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目的 :为获得高效表达孤儿核受体 (orphannuclearreceptor,Nurr1)基因的骨髓基质细胞。 方法 :采用分子克隆技术 ,构建携带Nurr1基因的重组腺相关病毒 (adeno associatedvirus,AAV)载体 ;与包装质粒 pAAV RC和辅助质粒phelper一起用磷酸钙法转染包装细胞HEK2 93制备具有感染活性的AAV Nurr1病毒粒子 ;用病毒上清液感染原代培养的大鼠骨髓基质细胞 (Marrowstromalcells,MSCs) ,并用免疫细胞化学方法检测阳性细胞。 结果 :经酶切鉴定和DNA测序 ,得到了序列正确的重组pAAV Nurr1;感染HT10 80细胞进行病毒滴度测定 ,每mL病毒贮存液可达 10 12 个阳性细胞 ;获得了Nurr1阳性的骨髓基质细胞 ,阳性率在 6 0 %以上。结论 :重组AAV携带的Nurr1基因能够在MSCs中表达 ,本文为进一步探讨将该细胞用于帕金森病基因治疗的可能性研究奠定了基础。 相似文献
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现在普遍认为,所谓神经于细胞是来源于神经系统或能分化为神经组织细胞、具有增殖能力及不对称分裂特性的一类细胞。它们具有自我更新、可调控定向诱导分化特性及可能与宿主神经系统发生整合等特性。在各种神经系统损伤修复、神经变性疾病的基因治疗方面具有广阔的应用前景。于细胞在神经组织中含量极微.如何获取大量纯化神经于细胞是基础研究及临床治疗研究工作的基础。 相似文献
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目的:探讨多巴胺代谢酶一单胺氧化酶-A基因EcoRV酶切位点多态性与帕金森病(Parkinson disease,PD)遗传易感性的关系.方法:选择PD病人287例(包括发病年龄小于等于50岁的早发型PD和发病年龄大于50岁的晚发型PD)和正常对照164例,利用PCR-RFLP技术分析了单胺氧化酶-A(MAO-A)EcoRV酶切位点多态性在PD病人与正常对照之间分布频率的差异.结果:MAO-A基因EcoRV酶切位点在总体对照组和总体PD病人之间的分布没有显著差异;根据发病年龄分组后,不管是早发PD病人还是晚发PD病人,与对照组相比等位基因和基因型频率均无显著性差别.按性别分组后发现,男性PD和对照组的基因型频率或是等位基因频率存在显著性差异.结论:研究结果支持MAO-A基因多态性与PD相关的假说,而且表明此关系与PD发病年龄和性别有关. 相似文献
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胃癌是世界上最高发肿瘤之一[1].目前临床大多数就诊患者均处于进展期,确诊时已发生不同程度的浸润及转移.胃癌晚期常出现多器官转移,一旦出现器官转移患者的治疗以及预后都比较差.所以寻找胃癌的早期诊断指标和找到一个特定的途径来抑制转移,或切断其作用机制在某些领域,将有可能有效地预防和控制肿瘤的侵袭、转移. 相似文献
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Nurrl基因在大鼠体外培养骨髓基质细胞的表达 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:为获得高效表达孤儿核受体(orphan nuclear receptor,Nurrl)基因的骨髓基质细胞。方法:采用分子克隆技术,构建携带Nurrl基因的重组腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)载体;与包装质粒pAAV-RC和辅助质粒phelper一起用磷酸钙法转染包装细胞HEK293制备具有感染活性的AAV-Nurrl病毒粒子;用病毒上清液感染原代培养的大鼠骨髓基质细胞(Marrow stromal cells,MSCs),并用免疫细胞化学方法检测阳性细胞。结果:经酶切鉴定和DNA测序,得到了序列正确的重组pAAV-Nurr1;感染HTl080细胞进行病毒滴度测定,每mL病毒贮存液可达10^12个阳性细胞;获得了Nurrl阳性的骨髓基质细胞,阳性率在60%以上。结论:重组AAV携带的Nurrl基因能够在MSCs中表达,本文为进一步探讨将该细胞用于帕金森病基因治疗的可能性研究奠定了基础。 相似文献
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目的 探讨多巴胺代谢酶—单胺氧化酶A(monoamine oxidase A,MAO—A)基因Fnu4H Ⅰ酶切位点多态性与帕金森病(Parkinson‘s disease,PD)遗传易感性的关系。方法 应用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性技术分析了MAO—A基因Fnu4H Ⅰ酶切位点多态性在PD患者与正常对照之间分布频率的差异。结果 PD组和对照组的G等位基因的频率分别为0.613和0.527(P=0.039),TT基因型频率分别为0.303和0.415(P=0.014),GG基因型频率分别为0.564和0.451(P=0.021)。根据发病年龄分组后,表明这种差异主要存在于早发性PD和对照组之间,G等位基因在早发PD组和对照组中的频率分别为0.642和0.527(P=0.029);GG基因型频率分别为0.585和0.451(P=0.032);按性别分组后发现差异仅存在于男性PD和对照组之间,G等位基因的频率在男性PD组和对照组中分别为0.669和0.500(P=0.005)。结论 MAO—A基因Fnu4H Ⅰ位点在对照组和PD患者之间的分布差异有显著性,G等位基因和GG基因型频率在PD组中较高,支持MAO—A基因多态性与PD相关的假说,而且与PD发病年龄和性别有关。 相似文献
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目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)是否通过抑制肺泡Ⅱ型上皮细胞向肌成纤维细胞的转化,进而发挥其抗纤维化的作用及其机制。方法培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞系RLE-6TN细胞,用5μg/L的TGF-β1诱导分化,并分为对照组、转化生长因子(TGF)-β1刺激组、BMSCs干预组。采用倒置相差显微镜观察RLE-6TN细胞的形态变化;免疫荧光法检测E-钙黏蛋白(E-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的定位;Western blotting法检测E-cad、α-SMA、p-Smad3、Snail1蛋白的表达。结果在TGF-β1的诱导下,肺泡Ⅱ型上皮细胞逐渐向肌成纤维细胞发生形态改变,由上皮细胞的鹅卵石状变成间充质细胞的梭形或纺锤形,且伴随着上皮标志物E-cad表达降低,而间充质细胞标志物α-SMA表达上调;给予BMSCs干预后,间充质化有所抑制,表现于细胞形态趋于上皮型,且上皮标志物E-cad表达上调,间质标志物α-SMA表达减少。与对照组相比,TGF-β1刺激组p-Smad3、Snail1蛋白表达上调。给予BMSCs干预后p-Smad3、Snail1蛋白表达显著降低。结论 BMSCs可能通过阻断TGF-β1/Smad3信号转导通路,抑制肺泡Ⅱ型上皮细胞向肌成纤维细胞的转化,从而抑制上皮细胞-间充质转化的进程。 相似文献
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分析目前基础医学形态学实验教学理念、手段、内容的改革发展趋势。结合传统教学和虚拟教学方法,转变形态学实验教学验证理论的性质,尝试进行学科融合、双语思维、科研能力等教学改革,完成知识传授、能力培养和素质教育的教学目标。 相似文献