人癌胚抗原重组痘苗病毒转染树突状细胞体外诱导的抗肿瘤免疫

目的：研究人癌胚抗原重组痘苗病毒（rV-CEA)转染外周血树突状细胞（DC）后在外体诱导的抗CEA分泌性肿瘤免疫。方法：分离晚期结肠癌患者的外周血单核细胞，在体外用人重组粒－巨噬细胞集落刺激因子（GM－CSF）及白细胞介素4（IL－4）培养成DC，再用rV-CEA转染DC后激发自体T细胞，观察其体外激发自体T细胞的增殖能力及其诱导的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）对自体CEA分泌性肿瘤细胞的杀伤活性，并与野生型痘苗病毒（W－VV）及无病毒转染的DC所激发的T细胞进行比较。结果：经rV-CEA转染的DC能显著刺激自体T细胞的增殖，其激活的T细胞对CEA分泌性自体肿瘤细胞具有特异性杀伤作用。结论：rV-CEA转染的DC可以诱导体CEA分泌性肿瘤免疫。     

胃肠道癌患者血清中抗癌胚抗原(CEA)抗体的检测及意义

目的：探讨循环中抗癌胚抗原（ＣＥＡ）特异性抗体的情况，评价ＣＥＡ及抗体的联合检测在胃肠道癌诊断中的作用。方法：用放免法检测血清中 ＣＥＡ含量，用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测抗 ＣＥＡ ＩｇＧ抗体，用竞争抑制法检测抗体的特异性。结果：胃肠道癌患者血清 ＣＥＡ含量升高者（≥１５ ｎｇ／ｍｌ）为 ３０．９％（２１／６８），抗 ＣＥＡ ＩｇＧ抗体阳性者为３５．３％（２４／６８），ＣＦＡ及抗 ＣＥＡ抗体的联合检测可使阳性率提高到５４．３％（３７／６８）；胃肠道良性疾病患者（多发性息肉、溃疡、胰腺炎等）血清ＣＥＡ升高者为３．３％（１／３０），抗 ＣＥＡ　ＩｇＧ抗体阳性者为 ３．３％（１／３０）；健康对照组血清 ＣＥＡ升高者为 ０，抗 ＣＥＡ ＩｇＧ抗体阳性者为 ２．５％（１／４０）。结论：胃肠道癌患者血清中抗癌胚抗原（ＣＥＡ）抗体的检出率较高，这些抗体可作为胃肠道癌的一种肿瘤标志物。     

人血管生成素的基因克隆及真核表达

血管生成素 (angiogenin ,ANG)是存在于正常血浆及实体肿瘤组织中的一种属于核糖核酸酶超家族[1] ,分子量为 14 1kD、pI9 5的蛋白质 ,基因定位于染色体 14q11。ANG是一种能有效促进新生血管形成的刺激因子 ,具有很强的促血管生成作用。因此开展ANG的相关研究在损伤修复及组织工程学中极有意义。本文旨在构建ANG真核表达载体 ,转染人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) ,研究其在HUVEC中的表达情况 ,为进一步研究ANG对HUVEC生长状况的影响以及ANG在组织工程学中的应用奠定基础。1　材料与方法1 1　材料　EcoRⅠ、BamHⅠ为Promega产品 ,…     

两个抗普通型急性淋巴母细胞性白血细胞抗原(CLLA)的单克隆抗体产生及鉴定

用杂交瘤技术制备了两个J_5样单克隆抗体分泌杂交瘤株55,79。用间接免疫荧光法检查发现,55、79单克隆抗体与15个不同白血病或淋巴瘤细胞系、人外周血单个核细胞、PHA转化人外周血淋巴母细胞、中性粒细胞、红细胞、血小板及人骨髓细胞的反应性与J_5单克隆抗体的反应性十分相似(见表1)。此二抗体与11例急性白血病患者白血细胞反应性与J_5抗体完     

