIM-19蛋白的表达;RT-PCR方法检测4例正常肾组织和8例肾脏透明细胞癌组织中GRIM-19基因mRNA的表达。结果： 免疫组化检测GRIM-19蛋白在肾脏透明细胞癌组织中阳性表达率为52.3%（11/21）,在正常肾脏组织的阳性表达率为100%（7/7）,两者比较差异有显著性（P<0.05）。病理分级Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级的肾脏透明癌组织中的表达率分别为100%（6/6）、40%（4/10）和20%（1/5）,三种病理分级GRIM-19表达率比较差异有显著性（P<0.01）。RT-PCR检测GRIM-19基因在肾脏透明细胞癌组织中阳性表达率为62.5%（5/8）,在正常肾脏组织的阳性表达率为100%（4/4）,两者比较差异有显著性（P<0.01）。结论：GRIM-19在肾脏透明细胞癌基因和蛋白水平表达明显下降,并与其病理分级存在明显的关联性,提示GRIM-19蛋白可能在肾脏透明细胞癌发生发展中发挥抑癌作用。     

黄芪甲苷对阻塞性肺疾病大鼠caspase-12表达影响

目的 观察黄芪甲苷对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠内质网应激诱导的肺泡上皮细胞凋亡的保护作用。方法 将60只SD大鼠,随机分为对照组、模型组和黄芪甲苷低、中、高剂量组,每组12只;除对照组其余各组均采用气管内滴注脂多糖联合熏烟方法制备COPD大鼠模型,采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法(TUNEL)法测定各组大鼠肺组织中细胞凋亡情况,采用Western blot法检测各组大鼠肺组织中caspase-3、caspase-12的表达水平。结果 与对照组比较,模型组大鼠肺组织中细胞凋亡数量[(173.13±19.20)个/视野]明显升高;与模型组比较,黄芪甲苷高、中、低剂量组大鼠肺组织中细胞凋亡数量[分别为(149.23±8.95)、(118.77±9.47)、(78.87±9.59)个/视野]均减少(P<0.01);与对照组比较,模型组大鼠肺组织中caspase-3、caspase-12表达[分别为(0.847±0.103)、(0.706±0.042)]均升高;与模型组比较,黄芪甲苷高、中、低剂量组大鼠肺组织中caspase-3表达量[分别为(0.412±0.057)、(0.508±0.084)、(0.714±0.061)]与caspase-12表达量[分别为(0.341±0.052)、(0.393±0.065)、(0.516±0.087)]均降低(P<0.01)。结论 黄芪甲苷可减轻内质网应激介导的肺组织细胞凋亡,其机制可能与降低大鼠肺组织中凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-12表达有关。     

锌对前列腺癌细胞PC-3M凋亡的影响

目的:探讨锌对前列腺癌细胞PC-3M凋亡的影响。方法:分别选用不同浓度ZnSO₄•7H₂O（终浓度分别为6.25、15、25、50、100、150、200、250及300 μmol•L^-1）作用于PC-3M细胞24 h,用MTT法筛选对PC-3M细胞增殖抑制的有效浓度,利用吖啶橙/溴化乙锭染色、DNA ladder及流式细胞术检测PC-3M细胞凋亡情况。结果:MTT显示,锌的浓度在250 μmol•L^-1时, PC-3M细胞存活率显著低于对照组（P<0.01）。Zn²⁺浓度达250 μmol•L^-1时,相差显微镜下细胞形态变化明显,细胞变长,并伸出较长的突起,细胞分裂相明显减少,细胞数量较对照组明显减少。吖啶橙/溴化乙锭染色显示,对照组细胞形态为规则的圆形,细胞膜光滑无皱缩和发泡,呈现均匀的绿色,偶可见橙色细胞(自然凋亡细胞);Zn²⁺（250 μmol•L^-1）作用后,相差显微镜下可观察到较多早期凋亡细胞,细胞多为圆形,但细胞膜较对照组粗糙,细胞呈绿色,细胞核中有鲜绿色的斑点;也可观察到较多的晚期凋亡细胞,细胞形状不规则,细胞膜粗糙,有较多突起,被吖啶橙染成橙色,细胞中有鲜亮的橙色斑点。DNA ladder可见梯形条带出现;流式细胞术显示亚二倍体峰的出现,细胞凋亡率为13.3%。上述各项指标均显示PC-3M细胞的凋亡水平明显高于对照组（P<0.05）。结论：高Zn²⁺可以抑制前列腺癌细胞生长并诱导前列腺癌细胞凋亡。     

葡萄糖调节蛋白78和基质金属蛋白酶在口腔鳞状细胞癌中的表达

目的 探讨葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)和基质金属蛋白酶(MMPs)在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及意义,阐明GRP78在口腔鳞状细胞癌发生、发展中的作用.方法 采用免疫组织化学方法检测26例口腔鳞状细胞癌组织和10例正常口腔组织中GRP78蛋白的表达;采用逆转录PCR检测正常口腔组织和口腔鳞状细胞癌组织中GRP78 mRNA的表达;采用免疫组织化学方法检测26例口腔鳞状细胞癌组织中MMP-2和MMP-9蛋白的表达.结果 GRP78蛋白在口腔鳞状细胞癌组织中的阳性表达率为100％(26/26),在正常口腔组织中的阳性表达率为20％(2/10),两者比较差异有统计学意义(P＜0.01);与高分化和中分化口腔鳞状细胞癌组织比较,低分化口腔鳞状细胞癌组织中的GRP78蛋白阳性表达强度明显增高(P＜0.05).与正常口腔组织比较,GRP78 mRNA表达水平在口腔鳞状细胞癌组织中的表达增高(P＜0.05).MMP-2和MMP-9蛋白在口腔鳞状细胞癌组织中的阳性表达率均为100％(26/26).结论 GRP78和MMPs在口腔鳞状细胞癌组织中表达明显升高,提示口腔鳞状细胞癌中GRP78蛋白的表达可能与肿瘤的侵袭和转移相关.     

