环巴胺对佐剂性关节炎大鼠关节软骨细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察Hedgehog(Hh)信号通路抑制剂环巴胺对体外培养的佐剂性关节炎(AA)大鼠关节软骨细胞增殖和凋亡的影响.方法 SD大鼠足趾皮内注射弗氏完全佐剂制备AA模型(模型组),对照组足趾皮内注射等量生理盐水;观察继发侧足肿胀,28 d后,HE染色评价踝关节形态学变化;胰酶-胶原酶消化培养AA大鼠软骨细胞,采用甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原染色鉴定软骨细胞,CCK-8法检测环巴胺处理对AA大鼠软骨细胞增殖的影响,Hoechst 33258检测环巴胺对AA大鼠软骨细胞凋亡影响,Western blot法检测AA大鼠软骨细胞中Hh信号通路相关蛋白(Shh、Ptch1、Gli1)的表达情况.结果 第12天,AA大鼠继发侧关节肿胀明显,HE染色表明AA大鼠踝关节破坏明显;Ⅱ型胶原和甲苯胺蓝染色证实成功培养AA大鼠软骨细胞;不同剂量的环巴胺可促进AA大鼠软骨细胞增殖,抑制其凋亡,降低Shh、Ptch1、Gli1 蛋白表达.结论 环巴胺可促进AA大鼠软骨细胞的增殖,抑制其凋亡,其机制与抑制AA大鼠软骨细胞Hh信号通路有关.     

白藜芦醇抑制低浓度H2O2处理佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞增殖的机制研究

目的 探讨抗氧化剂白藜芦醇(Res)对低浓度H2 O2处理的佐剂性关节炎(AA)大鼠成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖的抑制作用.方法 弗氏完全佐剂足趾皮下注射SD雄性大鼠,建立AA模型,14 d后股动脉放血处死AA大鼠,取血清检测氧化应激指标,组织块培养法培养大鼠滑膜细胞,CCK-8法观察不同浓度的H2O2对FLS的增殖影响,Western blot法检测氧化应激相关蛋白去乙酰化酶3(SIRT3)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)蛋白的表达.结果 AA模型大鼠血清氧化应激指标升高,体外实验表明,随着Res的浓度增加,低浓度H2O2处理的AA大鼠FLS增殖受抑制,SIRT3、MnSOD蛋白表达降低.结论 Res可减轻AA大鼠体内的氧化应激状态,机制与降低抗氧化应激蛋白SIDT3、MnSOD的表达有关.