血管形成素在宫颈鳞癌组织中的表达

目的：观察血管形成素（angiogenin,ANG）在宫颈鳞癌组织中的表达情况并探讨其临床病理意义。方法：应用免疫组化方法对48例石蜡包埋宫颈鳞癌组织切片进行ANG蛋白表达的检测,并分析其与宫颈癌患者年龄、肿瘤分化程度和浸润的关系。结果：48例宫颈癌中全部ANG蛋白免疫染色为阳性,分布部位在细胞浆和细胞核,细胞类型以癌细胞、间质成纤维细胞和血管内皮细胞表达为主。高分化组与低分化组之间（P=0.0032）、中分化组与低分化组之间ANG表达的差异有统计学意义（P=0.0265）,有浸润和无浸润组之间差异有显著性（P=0.0184）。结论：ANG蛋白在宫颈鳞癌中普遍表达,且表达水平与肿瘤分化程度以及浸润有关,提示ANG可能参与宫颈癌的发生发展。     

钙离子载体在诱导人外周血单核细胞分化为树突状细胞中的作用

目的研究钙离子载体(CI)能否诱导人外周血单核细胞(PBMC)分化为树突状细胞(DC)，并初步探讨其信号转导途径。方法分离健康献血者的PBMC，在体外用CI(A23187)或人重组粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子(rhGM—CSF)和CI培养40h，或rhGM-CSF和白细胞介素4(IL-4)培养7d，部分PBMC预先用W-7或CsA或K35926处理30min后，再加入上述细胞因子或CI。相差显微镜下观察细胞形态，流式细胞仪检测细胞表面CD14、CD80、CD86、CD83等分子的表达，MTT比色法检测其对同种异体混合T淋巴细胞的刺激增殖作用。结果健康献血者的PBMC经CI培养40h，或rhGM—CSF与CI培养40h，或rhGM-CSF与IL-4培养7d，均可获得DC的典型形态和表面分子的表达，包括CD14表达下调、共刺激分子(CD80、CD86)表达上调，以及较强刺激同种异体混合T淋巴细胞增殖的作用；CI诱导的DC其CD14分子的下调及CD83分子的上调更明显，刺激混合T淋巴细胞的增殖能力更强；rhGM-CSF可协同CI诱导PBMC向DC的分化。经rhGM—CSF及CI处理的PBMC，其形态、表面标志物及对T细胞的刺激增殖能力，均受到W-7或CsA或KT5926不同程度的抑制；而rhGM-CSF及IL-4所诱导的PBMC其形态、表面分子的表达以及刺激T细胞增殖的作用却不受上述抑制剂的影响。结论CI可快速诱导PBMC向DC分化，其分化过程可能受控于Ca^2 /钙调蛋白及其下游的多个细胞信号转导途径的调节。     

人血管生长素的亚细胞定位

已有大量研究表明血管生成素（angiogenin，ANG）与肿瘤的快速生长和转移有密切的关系，肺癌、胰腺癌、乳腺癌等患者的外周血血清中，ANG的水平明显升高，血清ANG的水平与这些肿瘤的发展及转移呈显著正相关，因此，可以检测血清中ANG的水平来预测肿瘤的发生与发展情况。此外，ANG对于创伤、烧伤及血循环较差的股骨头、半月板等损伤的修复具有较大的临床应用价值。在本研究中我们构建了人ANG真核表达质粒，转染人脐静脉内皮细胞（HUVEC）进行表达，并作了初步的亚细胞定位。     

鳞状细胞癌的研究进展

鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)简称鳞癌,是发生在皮肤、附属器或黏膜的恶性肿瘤,主要从有鳞状上皮覆盖的皮肤开始。有报道认为鳞状细胞癌是几大恶性肿瘤之一,它的危险性比基底细胞癌要高得多。由于近年来SCC的发病率越来越高,特别是在西方发达国家,比如美国,平均每年大约有25万多人患上鳞状细胞癌,     

从随机肽库中筛选与β1肾上腺素能受体有结合活性的小肽

目的用噬菌体肽库技术筛选与β1肾上腺素能(β1-AR)受体有结合活性的小肽,为初步建立一种检测受体数目的方法和研究模拟小肽的生物学活性打下基础。方法以合成β1-AR细胞膜外第2环多肽序列为靶分子,对噬菌体随机12肽库进行亲和筛选,并用酶联免疫吸附分析法(ELISA)和竞争抑制实验鉴定阳性克隆的结合性和特异性。结果经3轮筛选,阳性克隆得到富集,在30个阳性克隆中,有2个阳性克隆可与靶分子有较强结合活性,其中1个能特异性阻断抗β1-AR兔血清多抗与靶分子结合。结论该小肽与靶分子有特异性结合。