Survivin小干涉RNA和GRIM-19共表达质粒的构建

目的 构建survivin小干涉RNA和干扰素,维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关的基因(gene associated withretinoid interferon induced mortality-19,GRlM-1 9)共表达质粒为探讨联合基因对喉癌细胞凋亡和增殖的影响奠定基础.方法 以survivin小干涉RN...     

前列腺癌患者血清中铜、锌与铜/锌比值的变化及意义

目的探讨血清铜、锌含量与前列腺癌之间的关系，并将其与血清前列腺特异性抗原（PSA）比较，探讨其在前列腺癌诊断中价值比较。方法采用原子吸收分光光度法测定76例前列腺癌患者、125例前列腺增生患者和191例健康男性的血清铜、锌含量。结果前列腺癌组血清锌明显低于健康对照组，血清铜和铜/锌比值明显高于健康对照组（P〈0.05）。前列腺癌组血清铜及铜/锌比值与前列腺增生组比较未见显著性差异;前列腺癌组血清锌低于前列腺增生组（P〈0.05）。前列腺增生组血清锌与健康对照组比较未见显著性差异;前列腺增生组血清铜和铜/锌比值高于健康对照组（P〈0.05）。PSA在4.0-10.0ng/ml灰色区域的前列腺癌组，血清锌ROC-AUC（receiver operator characteristic curve-area under curve）为66%，高于PSA的ROC-AUC。结论血清铜、铜/锌比值升高及血清锌降低可能是前列腺癌发生的危险因素，血清锌在PSA（4.0～10.0）ng/ml灰色区域的前列腺癌诊断效率高于PSA，其可能为前列腺癌的诊断提供有价值的指标。     

鼠双微体基因2与恶性肿瘤相关性的研究进展

鼠双微体基因2（murine doubleminute 2,MDM2）是一种癌基因,MDM2基因的扩增或过度表达与多种恶性肿瘤的发生和发展密切相关,本文主要对MDM2基因与恶性肿瘤的相关性进行综述。1 MDM2基因MDM2是1987年克隆出来的一个高度扩增的基因[1],存在于一个含有双微体（double minutes,DM）的自发转化小鼠Balb/c3T3成纤维细胞系中。     

Survivin-siRNA对裸鼠前列腺癌生长的影响

目的研究survivin-siRNA对前列腺癌裸鼠移植瘤生长的作用，探讨survivin与前列腺癌发生、发展的关系。方法人前列腺癌细胞PC-3M荷瘤裸鼠18只随机分为3组：mock组（n=6），psi-scrambled组（n=6）和pSi-sur2组（n=6）。通过电子穿孔仪将质粒转入裸鼠移植瘤内，20d后处死动物，计算抑瘤率。利用Western blot检测survivin蛋白表达水平，免疫组化SP法检测增殖指数变化；TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡的变化。结果体内实验表明，pSi-sur2组与其他两对照组比较裸鼠移植瘤生长速度明显减慢（P〈0．01），肿瘤组织survivin蛋白表达及肿瘤增殖指数显著降低（P〈0．01），而肿瘤凋亡显著增加（P〈0．01）。结论通过RNA干扰技术抑制survivin的表达，在裸鼠体内可显著抑制前列腺癌生长。     

RNA干扰抑制乳腺癌MCF-7细胞鼠双微体-2基因表达及细胞增殖的实验研究

目的 研究乳腺增生症、乳腺导管内癌和浸润性乳腺癌组织中mdm2蛋白的表达及siRNA mdm2对肿瘤细胞增殖的影响.方法 采用免疫组织化学方法检测乳腺增生症、乳腺导管内癌和浸润性乳腺癌组织中mdm2蛋白的表达;将siRNA mdm2质粒转染乳腺癌MCF-7细胞,应用MTT检测siRNA mdm2对肿瘤细胞增殖的抑制作用.结果 mdm2蛋白在乳腺导管内癌组织和浸润性乳腺癌组织中的阳性表达率均为100％(18/18,20/20),在乳腺增生症组织中表达阳性率为20％(4/20).与乳腺增生症组织比较,乳腺导管内癌组织和浸润性乳腺癌组织中mdm2蛋白阳性表达率明显增高(P＜0.01).MTT结果表明转染pGCsiRNA-mdm2后MCF-7细胞生长受到抑制,与mock组和pGCsiRNA-scramble组比较差异有统计学意义(P＜0.01).转染pGCsiRNA-mdm2 72 h后与48 h比较,MCF-7细胞生长受抑制明显,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 mdm2在乳腺癌组织中存在广泛表达,其阳性表达可能促进肿瘤细胞的增殖过程.